Реакция непрямой гемагглютинации

В некоторых случаях комплекс антигенов с антителами не виден

невооруженным глазом.

В таких случаях антигены адсорбируют на более крупных

частицах-носителях (эритроцитах, частицах латекса), получая антигенный

эритроцитарный диагностикум.

Последующая агглютинация специфическими антителами таких частиц позволяет видеть агглютинат невооруженным глазом.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА) выявляет антитела

сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который

представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.

Эритроциты с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с

соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и

выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки.

РНГА ставят в пластиковых планшетах или в пробирках с разведениями

сыворотки крови, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.

Иногда применяют антительный эритроцитарный диагностикум – эритроциты,

на которых адсорбированы антитела.

Такую реакцию называют РОНГА – реакцией обратной непрямой гемагглютинации.

24. Взаимодействие антигена с антителом in vitro. Серологические реакции. Реакция связывания комплемента.

Реакции антиген-антитело, происходящие in vivo – это важнейший защитный

механизм устранения чужеродных антигенов из организма путем образования

иммунных комплексов. Серологическими реакциями называются реакции

антиген-антитело, происходящие in vitro (в пробирке). Они используются для

количественного и качественного определения антигенов и антител в исследуемом

материале.

При постановке серологических реакций учитывают следующие условия:

наличие изотонического раствора (электролита), реакция рН (близкая к

нейтральной) и температура среды (от 20 до 37°С).

Серологические реакции применяются с целью решения следующих задач:

- для выявления неизвестного антигена (микроорганизма, белка и т.д.);

при этом используют диагностические иммунные антисыворотки, которые

получают путем многократной иммунизации лабораторных животных

соответствующими антигенами;

- для определения наличия и титра антител в сыворотке крови;

обнаружение антител проводят с использованием специальных антигенных диагностикумов (взвеси эталонных инактивированных микроорганизмов).

Таким образом, в серологических реакциях один из двух основных

компонентов (антигены или антитела) всегда должен быть известным.

В прямых серологических реакциях результат взаимодействия антигенов с

антителами наблюдается непосредственно по изменению оптических свойств

раствора (образование хлопьев, помутнение, опалесценция). К прямым

серологическим реакциям относятся реакции агглютинации, преципитации и

флоккуляции.

В непрямых серологических реакциях для визуализации результата

взаимодействия антигенов и антител используются индикаторные системы5

(эритроциты, комплемент, лабораторные животные). К непрямым серологическим

реакциям относятся реакция связывания комплемента, реакция непрямой

гемагглютинации, реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой, и

др.