Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

2) Жидкостная хроматография — вид хроматографии, в которой подвижной фазой (элюентом) служит жидкость, а неподвижной – твердый сорбент с нанесенной на его поверхность жидкостью или гелем:

•колоночная жидкостная хроматоргафия – через колонку, заполненную неподвижной фазой, пропускают порцию разделяемой смеси веществ в потоке элюента (под давлением или под действием силы тяжести);

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

•тонкослойная жидкостная хроматография – элюент перемещается под действием капиллярных сил по плоскому слою сорбента, нанесенного на стеклянную пластинку или металлическую фольгу, вдоль пористой полимерной пленки, по поверхности цилиндрической кварцевой или керамической палочки, по полоске хроматографической бумаги.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

•жидкостная хроматография высокого давления — вариант хроматографии с использованием гранул размером до 3 мк, при которой протекание элюента через колонку достигается при давлении в 200—300 атм.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

3) Ионообменная хроматография основана на различной способности разделяемых ионов к ионному обмену с фиксированными ионами сорбента, образующимися в результате диссоциации ионогенных групп последнего. Для разделения катионов используют катиониты, для

разделения анионов - аниониты. Элюентом в первом случае служит раствор кислоты, во втором - раствор щелочи.

Разделение ионов регулируют подбором оптимальных значений рН элюента.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

4) Бумажная распределительная хроматография.

Этот метод основан на том, что органический растворитель, перемещаясь вдоль полос хроматографической ( фильтровальной) бумаги, увлекает за собой растворенные в нем аминокислоты. Каждая аминокислота в своем движении достигает определенного уровня.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

4. Саузерн-блоттинг — метод, применяемый в молекулярной биологии для выявления определённой последовательности ДНК в образце. Метод Саузерн-блоттинга сочетает электрофорез в агарозном геле для фракционирования ДНК с методами переноса разделённой по длине ДНК на мембранный фильтр для гибридизации.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

5. Иммуннохимические основаны на специфическом связывании определяемого соединения соответствующими антителами.

Индикация образующегося комплекса «антиген-антитело» может быть осуществлена, если в один из исходных компонентов реакционной системы ввести метку, которая легко детектируется соответствующим высокочувствительным физико-химическим методом.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

1) Иммуноферментный метод.

Иммуноферментный анализ — вид иммунохимического анализа, основанный на высокоспецифической иммунологической реакции антигена с соответствующим антителом с образованием иммунного комплекса, для выявления которого используют в качестве метки фермент или ферментзависимое вещество.

Методы изучения строения

нуклеиновых кислот

2) Радиоиммунный анализ.

Радиоиммунный анализ — метод количественного определения биологически активных веществ в биологических жидкостях, основанный на конкурентном связывании искомых стабильных и аналогичных им меченных радионуклидом веществ со специфическими связывающими системами.