29. Генетический аппарат бактерий. Формы обмена генетическим материалом у бактерий.

Генетический материал, в т.ч. плазмиды – внехромосомные генетические элементы, располагаются свободно в цитоплазме, не отграничены от нее никакими мембранами, но связаны с опреде­ленными рецепторами на цитоплазматической мембране. Поскольку длина хромо­сомы во много раз превышает длину бактериальной клетки, хромосома особым компактным образом в ней упакована: молекула хромосомной ДНК находится в суперспирализованной форме и свернута в виде петель. Петли в центре нуклеоида объединяются за счет связывания ДНК с сердцевинной структурой, пред­ставленной молекулами особого класса РНК. Такая упорядоченная упа­ковка обеспечивает постоянную транскрипцию отдельных оперонов хромосомы и не препятствует ее репликации.

Хотя бактерии являются гаплоидными организмами, т. е. имеют один набор ге­нов, содержание ДНК у них непостоянно.

У бактерий очень часто помимо хромосомного генома имеется дополнительный плазмидный геном, наделяющий их важными биологическими свойствами, неред­ко — специфическим (приобретенным) иммунитетом к различным антибиотикам и другим химиопрепаратам.

У бактерий в естественных условиях передача генетической информации проис­ходит не только по вертикали, т. е. от родительской клетки дочерним, но и по горизон­тали с помощью различных механизмов: конъюгации, трансдукции, трансформации.

Формы обмена генетическим материалом у бактерий:

Конъюгация – частичный перенос генетического материала из клетки-донора в клетку-реципиент при их скрещивании. Процесс конъюгации протекает через следующие стадии: установление контакта между донором и реципиентом, протаскивание нити ДНК от донора к реципиенту, достройка перенесенной нити ДНК комплементарной ей нитью в реципиентной клетке и рекомбинация между переданной хромосомой (ее фрагментами) и хромо­сомой клетки-реципиента, размножение мерозиготы и образование клеток, несущих признаки донора и реципиента.

Трансформация — перенос генетического материала, заключающийся в том, что бактерия-реципиент захватывает (поглощает) из внешней среды фрагменты чу­жеродной ДНК. Трансформация может быть спонтанной или индуцированной. Ин­дуцированная (искусственно получаемая) трансформация происходит при добавле­нии к культуре бактерий очищенной ДНК, полученной из культур тех бактерий, генетические признаки которых стремятся передать исследуемой культуре. Спон­танная трансформация происходит в естественных условиях и проявляется в воз­никновении рекомбинантов при смешивании генетически различающихся клеток. Она протекает за счет ДНК, выделяющейся клетками в окружающую среду вслед­ствие их лизиса или в результате активного выделения ДНК жизнеспособными клет­ками-донорами. Как спонтанная, так и индуцированная трансформация сводится, по сути, к поглощению трансформирующей ДНК и образованию рекомбинантов, причем спонтанная трансформация может происходить в результате взаимного об­мена ДНК.

Трансдукция — перенос генетического материала от клетки-донора клетке-ре­ципиенту с помощью бактериофагов. Различают трансдукцию неспецифическую и специфическую. Неспецифическая трансдукция — случайный перенос любого фрагмента ДНК от одной бактериальной клетки к другой. Специфическая трансдукция осуществляется только умеренными фагами, обла­дающими способностью включаться в строго определенные участки хромосомы бактериальной клетки и трансдуцировать определенные гены.

30. Микроскопический метод диагностики инфекционных болезней.

С помощью микроскопии нативного патологического ма­териала, полученного от больного, определяют вид возбудителя по его форме, вза­иморасположению клеток и способности окрашиваться определенными красителями.

31. Культуральный (бактериологический, вирусологический, микологический) метод диагностики инфекционных болезней.

Основан на выделении чистой культуры возбудителя заболевания из патологического материала и его идентификация.

32. Серологический метод диагностики инфекционных болезней.

Основан на определении специфических АТ в крови больных или переболевших инфекционными заболеваниями к соответствующим возбудителям с помощью реакций. (Реакция агглютинации, преципитации, РСК, реакция непрямой агглютинации (РНГА), Реакция торможения гемагглютинации (РТГА))

33. Аллергический метод диагностики инфекционных болезней.

Обнаруживают повышенную чувствительность макроорганизма к опр. возбудителям инфекционного заболевания или продуктам их жизнедеятельности. Используемые препараты – аллергены. Внутрикожный способ введения аллергена.

34. Биологический метод диагностики инфекционных болезней.

Заражение лаб. животных исследуемым материалом от больного с целью воспроизведения у них инфекционного заболевания или последующего выделения возбудителя.

35. Молекулярно-генетический метод диагностики инфекционных болезней.

ПЦР (Полимеразная цепная реакция) - анализ позволяет определить содержание (количество копий, титры) ДНК и РНК, провести генотипирование возбудителей, определить чувствительность к антибиотикам, прогнозировать исход болезни.

***********************************************************************************

67. Микроорганизмы, поражающие лекарственное сырье.

68. Методы контроля микробной загрязненности растительного лекарственного сырья.

Микробиологический контроль лекарственных средств. Обсеменение лекарственного сырья возможно на всех этапах его заготовки и при хранении. Активному размножению микроорганизмов способствует увлажнение растений и растительного сырья. Размножившиеся микроорганизмы вызывают изменение фармакологических свойств препаратов, полученных из лекарственных растений. Микроорганизмы могут- также попадать из окружающей среды, от людей и обсеменять лекарственные препараты в процессе их изготовления из растительного сырья. Для соблюдения санитарного режима изготовления лекарственных препаратов проводят санитарно-микробиологический контроль объектов окружающей среды предприятия и каждой серии выпускаемой лекарственной формы. Лекарственные средства для парентерального введения в виде инъекций, глазные капли, мази, пленки и др., в отношении которых имеются соответствующие указания в нормативно-технической документации, должны быть стерильными.

Контроль стерильности лекарственных средств проводят путем посева на тиогликолевую среду для выявления различных бактерий, в том числе анаэробов; при посеве на среду Сабуро выявляют грибы, главным образом рода Candida. Стерильность лекарственных средств с антимикробным действием определяют путем мембранной фильтрации: фильтр после фильтрации исследуемого препарата делят на части и вносят для подращивания задержанных микроорганизмов в жидкие питательные среды. При отсутствии роста препарат считается стерильным.