Волков Г. Л. Современные представления о системе гемостаза
.pdfГЛ АВ АЗ. Система фибринолиза плазмы крови
исходит в результате расщепления тромбином и другими трипсиноподобны ми протеиназами по Arg92 с высвобождением N-концевого пептида и обра зованием активного фермента 35 кДа [103]. Свободный тромбин активирует TAFI с низкой скоростью: A:cat реакции составляет 0,002 с-1, а КМ ~ 2 мкМ, что на порядок выше концентрации TAFI в плазме. Связывание тромбина с тромбомодулином (ТМ) повышает /ccat до 1,2 с-1 и снижает К'м до 1 мкМ, что увеличивает каталитическую эффективность реакции в 1250 раз [104]. Дру гим физиологическим активатором TAFI может быть плазмин. К'м реакции составляет 0,055 мкМ, а ксаХ — 0,0004 с-1. Скорость реакции значительно по вышается в присутствии гликозаминогликанов, и при терапевтических кон центрациях гепарина в крови каталитическая эффективность активации TAFI плазмином может составлять ~ 10 % таковой для комплекса тромбин/тромбомодулин [105].
Физиологический ингибитор TAFIa не идентифицирован. В растворе TAFIa спонтанно инактивируется. Скорость инактивации значительно возрас тает при повышении температуры (?[/2, составляет ~ 3 ч при 22 °C и ~ 8 мин — при 37 °C), снижается в присутствии субстратов и конкурентных ингибито ров (аналогов Lys). Это свидетельствует о том, что основным механизмом его инактивации являются конформационные изменения [106].
Открытие TAFI и выяснение механизма его антифибринолитического действия позволили объяснить, почему сгустки крови у больных гемофили ей лизируются быстрее, чем у здоровых лиц. Свободный тромбин активиру ет TAFI с низкой скоростью, поэтому антифибринолитический эффект это го ингибитора зависит от количества тромбина, образующегося при актива ции свертывания крови [104, 107].
Значительно сложнее охарактеризовать эффекты системы протеина С, так как ее компоненты могут оказывать противоположное по знаку влияние на активацию TAFI. С одной стороны, активация протеина С и расщепле ние фактора Va снижают количество образующегося тромбина, что должно приводить к снижению степени активации TAFI, а лейденская мутация фак тора V — к ее повышению. Это согласуется с данными о предрасположенно сти к тромбозам больных с дефектами этих компонентов [108]. С другой сто роны, связывание тромбина с ТМ повышает скорость активации как проте ина С, так и TAFI. Поскольку по кинетическим параметрам протеин С и TAFI являются примерно равноценными субстратами, а их концентрации в плазме на порядок ниже, чем для комплекса тромбин-тромбомодулин, сте пень активации этих проферментов зависит от концентрации всех компо нентов реакции. L.O. Mosnier и соавт. [109], исследуя влияние ТМ на акти вацию TAFI и стимулированный тканевым активатором плазменогена лизис сгустков нормальной плазмы, показали, что при увеличении концентрации ТМ от 0,05 до 5 нМ наблюдаются повышение степени активации TAFI и снижение скорости лизиса, а при более высокой концентрации ТМ — сни жение степени активации TAFI и соответственно увеличение скорости ли зиса. Таким образом, значительное увеличение скорости активации TAFI при образовании комплекса тромбина с ТМ свидетельствует о том, что этот комплекс может оказывать не только антикоагулянтное (как считалось в те-
160
