Цик по хашковой

Метод основан на способности ПЭГ (полиэтиленгликоля) преципитировать иммунные комплексы (т.е. комплексы Аг/Ат). По концентрации белка в преципитате судят о количестве ЦИК.

Норма для взрослых: 24 - 84 ед.

ЦИК - это нормальное явление для организма и уровень его повышается при любых острых воспалительных заболеваниях на непродолжительное время.

Высокий уровень ЦИК является один из показателей воспаления и тканевого повреждения. Высокий уровень ЦИК, как правило, коррелирует с активностью патологического процесса при аутоиммунных заболеваниях.

Низкий уровень ЦИК наблюдается редко, и как правило, бывает у маленьких детей и больных с низким содержанием белка в плазме крови.

Оценка фагоцитарного звена оценка поглотительной способности нейтрофилов

Для определения поглотительной способности нейтрофилов используется тест с частицами латекса. Для этого взвесь частиц латекса соединяют с гепаринизированной кровью больного. Вместо латекса можно использовать культуру микроорганизмов (золотистый стафилококк, кишечная палочка, дрожжеподобные грибы Candida или др.) После инкубации готовят мазок и окрашивают его.

Взвесь бактерий или

взвесь частиц латекса Кровь больного (+гепарин)

Инкубация,

фиксация, окраска мазка,

микроскопия

Затем при микроскопии мазка находят 100 нейтрофильных лейкоцитов и определяют процент активных нейтрофилов (поглотивших частицы) - фагоцитарную активность. Норма-40-80%.

Фагоцитарное число – количество бактериальных клеток, поглощенных 1 активным нейтрофилом. Норма – 1-5.

Изучение показателей фагоцитоза имеет значение в комплексном анализе и диагностике иммунодефицитных состояний: часто рецидивирующих гнойных воспалительных процессов, при длительно незаживающих ранах и т.д. Помогает в диагностике вторичных иммунодефицитных состояний, вызванных лекарственной терапией, позволяет оценивать эффективность лечения. В связи с тем, что фагоциты участвуют в элиминации иммунных комплексов, их деятельность тесно связана с системой комплемента и уровнем IgG. Эти показатели имеют значение при оценке активности процесса и эффективности терапии при аутоиммунных заболеваниях.

Частицы латекса в нейтрофильных лейкоцитах

НСТ-ТЕСТ - СПОНТАННЫЙ И СТИМУЛИРОВАННЫЙ.

Принцип метода основан на способности нейтрофилов поглощать нитросиний тетразолий и восстанавливать его в гранулы нерастворимого диформазана в виде гранул синего цвета. Восстановление НСТ обеспечивается энергией и продуктами окислительно-восстановительных реакций “метаболического взрыва”, сопровождающего процесс фагоцитоза, при котором происходит образование перекиси водорода, супероксидного аниона, синглетного кислорода.

К гепаринизированной крови добавляют НСТ, инкубируют и затем в мазках определяют процент нейтрофилов, содержащих гранулы диформазана. Это спонтанный НСТ, в норме он от 3 до 15%. Для выявления резервов бактерицидной функции нейтрофилов применяют стимулированный НСТ-тест. При этом в лунку еще добавляют стимулятор фагоцитоза (латекс, пирогенал, зимозан и т.д.). В норме стимулированный НСТ-тест на 40-80% выше спонтанного.

Это тест может быть использован для дифференциальной диагностики бактериальных (высокие результаты) и вирусных (нормальные показатели) заболеваний, протекающих с лихорадкой, лейкоцитозом, высокой СОЭ. Однако, следует помнить, что высокие показатели НСТ-теста отмечаются при паразитарных инвазиях, вирусном гепатите, грибковых поражениях легких, туберкулезе. Кроме того, высокие показатели теста наблюдаются при многих небактериальных процесах: инфаркте миокарда, переломах, оперативных вмешательствах, лейкозах, у онкологических больных.

Раствор НСТ Кровь больного (+гепарин)

Инкубация,

фиксация, окраска мазка, микроскопия

Гранулы диформазана в ядрах нейтрофилов

ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ КОМПЛЕМЕНТА ПО 50% ГЕМОЛИЗУ

Комплемент (С) - сложный комплекс белков плазмы крови, участвующих в

воспалительной реакции и иммунных процессах:

-цитолиз клеток,

-усиливают фагоцитоз в качестве опсонинов,

-вызывают дегрануляцию гранулоцитов,

-выполняют регуляторную функцию, стимулируют активность различных популяций лимфоцитов и др.

Принцип определения основан на лизисе эритроцитов барана в присутствии гемолитических антител и комплемента. Для этого готовят гемсистему: эритроциты барана + гемолитическая сыворотка (гемолитическую сыворотку получают при иммунизации кролика эритроцитами барана, т.е. это АТ к эритроцитам барана - гемолизины). В отсутствии комплемента лизис эритроцитов не идет. К гемсистеме добавляют сыворотку больного в серийных разведениях. Чем больше концентрация комплемента в крови, тем интенсивнее идет гемолиз

Норма – 40-80 СН ₅₀.

Исследованиями последних лет выявлено, что гораздо большее диагностическое значение имеет определение отдельных компонентов комплемента (С3, С4, С5 и др.). Они определяются методами ИФА, турбидиметрическим (один из видов абсорбционного фотометрического анализа, основанный на измерении интенсивности света, проходящего через суспензию, образованную частицами определяемого вещества в жидкой фазе) и другими.

Комплемент принимает активное участие в защите организма от инфекции и является объективным показателем иммунологической реактивности организма. Любой воспалительный процесс при адекватном ответе сопровождается повышением уровня комплемента разной степени выраженности. Низкое содержание комплемента наблюдается при первичных и вторичных ИД. Дефицит комплемента отмечается при заболеваниях, протекающих с образованием иммунных комплексов (Аг-Ат), что приводит к избыточному потреблению компонентов комплемента (СКВ, острый гломерулонефрит, аутоиммунная гемолитическая анемия, болезни печени, сепсис, ожоги, повреждение тканей и т.д.), а также при наследственных дефицитах компонентов комплемента. Резкое снижение комплемента наблюдается при анафилактических реакциях.

ОЦЕНКА ЦИТОКИНОВОГО И ИНТЕРФЕРОНОВОГО ПРОФИЛЯ.

В настоящее время основное место в регуляции иммунологических реакций отводится цитокинам и цитокиновой сети. Привлечение клеток в очаг воспаления, кооперация клеток иммунной системы друг с другом и другими клетками организма, созревание, дифференцировка, пролиферация и старение клеток обеспечение согласованного действия иммунной, эндокринной и нервной систем, развитие острофазной реакции – всё это невозможно без участия цитокинов.

Цитокины – регуляторные белки, образуемые активированными клетками иммунной системы, реже другими клетками (эпителием, фибробластами), обеспечивающих рост и пролиферацию многих клеток, а также межклеточные взаимодействия и иммунорегуляцию.

К цитокинам относятся интерфероны(ИФН,IF), интерлейкины (ИЛ, IL), фактор некроза опухолей (ФНО, TNF) и др.

Интерлейкины –ИЛ – цитокины, ответственные за межклеточные взаимодействия между лейкоцитами. Описано более 30 ИЛ. Они обозначаются цифрами ИЛ-1, ИЛ-2 и т.д.

По профилю цитокины можно разделить на провоспалительные и противовоспалительные,

• Провоспалительные цитокины – ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-12, фактор некроза опухолей (ФНО)- альфа, интерфероны (ИФ) альфа и гамма способствуют развитию раннего воспалительного ответа.

• Противовоспалительные цитокины – ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-13, ФНО-бета ограничивают развитие воспаления на заключительных этапах иммунного ответа.

Чаще всего определяют такие цитокины как ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8

и интерфероны альфа и гамма (α- ИНФ и γ- ИНФ).

Практическое значение цитокинов, прежде всего, связано с их участием в регуляции воспаления. С этой точки зрения можно выделить две группы цитокинов: провоспалительные и противовоспалительные. В норме в крови цитокины не определяются. Выявление цитокинов обычно отражает наличие воспаления. При определении цитокинов в различных биологических жидкостях (цереброспинальная жидкость, назальный смыв, бронхоальвеолярный лаваж, слёзная жидкость, моча и т.д.) можно говорить о локализации воспалительного процесса и о характере воспаления.

Методы определения:

• ИФА

• Проточная цитометрия

• ммунохемилюминисцентный метод

6. Задания для самостоятельной работы

Тесты по теме 2. Оценка иммунного статуса

1. Иммунологическое обследование человека сводится к:

а) оценке состояния иммунной системы,

б) выявлению чужеродных или собственных антигенов,

в) обнаружению признаков клеточных специфических иммунных реакций.

г) обнаружению признаков гуморальных специфических иммунных реакций.

2. Оценка иммунного статуса организма начинается:

а) с ориентировочного клинического этапа

б) с микробиологическго этапа

в) с эпидемиологического этапа

3. Ориентировочный клинический этап оценки иммунного статуса включает в себя:

а) сбор и оценку иммунологического анамнеза

б) оценку функциональной активности фагоцитов

в) оценку функциональной активности лимфоцитов

4. Оценка иммунологического анамнеза включает в себя:

а) оценку частоты инфекционных заболеваний,

б) оценку характера течения инфекционных заболеваний,

в) оценку выраженности температурной реакции,

г) наличие очагов хронической инфекции.

д) наличие признаков аллергизации

5. Для иммунодиагностики оцениваются следующие результаты клинического анализа крови:

а) содержание гранулоцитов.

б) содержание моноцитов

в) содержание лимфоцитов

6. Для иммунодиагностики с помощью бактерио­логических, вирусологических и серологических исследований выяв­ляется:

а) бактериосительство.

б) вирусоносительство

в) состав нормальной микрофлоры ротовой полости

7. На втором этапе в иммунологической лаборатории проводится исследование крови с использованием:

а) иммунологических тестов 1-го уровня.

б) иммунологических тестов 2-го уровня

в) иммунологических тестов 3-го уровня

8. Тесты 1-го уровня позволяют выявить:

а) грубые нарушения со сто­роны иммунной системы

б) определение субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4⁺ и CD8⁺)

в) супрессорный потенциал

9. Грубые нарушения со стороны иммунной системы определяются :

а) путем определения в крови процентного содержания и абсолютного количества Т-лимфоцитов

б) путем определения в крови процентного содержания и абсолютного количества В-лимфоцитов

в) путем определения уровня и ммуноглобулинов крови

г) путем оценки показателей неспецифической защиты организма.

10. Для выявления и подсчета Т- и В-лимфоцитов наиболее точными являются:

а) методы, состоящие в выявлении поверхностных маркеров антигенов системы CD.

б) методы, состоящие в выявлении способности фиксировать на своей поверхности эритроциты

в) методы, состоящие в выявлении способности фиксировать на своей поверхности тромбоциты

11. Маркером Т-лимфоцитов служит антиген:

а)CD3

б)CD8

в)CD22

12. Маркером В-лимфоцитов служит антиген

а) CD22,

б)CD3

в)CD8

13. Маркером хелперных Т-лимфоцитов служит антиген

а) CD4

б)CD3

в)CD8

14. Маркером цитотоксических лимфоцитов служит антиген

а) CD8

б) CD4

в)CD3

15. Маркерами естественных киллеров служат антигены

а) CD 16

б)CD56.

в) CD3

16. Стандартные моноклональные антитела и наборы реактивов позволяют в иммунолюминесцентных и цитотоксических тестах выявить:

а) В-лимфоциты,

б) Т-лимфоциты,

в) субпопуляции В- и Т-лимфоцитов.

17. Содержание в крови здорового взрослого человека Т-клеток:

а) 40-70% общего числа лимфоцитов

б) 10-30% общего числа лимфоцитов

в) 5-10 % общего числа лимфоцитов

18. Содержание в крови здорового взрослого человека В-лимфоцитов:

а) 25-30% общего числа лимфоцитов

б) 40-70% общего числа лимфоцитов

в) 5-10 % общего числа лимфоцитов

19. Т- и В лимфоциты выявляют:

а) по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты барана или мыши, образуя видимые под микроскопом структуры, именуемые розетками

б) с помощью поверхностных маркеров антигенов системы CD.

в) по способности формировать розетки с эритроцитами, нагруженными иммуноглобулинами G или белками системы комплемента

20. В-лимфоциты могут быть выявлены:

а) по способности формировать розетки с эритроцитами, нагруженными иммуноглобулинами G или белками системы комплемента.

б) по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты барана или мыши, образуя видимые под микроскопом структуры, именуемые розетками

в) с помощью поверхностных маркеров антигенов системы CD.

21. Содержание в крови здорового взрослого человека нулевых лимфоцитов:

а) 30% общего числа лимфоцитов

б) 70% общего числа лимфоцитов

в) 10 % общего числа лимфоцитов

22. Нулевые лимфоциты:

а) не имеют маркеров Т- или В-клеток.

б) имеют маркеры В-клеток.

в) имеют маркеры Т-клеток.

23. К тестам 1-го уровня относится определение:

а) концентрации сывороточных иммуноглобулинов IgM

б) концентрации сывороточных иммуноглобулинов IgG

в) концентрации сывороточных иммуноглобулинов IgА

24. Для определения концентрации сывороточных иммуноглобулинов используются :

а) антисыворотки к тяжелым цепям иммуноглобулинов разных классов,

б) реакция преципитации

в) нефелометрия

г) турбидометрия

25. Нефелометрия выявляет:

а) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по светорассеянию

б) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по мутности

в) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по маркерам

26.Турбидометрия выявляет:

а) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по мутности.

б) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по светорассеянию

в) взаимодействие иммуноглобулина с антителами по маркерам

27. Уровень сывороточных иммуноглобулинов характеризует функциональное состояние:

а) В-системы иммунитета

б) Т-системы иммунитета

в) состояние факторов неспецифической резистентности

28. Для оценки факторов неспецифической защиты определяют:

а) фагоцитарную активность лейкоцитов крови.

б) уровень сывороточных иммуноглобулинов

в) уровень Т-лимфоцитов

29. О фагоцитарной активности лейкоцитов судят по способности клеток к:

а) фагоцитозу нейтральных частиц латекса.

б) фагоцитозу эритроцитов

в) фагоцитозу микробных клеток.

30. Фагоцитарное число представляет собой:

а) процент фагоцитирующих клеток

б) среднее число частиц поглощенных одним фагоцитом

в) обще число фагоцитов крови

31.Фагоцитарный индекс представляет собой:

а) среднее число частиц поглощенных одним фагоцитом

б) процент фагоцитирующих клеток

в) обще число фагоцитов крови

32. К тестам 2-го уровня относится определение:

а) субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4⁺ и CD8⁺),

б) соотношений субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4⁺ и CD8⁺),

в) оценка функциональной активности субпопуляций Т-лимфоцитов,

г) оценка супрессорного потенциала,

д) анализ цитокинов и их рецепторов.

33.Функциональная активность лимфоцитов может быть оценена:

а) по количеству бластных форм, нарастающих после активации клеток.

б) по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты барана или мыши, образуя видимые под микроскопом структуры, именуемые розетками

в) с помощью поверхностных маркеров антигенов системы CD

34. Потенциальную способность лимфоцитов к активации оценивают после стимуляции:

а) митогенами,

б) иммуноглобулинами

в) антибиотиками.

35.Количество бластных форм может быть определено при:

а) микроскопии.

б) эндоскопии

в) опсонизации

36.Радиометрический метод определения бластных форм оценивает:

а) интенсивность включения радиоактивных предшественников (тимидина) в ДНК культивируемых клеток.

б) интенсивность включения аденина в ДНК культивируемых клеток

в) интенсивность включения радиоактивных предшественников (тимидина) в РНК культивируемых клеток

37. Для оценки иммунной защиты слизистых используется определение:

а) секреторных иммуноглобулинов IgA

б) сывороточных иммуноглобулинов IgA

в) сывороточных иммуноглобулинов IgМ

38. Уровень активности фагоцитов оценивают по их способности к:

а) фагоцитозу

б) пиноцитозу

в) некрозу

39. НСТ-тест основан на выявлении способности клеток восстанавливать: а) бесцветный реактив нитросиний тетразоль в краситель, окрашивающий активную клетку в синий цвет.

б) бесцветный реактив нитросиний тетразоль в краситель, окрашивающий активную клетку в красный цвет

в) бесцветный реактив нитросиний тетразоль в краситель, окрашивающий активную клетку в зеленый цвет

40. Иммунный статус человека складывается из:

а) специфических механизмов резистентности

б) неспецифических механизмов резистентности

в) аллергических механизмов резистентности

41. Оценка иммунного статуса складывается из:

а) только количественной оценки основных факторов резистентности

б) только качественной оценки основных факторов резистентности

в) качественной и количественной оценки факторов резистентности

42. В норме процент фагоцитирующих лейкоцитов составляет :

а) 40-80%

б) 10-20 %

в) 20-30 %

43. В норме фагоцитарный индекс составляет :

а) 1-5

б) 10-20

в) 20-30

44. Определение количества лимфоцитов по маркерам проводится с помощью:

а) люминисцентной микроскопии

б) световой микрокопии

в) автоматического подсчета клеток

45. Функциональную активность Т-лимфоцитов косвенно оценивают с помощью:

а) кожных проб

б) реакции развернутой агглютинации

в) реакции Асколи

46. Оценка гуморального иммунного ответа основана на выявлении:

а) антител в сыворотке крови

б) антигенов в сыворотке крови

в) лимфоцитов

47. Наиболее информативным считается определение:

а) определение количества АТ в начале заболевания

б) определение количества АТ в конце заболевания

в) определение количества АТ в динамике заболевания

48. Реакция торможения миграции лейкоцитов основана:

а) на способности лимфоцитов после повторного контакта с антигеном продуцировать лимфокины

б) на способности фагоцитов после повторного контакта с антигеном продуцировать лимфокины

в) на способности лимфоцитов контактировать с антигеном

49. Показателем развития гуморального иммунного ответа является:

а) нарастание титра специфических антител в сыворотке крови

б) убывание титра специфических антител в сыворотке крови

в) отсутствие изменений титра специфических антител в сыворотке крови

50. К основным задачам клинической иммунологии относятся:

а) диагностика врожденной недостаточности иммунной системы

б) диагностика вторичных иммунодефицитов

в) диагностика аутоиммунных заболеваний

г) специфическая диагностика аллергии

51. Для постановки диагноза иммунопатологического состояния используют:

а) сбор иммунологического анамнеза

б) постановка диагностических тестов in vivo

в) постановка диагностических тестов in vitro

52. К диагностическим тестам in vivo относятся следующие:

а) кожные тесты

б) провокационные тесты

в) элиминационные пробы

6. Рекомендуемая литература

Основная литература¹

п/№	Наименование	Автор (ы)	Год, место издания	Кол-во экземпляров
				в библ.	на каф.
1	Медицинская микробиология, иммунология и вирусология [Электронный ресурс]: учебник. Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/ru/book/ISBN9785299004250.html	А. И. Коротяев, С. А. Бабичев.	Москва: Гэотар-Медиа, 2012.	330 точек доступа
2	Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник: в 2 т. [с прил. на компакт-диске].	ред.: В. В. Зверев, М. Н. Бойченко	Москва: Гэотар- Медиа, 2011.	296
3	Медицинская микробиология, вирусология и иммунология [Электронный ресурс]: учебник в 2т. Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/ru/book/ISBN9785970414187.html	ред.: В. В. Зверев, М. Н. Бойченко	Москва: Гэотар-Медиа, 2010.	330 точек доступа
4	Медицинская микробиология, вирусология и иммунология [Электронный ресурс]: учебник в 2т. Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/ru/book/ISBN9785970425855.html	ред.: В. В. Зверев, М. Н. Бойченко	Москва: Гэотар-Медиа, 2013.	330 точек доступа