- •Методические рекомендации к практическому/семинарскому (лабораторному) занятию для студентов
- •1. Краткая информация
- •2. Актуальность (мотивационная характеристика темы)
- •3. Учебные цели
- •4. Межпредметные и внутрипредметные связи
- •5. Вопросы для подготовки к занятию, основные термины и определения
- •1. Количественные методы
- •2. Оценка функциональной активности клеток иммунной системы
- •Методические рекомендации к практическому/семинарскому (лабораторному) занятию для студентов
- •3. Учебные цели
- •4. Межпредметные и внутрипредметные связи
- •5. Вопросы для подготовки к занятию, основные термины и определения
- •Количественные методы. Тесты розеткообразования
- •Определение субпопуляций лимфоцитов в реакции иммунофлюоресценции (риф) с помощью мкат
- •Рбтл – реакция бласттрансформации лейкоцитов.
- •Ртмл - реакция торможения миграции лейкоцитов
- •Оценка гуморального звена иммунитета определение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии по манчини
- •Цик по хашковой
- •Оценка фагоцитарного звена оценка поглотительной способности нейтрофилов
- •3.6.2Дополнительная литература2
5. Вопросы для подготовки к занятию, основные термины и определения
Изучаемые вопросы:
Определение понятий иммунный статус и иммунограмма.
Лейкоциты крови, виды лейкоцитов, их морфология и основные функции.
Определение понятий лейкоцитоз, лейкопения, лейкоцитарная формула, относительные и абсолютные показатели лейкоцитарной формулы, основные причины сдвигов в лейкоцитарной формуле/
Схема лабораторной оценки иммунного статуса.
Методы оценки различных звеньев иммунной системы (клеточного, гуморального, фагоцитарного, системы комплемента и цитокинов).
Правила оценки результатов иммунограммы.
Практическая работа:
Изучить демонстрационные препараты, зарисовать:
мазкок крови, окраска по Романовскому –Гимза, , зарисовать виды лейкоцитов
определение субпопуляций лимфоцитов (иммунохимический метод)
реакция бласттрансформации
определение фагоцитарной активности (фагоцитоз с латексом)
НСТ- тест
Изучить результат реакции торможения миграции лимфоцитов в капиллярах, зарисовать.
Изучить результат определения уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови по Манчини, зарисовать.
Проанализировать результаты иммунограммы
Иммунограмма – это набор иммунологических тестов, позволяющий оценить состояние иммунной системы.
При оценке иммунного статуса должны соблюдаться основные правила:
- главным критерием является клиническая картина,
- исследования должны быть комплексными,
- наиболее показательными являются исследования в динамике
Первым этапом в оценке иммунного статуса являются гематологические показатели: СОЭ, количество лейкоцитов в 1л крови и лейкоцитарная формула, а также количество эритроцитов, содержание гемоглобина, цветовой показатель.
Увеличение количества лейкоцитов в периферической крови выше 10,0×109г/л называется лейкоцитозом, уменьшение - ниже 4,0 ×109г/л называется лейкопенией. Лейкоцитарная формула – процентное соотношение разных видов лейкоцитов в мазке крови. Норма: нейтрофилы палочкоядерные – 1-5%, нейтрофилы сегментоядерные – 40-70%, лимфоциты – 20-45%, моноциты – 3-8%, эозинофилы – 1-5%, базофилы – 0-1%. Более важным показателем чем процент клеток, является абсолютное содержание, т.е. количество того или иного вида клеток в 1л крови. Для лейкоцитоза (лейкопении) нехарактерно пропорциональное увеличение (уменьшение) числа лейкоцитов всех видов, в большинстве случаев изменяется содержание какого- либо одного типа клеток, что обозначают терминами нейтрофилёз, нейтропения, лимфоцитоз, лимфопения, эозинофилия, эозинопения, моноцитоз, монопения.
Нейтрофилёз сопровождает острые бактериальные инфекции, воспаление или некроз тканей, интоксикации и др. Нейтропения развивается при вирусных инфекциях, под влиянием ионизирующей радиации, при воздействии некоторых лекарственных веществ, авитаминозе, при аутоиммунных заболеваниях и др.
Эозинофилия наблюдается при аллергических заболеваниях, глистных инвазиях, при аутоиммунных заболеваниях.
Эозинопения характерна для начала инфекционно- токсического процесса. Уменьшение эозинофилов в послеоперационном периоде свидетельствует о тяжёлом состоянии больного.
Моноцитоз сопровождает целый ряд заболеваний – туберкулёз, бруцеллёз, сифилис, септический эндокардит, аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит и др.), лейкозы
Для оценки иммунного статуса особое значение имеет абсолютный показатель лимфоцитов.
Абсолютный лимфоцитоз – для взрослых – более 4,0 ×109г/л,
для детей - более 8,0 ×109г/л.
Он встречается при вирусных инфекциях, коклюше, инфекционном мононуклеозе, остром вирусном гепатите, цитомегаловирусной инфекции, при заболеваниях лимфатической системы (например, хроническом лимфолейкозе).
Абсолютная лимфопения - при содержании лимфоцитов менее 1,0×109г/л. Наблюдается при иммунодефицитных состояниях, панцитопении, СПИДе, при приёме кортикостероидов, тяжёлых хронических вирусных инфекциях, злокачественных новообразованиях, при хронической почечной недостаточности и др.
Поскольку при большинстве патологических состояний одновременно страдает несколько звеньев иммунной системы, важно оценить соотношения различных популяций и субпопуляций лимфоидных клеток. В качестве интегрального показателя, отражающего состояние иммунной системы, используется сумма различных индексов.
ЛИИ - Лейкоцитарный индекс интоксикации, предложенный Кальф-Калифом (1941), определяется по формуле
ЛИИ = (4Ми+3Ю+2П+С) х (Пл+1)/ (Мо+Л) х (Э+1)
где Ми - миелоциты, Ю - юные, П – палочкоядерные, С - сегментоядерные, Пл - плазматические клетки, Мо - моноциты, Л - лимфоциты, Э - эозинофилы.
ИРИ - иммунорегуляторный индекс - это соотношение CD4/CD8
ЛТИ - Лейко-Т-клеточный индекс - это отношение количества лейкоцитов к числу Т-лимфоцитов в 1 мкл крови соотношение
Исследование иммунного статуса включает в себя:
оценку клеточного звена иммунитета
оценку гуморального звена
оценка фагоцитарного звена
определение уровня общего комплемента и компонентов комплемента
оценка интерлейкинового и интерферонового статуса
Оценка клеточного звена иммунитета
