Скачиваний:
21
Добавлен:
29.06.2020
Размер:
102.17 Mб
Скачать

ХРОМАТОГРАФИЯ

Хроматография – физический метод разделения веществ, основанный на их неравномерном распределении между неподвижной (стационарной) и подвижной (мобильной) фазой.

Мобильная фаза

A A

B B

Стационарная фаза

Осы и пчелы

http://antoine.frostburg.edu/chem/senese/101/matter/chromatography.shtml

йшая система для колоночной жидкостной хроматог

а – адсорбент (сорбент, обменник, смола)

б – хроматографическая колонка в – элюат г – делительная воронка

(резервуар для растворителя) д – элюент е – хлопковая вата

(поддерживающий пористый материал)

Смесь веществ А, Б и В, предварительно адсорбированная в зоне Г, разделяется при элюировании растворителем Д (элюентом) на независимые зоны, движущиеся по направлению к выходу из колонки.

Некоторые типичные структуры на поверхности обращенно-фазового сорбента на основе силикагеля
Взаимодействие с типичным обращенно-фазовым сорбентом. Вода вблизи гидрофобных участков имеет более высокий порядок организации чем вода в объеме. Часть этой «структурированной» воды высвобождается при взаимодействии гидрофобных регионов, что приводит к увеличению общей энтропии системы.

Обращенно-фазовая хроматография

Для разделения на обращен- ных фазах максимальное удерживание наблюдается при элюировании чистой водой. С целью уменьшения удержива- ния к воде добавляют смеши- вающиеся с ней органические растворители – метанол,

ацетонитрил, диоксан, тетрогидрофуран. Элюирующая способность в приведенном ряду возрастает и определяется удерживанием растворителя на обращенной

Разделение по гидрофобностифазе при элюции водой.

Гидрофобная хроматография

Гидрофобные лиганды

Ряд Гофмейстера –

 

влияние ионов на растворимость белков

Ионообменная хроматография

А. Противоионы

связаны

с ионами матрицы.

Молекулы пробы заряженные

противоположно по

отношению к матрице замещают

противоионы, в то

время как

нейтральные молекулы и молекулы имеющие одноименный с

матрицей заряд не

взаимодействуют с обменником и

элюируются.

B. Молекулы пробы вытесняются ионами

элюирующего

буфера. Обменник регенерирован и готов к повторному

Катионо- и анионообменники

АНИОНИТЫ КАТИОНИТЫ

ивые титрования катионо- и анионообменни

сильные

слабые

Гель-проникающая хроматография

-хроматография, гель-фильтрация, эксклюзионная хроматог

Размер растворенных веществ определяет их способность проникать в поры

Соседние файлы в предмете Технология белковых препаратов медицинского назначения