Взаимодействие витамина с с краской Тильманса
(2,6-дихлорфенолиндофенолом)
К 1-2мл сока добавляют осторожно по каплям свежеприготовленный 0,01% раствор красителя 2,6-дихлорфенолиндофенола. Происходит обесцвечивание красителя.
Часть 2. Качественные реакции на водорастворимые витамины
Качественные реакции на витамин в1 Витамин в1 (тиамин, анейрин)
Витамин В1 (солянокислый) - бесцветные кристаллы в виде игл, растворимые в воде, спирте, кислотах, и нерастворимые в эфире и хлороформе. В кислой среде В1 устойчив к действию высокой температуры, а в щелочной среде легко разрушается. Длительное время он сохраняется в сушеных овощах и фруктах. При В1 - авитаминозе развивается полиневрит (болезнь «бери-бери»). Это заболевание состоит в прогрессирующей дегенерации нервных окончаний и проводящих пучков, следствием чего являются потеря кожной чувствительности, нарушение нормальной моторики желудочно-кишечного тракта, сердечные боли вплоть до наступления паралича и смерти. Витамин В1 содержит тиазольное и пиримидиновое кольцо:
Диазореакция на витамин в1.
В основе этого метода обнаружения лежит способность тиамина образовывать в щелочной среде с диазореактвом (диазосульфаниловой кислотой) комплекс оранжево-красного цвета.
Ход определения
Диазореактив готовят, сливая в пробирку по 5 капель 1%-ного раствора сульфаниловой кислоты и 5%-ного раствора нитрита натрия. В эту же пробирку добавляют на кончике скальпеля порошок тиамина и затем по стенке наклоненной пробирки осторожно приливают 5-7 капель 10%-ного раствора карбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжево-красного цвета.
Обнаружение витамина в1 в молоке
К 1 мл молока добавьте 10 капель диазореактива и 7 капель раствора карбоната натрия. Наблюдайте за изменением окраски раствора и сделайте вывод о присутствии витамина в молоке.
Взаимодействие витамина в1 с гексацианоферратом (III) калия
К раствору тиамина приливают 1 мл 5% раствора гексацианоферрата (III) калия, 1 мл 30% раствора щелочи и полученный раствор перемешивают. Далее к полученной смеси приливают 3 мл изобутилового спирта, полученный раствор хорошо взбалтывают. Верхний спиртовой слой при помощи капилляра или микропипетки переносят в сухую пробирку и наблюдают голубую флюоресценцию раствора в ультрафиолетовых лучах. Смесь в пробирке при перемешивании нагревают на водяной бане. Наблюдают появление желтой окраски.
2.Качественные реакции на витамин в2
Окисленная форма витамина В2 представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В2 основана на его способности легко восстанавливаться. При этом раствор приобретает сначала розовый цвет промежуточных соединений, а затем обесцвечивается, т.к. восстановленная форма витамина В2 бесцветна.
Ход определения
В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В2, добавляют 5 капель конц. соляной кислоты и опускают гранулу металлического цинка. Начинается выделение пузырьков водорода, жидкость постепенно розовеет, затем обесцвечивается.