Модуль 11. Генная терапия

Комплексная цель:

Ознакомиться с историей развития генной терапии, первыми программами. Изучить типы генотерапевтических вмешательств. Рассмотреть возможные клетки-мишени. Освоить методы переноса чужеродной ДНК в клетки эукариот. Рассмотреть современные состояние генной терапии в России, мире.

Содержание:

Глава 22 Генная терапия – успехи и неудачи

Автор: Александрова Анжела Аслановна

Тесты рубежного контроля знаний

Проектные задания

Литература

Глава 22 Генная терапия – успехи и неудачи

22.1. Дефицит аденозин дезаминазы – ранний успех

В сентябре 1990г. получены первые успешные попытки генотерапевтического лечения наследственного заболевания человека – тяжелой формы комбинированного врожденного иммунодефицита (SCID), обусловленного мутацией в гене, кодирующем фермент аденозин деаминазу (ADA). Это была первая успешная попытка применения ex vivo терапии. И эта дата считается днем рождения реальной генной терапии. С этого года стал издаваться журнал "Генная терапия". Данное заболевание характеризуется накоплением в крови пациентов в высокой концентрации 2’-дезоксиаденозина, который оказывает токсическое действие на Т- и В- лимфоциты, что приводит к развитию тяжелой формы иммунодефицита. План генной терапии, разработанный сотрудниками Национального Института Здоровья США и одобренный Комитетом по Рекомбинантным ДНК, заключался в назначении больным аутологичных лимфоцитов, трансдуцированных нормальным ADA-геном. Для осуществления этого плана необходимо было выполнение следующих процедур: изоляция клеток из крови пациента; активации и иммуностимуляции роста Т-лимфоцитов в культуре; трансдукции их ретровирусным вектором, несущим нормальный ADA-ген и маркерный ген neo; отбора трансдуцированных клеток на селективной среде; внутривенной реинфузии модифицированных Т-лимфоцитов пациенту. В сентябре 1990 г. в США четырехлетней девочке пересадили ее собственные лимфоциты, предварительно трансформированные ex vivo ретровирусным вектором несущим гены ADA + neo. После первого курса терапии были получены положительные результаты спустя несколько месяцев после первых клинических испытаний была проведена подобная терапия у второй девятилетней пациентки. И также при лечении достигнут клинический эффект. Состояние обеих пациенток настолько улучшилось в результате лечения, что они могли вести нормальный образ жизни. Эти испытания явились стимулом для развития новых генотерапевтических методов для лечения других наследственных заболеваний.

22.2. Орнитин транскарбамилаза – неудача

Во второй половине 1999 г. пристальное внимание медицинской и биологической общественности привлек случай смерти больного, подвергшегося генно-терапевтическому лечению. Этот случай произошел в Пенсильванском университете в США. Восемнадцатилетнему больному, страдавшему редким тяжелейшим генетическим заболеванием - недостаточностью по гену орнитин-трансаминазы, была введена с лечебной целью генная конструкция в составе аденовирусного вектора. Через несколько часов у больного поднялась температура, наступил общий тромбоз сосудов и вскоре больной скончался. Это событие привело если не к полному запрету, то, во всяком случае, к временному свертыванию клинических испытаний. Однако некоторое время спустя установили, что причиной несчастья было медицинское осложнение неизвестной природы, а не специфическое последствие генной терапии. Ныне клинические испытания генно-терапевтических протоколов ведутся во все возрастающем масштабе.