27. Определение концентрации гемоглобина в крови гемоглобинцианидным методом, аналитич процедура, оценка результатов.

Инструкция определения гемоглобина гемоглобинцианидным методом

на КФК-2: Подготовить КФК-2 к исследованию: включают и прогревают 15 минут при открытой крышке кюветного отделения, подбирают длину волны, светофильтр, чувствительность. 0,02 мл цельной крови (капилляр Сали) Вносят к 5 мл трансформирующего раствора (разведение в 251 раз). Перемешивают. Кровь и трансформирующий раствор оставляют на 10 минут. Через 10 минут определяют на КФК-2. При измерении оптической плотности на КФК-2 длина волны 540 нм Светофильтр зелёный. Измеряют оптическую плотность «холостой» пробы (трансформирующий раствор или дистиллированная вода) перед исследуемой кровью. Кювета 10 мм. Для определения концентрации гемоглобина измеряют оптическую плотность стандартного раствора. Концентрацию гемоглобина определяют по калибровочной таблице согласно экстинкции колориметра

Или по формуле:

Заполнить результаты в бланк анализа. Убрать рабочее место.

ПРИМЕЧАНИЕ: Еоп. - экстинкция опытной пробы. Ест. - экстинкция стандартного раствора. С - концентрация гемоглобинцианида в стандартном растворе. К - коэффициент разведения крови. 0,01 - коэффициент пересчёта мг% в г/л.

Измерение концентрации исследуемого образца по известной концентрации стандартного образца.

Определяется по формуле:

S =

С = А_S х А ,

где А_S – оптическая плотность стандартного образца,

S - концентрация стандартного образца,

А - измеренная оптическая плотность исследуемого образца.

28. Определение соэ. Аналитич процедура, норма, факторы, влияющие на соэ, ошибки при выполнении анализа.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) показывает на сколько быстро происходит разделение плазмы и эритроцитов крови под действием силы притяжения, гравитации.

Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) проводят микрометодом в модификации Панченкова.

Определение СОЭ производят в специальных градуированных капиллярах Панченкова, имеющих просвет 1 миллиметр и длину 100 миллиметров (10 см).

Пипетку предварительно промывают 3,7%-ным раствором цитрата натрия, затем набирают этот раствор в пипетку до отметки «70» (30 мкл) и выливают на дно пробирки. Кровь из пальца набирают тем же капилляром — сначала целый капилляр, затем еще до отметки «80» (120 мкл). Количество цитрата и крови может быть разное — 25 мкл цитрата и 100 мкл крови, 50 мкл цитрата и 200 мкл крови, но соотношение их должно быть обязательно 1:4.

Кровь помещают в пробирку с цитратом и после тщательного перемешивания вновь набирают в капиллярную пипетку Панченкова до метки «0». Капилляр с цитратной кровью ставят в штатив Панченкова вертикально между двумя резиновыми прокладками и оставляют на 1 час. Затем определяют величину скорости оседания эритроцитов (СОЭ) по столбику плазмы над осевшими эритроцитами. Деление капиллярной пипетки, соответствующее границе плазмы и эритроцитов, записывают как величину скорости оседания эритроцитов (СОЭ) в миллиметрах в час.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) в норме меняется в зависимости от возраста и пола. У новорожденных скорость оседания эритроцитов (СОЭ) редко выше 2 миллиметра/час; дети имеют более низкую скорость оседания (1—8 миллиметра/час), чем взрослые, а лица среднего возраста — меньше, чем старики. У мужчин скорость оседания эритроцитов (СОЭ) более низкая, в среднем 5 миллиметра/час, колебания от 1 до 10 миллиметра/час), чем у женщин (в среднем 9 миллиметра/час, колебания от 2 до 15 миллиметра/час.

Поскольку скорость оседания эритроцитов (СОЭ) зависит в основном от белковых сдвигов - увеличения содержания фибриногена, альфа-2-глобулинов, гамма-глобулинов, то увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) наблюдается при всех состояниях, сопровождающихся воспалением, деструкцией соединительной ткани, тканевым некрозом, иммунными нарушениями, при злокачественных новообразованиях