5. Расчет кислородной ёмкости крови.

Кислородная емкость крови – максимальное количество кислорода, которое может содержаться в определенном объеме крови (1 л) при полном насыщении гемоглобина кислородом. В норме кислородная емкость крови 180-220 мл О₂ в 1 л крови.

Ход работы: Кислородная емкость крови рассчитывается по формуле:

,

Hb – концентрация гемоглобина, г/л;

Г – константа Гюфнера = 1,36 мл О₂ (количество мл кислорода присоединяемых одним граммом гемоглобина).

Результаты работы:

Вывод:

5. Определение скорости оседания эритроцитов

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) – показатель, характеризующий оседание эритроцитов крови при добавлении антикоагулянта. Главным фактором, от которого зависит СОЭ, является соотношение белковых фракций плазмы. Альбумины, имеющие самую мощную гидратную оболочку, уменьшают СОЭ. При увеличении содержания крупнодисперсных белков (фибриноген, глобулины) СОЭ увеличивается. Зависит СОЭ от заряда самих эритроцитов, чем слабее заряжены эритроциты, тем выше их способность к агрегации и СОЭ. Определяется СОЭ также размерами эритроцитов, чем меньше диаметр эритроцитов, тем выше СОЭ. В норме у мужчин СОЭ – 3-9 мм/час, у женщин – 6-12 мм/час.

Оснащение: штатив Панченкова, капилляры, кровь, 5% раствор цитрата натрия, часовое стекло, ватные шарики.

Ход работы: капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия. Затем набирают 50мм цитрата натрия в капилляр до метки «Р» и выдувают на часовое стекло. В тот же капилляр дважды набирают кровь до метки «К». Обе порции крови выдувают на часовое стекло и тщательно смешивают с имеющимся там цитратом натрия. Полученную таким образом на часовом стекле смесь крови с цитратом натрия в соотношении 4:1 набирают в капилляр до метки «0» и ставят капилляр в штатив Панченкова. Через час оценивают высоту образовавшегося слоя плазмы в капилляре в миллиметрах.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте капилляр и прибор Панченкова, определите СОЭ исследуемой крови, сделайте вывод о соответствии данного результата с нормой и клиническом значении данного показателя.

Результаты работы:

Вывод:

5. Изучение осмотической резистентности эритроцитов.

Объем и нормальная функция эритроцитов определяется средой, в которой они находятся. Изотонические растворы (например, 0,9% NaCl; 5% глюкозы) имеют одинаковое с эритроцитами осмотическое давление. В них эритроциты сохраняют свою форму. Гипертонические растворы (например, 3% NaCl, 40% глюкозы) имеют большее, чем эритроциты осмотическое давление. Вода из эритроцитов уходит в окружающий раствор, они сморщиваются. Это явление называется ПЛАЗМОЛИЗ. Гипотонические растворы (менее 0,9% NaCl) имеют меньшее, чем в эритроцитах осмотическое давление. Вода из окружающего раствора поступает в эритроциты, они набухают и разрушаются, гемоглобин выходит в окружающий раствор, наступает ГЕМОЛИЗ.

Осмотическая резистентность эритроцитов – устойчивость эритроцитов к действию гипотонических растворов. Выраженные признаки гемолиза у здорового человека начинаются в 0,48% растворе NaCl, в 0,34% растворе разрушаются все эритроциты. В клинической практике определяют стойкость эритроцитов к гипотоническим растворам NaCl. В связи с тем, что различные эритроциты неодинаково устойчивы к одной и той же концентрации гипотонического раствора различают минимальную и максимальную стойкость.

Минимальная стойкость выражает стойкость самых слабых эритроцитов и определяется концентрацией NaCl, в которой они еще не разрушаются. Например: гемолиз отсутствует при 0,6%, 0,5% и 0,45% NaCl, а при концентрации 0,4% NaCl наступает гемолиз. Минимальная стойкость равняется в этом случае 0,45% NaCl.

Максимальная стойкость выражает резистентность наиболее устойчивых эритроцитов и определяется концентрацией NaCl в которой эти эритроциты не разрушены. Например: при 0,35% NaCl имеется неполный гемолиз (часть эритроцитов в осадке), полный гемолиз наступил при 0,3% NaCl. Максимальная стойкость в данном случае равняется 0,35% NaCl.

Границы нормальной стойкости эритроцитов человеческой крови по отношению к гипотоническим растворам NaCl: минимум ― 0,48%, максимум ― 0,32%.

Оснащение: штатив с 14 пробирками, 1% р-р NaCl, дист. вода, пробирка с донорской кровью, 2 пипетки.

Ход работы: Гипотонические растворы готовятся согласно таблице (см. ниже). Затем в каждую пробирку прибавляют одинаковое количество (по капле) дефибринированной крови (0,02 мл) при помощи капилляра от гемометра. При этом капилляр не опускают в раствор, а выдувают кровь из нее на стенку пробирки и взбалтывают кровь. При заполнении всех 14 пробирок их встряхивают и оставляют стоять в течение часа при комнатной температуре. После этого по цвету раствора и по полному гемолизу отмечают минимальную и максимальную осмотическую стойкость эритроцитов.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте пробирки, укажите концентрацию раствора NaCl в каждой пробирке. Отметить в таблице: знаком «−» ― если в осадке имеются эритроциты, а верхний слой не окрашен (отсутствие гемолиза); знаком «+» ― если верхний слой окрашен, но еще сохраняется осадок (неполный гемолиз) и знаком «+» ― прозрачная равномерно окрашенная жидкость «лаковая кровь» (полный гемолиз). Указать концентрации NaCl, соответствующие максимальной и минимальной резистентности исследуемой крови и сравнить данные с нормой.

Результаты работы:

Пробирки	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14
1% р-р NaCl (в мл)	0,85	0,8	0,75	0,7	0,65	0,6	0,55	0,5	0,45	0,4	0,35	0,3	0,25	0,2
Н2О (в мл)	0,15	0,2	0,25	0,3	0,35	0,4	0,45	0,5	0,55	0,6	0,65	0,7	0,75	0,8
Концентра-ция полученного р-ра NaCl (в %)	0,85	0,8	0,75	0,7	0,65	0,6	0,55	0,5	0,45	0,4	0,35	0,3	0,25	0,2
Результаты

Вывод: