Лабораторные работы:

1. Инструктаж по технике безопасности.

2. Подсчет количества эритроцитов в периферической крови человека.

3. Подсчет количества лейкоцитов в периферической крови человека

4. Приготовление мазков и подсчет лейкоцитарной формулы в периферической крови человека.

5. Приготовление мазков и подсчет количества тромбоцитов в периферической крови человека.

6. Видеофильм «Физиология крови» (10 минут).

7. Решение ситуационных задач.

1. Подсчёт количества эритроцитов в периферической крови человека пробирочным методом по Николаеву

Э ритроциты – красные кровяные тельца, имеющие форму двояковогнутого диска, не имеющие ядра и содержащие в своем составе гемоглобин. Количество эритроцитов у мужчин – 4,0-5,0•10¹²/л, у женщин – 3,9-4,7•10¹²/л. Увеличение количества эритроцитов в крови человека называется эритроцитозом, уменьшение их количества – эритропенией. Выделяют относительный и абсолютный эритроцитоз. Относительный – за счет потери плазмы и сгущения крови, при этом общее количество эритроцитов в организме остается в пределах нормы. Абсолютный – истинное увеличение количества эритроцитов, за счет усиленной их продукции костным мозгом. Эритропения также бывает относительной и абсолютной. Относительная – увеличение объема плазмы (разведение крови) без уменьшения общего количества эритроцитов. Абсолютная – уменьшение общего количества эритроцитов в результате усиленного разрушения эритроцитов или снижения их продукции костным мозгом.

Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор NaCl, пипетка на 5 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 200 раз. Затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в маленьких квадратах, расположенных по диагонали (5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких квадратиков). При подсчете количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: к данному квадратику относятся эритроциты, лежащие внутри квадратика, а также на его верхней и левой границах. Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах в данном квадратике не подсчитываются.

Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратиках,

1/4000 мм³ – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратиком,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратиков, в которых подсчитывают эритроциты.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте капилляр и пипетку, определите количество эритроцитов в исследуемой крови, сделайте вывод о соответствии данного результата с нормой и клиническом значении данного показателя.

Результаты работы:

Вывод:

2. Подсчёт количества лейкоцитов в периферической крови человека пробирочным методом по Николаеву

Лейкоциты – белые кровяные тельца, имеющие ядро. Выделяют следующие формы лейкоцитов: гранулоциты – эозинофилы, базофилы, нейтрофилы. Агранулоциты – моноциты, лимфоциты. Увеличение количества лейкоцитов в крови человека – лейкоцитоз, уменьшение их количества – лейкопения. Различают физиологические лейкоцитозы: пищеварительный (возникает после еды), миогенный (при физической нагрузке), эмоциональный, при болевых воздействиях. В норме количество лейкоцитов в крови человека (4,0-9,0)•10⁹ /л.

Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, пипетка на 1 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим. Кислота разрушает оболочки форменных элементов, а краска окрашивает ядра лейкоцитов. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 20 раз. Затем полученным раствором заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет лейкоцитов в 100 больших квадратах.

Количество лейкоцитов (L) в 1 л рассчитывают по формуле:

где В – сумма лейкоцитов в 25 больших квадратах,

1/4000 мм³ – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратиком,

20 – разведение крови в 3% растворе уксусной кислоты,

1600 – площадь 100 больших квадратов, которая соответствует 1600 малым квадратам.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте капилляр и пипетку, определите количество лейкоцитов в исследуемой крови, сделайте вывод о соответствии данного результата с нормой и клиническом значении данного показателя.

Результаты работы:

Вывод: