- •44. Екологія мікроорганізмів.
- •45. Мікрофлора і імунологія ротової порожнини.
- •47. Основні захворювання і збудники ротової порожнини.
- •48. Пробіотики та еубіотики, їх характеристика, механізм дії
- •49. Санітарна мікробіологія, предмет, завдання.
- •50. Санітарно-показові мікроорганізми, вимоги до них, їх значення для характеристики об’єктів навколишнього середовища.
- •51. Мікрофлора води.
- •52. Мікрофлора грунту.
- •53. Мікрофлора повітря.
- •54. Дія біологічних факторів на мікроорганізми.
- •55. Екологія мікроорганізмів
- •61.Лікарська стійкість мікроорганізмів
- •62. Інфекція
- •2. Властивості збудників
- •63. Роль макроорганізму в інфекційному процесі
- •64. Біологічний (експериментальний) метод
- •65.Патогенність і вірулентність
- •66. Комплемент
- •67. За механізмом дії білкові токсини (екзотоксини) поділяються:
- •70.Механізми передачі інфекції
- •76. Характеристика Длм Дл50, інфікуюча доза
- •74.Шляхи передачі…
- •73. Носійство…
- •75. Роль макроорг…
54. Дія біологічних факторів на мікроорганізми.
Біологічні фактори - це різні форми впливу мікробів один на одного, а також дія на мікроорганізми факторів імунітету (лізоцим, антитіла, інгібітори, фагоцитоз) під час їх перебування в макроорганизмі. Спільне існування різних організмів - симбіоз. Виділяють такі форми симбіозу.
Мутуалізм - форма співжиття, коли обидва партнери отримують взаємну вигоду (наприклад, бульбочкові бактерії та бобові рослини).
Антагонізм - форма взаємовідносин, коли один організм завдає шкоди (аж до загибелі) іншому організму своїми продуктами метаболізму (кислоти, антибіотики, бактеріоцини), завдяки кращо-му пристосованні до умов середовища, шляхом безпосереднього знищення (наприклад, нормальна мікрофлора кишечника і збудники кишкових інфекцій).
Метабіоз - форма співжиття, коли один організм продовжує процес, викликаний іншим (використовує його продукти життєді-яльності), і звільняє середовище від цих продуктів. Тому створю-ються умови для подальшого розвитку (нитрофікуючі і амоніфіку-ючі бактерії).
Сателлізм - один з співмешканців стимулює зростання іншого (наприклад, дріжджі і сарцини виробляють речовини, що сприяють ріст інших, більш вимогливих до живильних середовищ, бактерій).
Коменсалізм - один організм живе за рахунок іншого (витягує вигоду), не завдаючи йому шкоди (наприклад, кишкова паличка і організм людини).
Хижацтво - антагоністичні взаємовідносини між організмами, коли один захоплює, поглинає і перетравлює інший (наприклад, кишкова амеба харчується кишковими бактеріями).
Паразитизм - форма антагоністичних відносин, коли один орга-нізм використовує інший для забезпечення своєї життєдіяльності як джерело живлення і середовище для проживання із заподіянням йому шкоди (наприклад, бактеріофаги - паразити бактерій).
55. Екологія мікроорганізмів
— розділ загальної мікробіології, який вивчає взаємовідносини мікроорганізмів між собою, з об'єктами зовнішнього середовища і з макроорганізмом.
Мікроорганізми широко поширені в природі: в повітрі, воді, ґрунті, на предметах, в організмі рослин, тварин і людини..
З організму людини і тварин в навколишнє середовище (в грунт, воду, повітря) потрапляють умовно-патогенні і патогенні мікроорганізми. Потрапляють, в основному, 2-ма шляхами: 1) фекальний (з випорожненнями із кишечника); 2) повітряно-краплинний (з краплинами слизу із дихальних шляхів).
Забруднення навколишнього середовища патогенними мікро-організмами робить її фактором передачі інфекційних захворю-вань.
Для визначення в навколишньому середовищі мікроорганізмів, які негативно впливають на здоров'я людини, проводиться санітарно-бактеріологічне дослідження грунту, води, повітря.
Методи дослідження розробляє санітарна мікробіологія.
Визначення в об'єктах середовища патогенних мікроорганізмів важко, тому що вони знаходяться в середовищі тимчасово, в невеликій кількості, а методи їх визначення тривалі і трудомісткі.
Тому для оцінки санітарного стану середовища застосовують: 1) визначення загальної мікробної забрудненості; 2) визначення санітарно-показових мікроорганізмів.
Санітарно-показові мікроорганізми - представники нормальної мікрофлори кишечника і дихальних шляхів людини і теплокровних тварин.
Вимоги до СП м/о: - повинні легко визначатися в навколишньому середовищі; - повинні виділятися з організму людини (тобто мати в організмі біотоп); - повинні зберігатися у зовнішньому середовищі, кількість їх при цьому не повинна змінюватися і вони не повинні змінювати свої властивості.
Якщо в об'єктах середовища підвищується кількість санітарно-показових мікробів, то підвищується ймовірність присутності в них патогенних і умовно-патогенних мікробів.
Для різних об'єктів навколишнього середовища обрані певні санітарно-показові мікроби.
Фітопатогенні мікроорганізми
До фітопатогенних мікробів належать збудники інфекційних захворювань у рослин - бактерії, гриби і віруси. Хвороби, що викликаються бактеріями, називаються бактеріозами. Розрізняють місцеві і загальні бактеріози. Загальні бактеріози викликають загибель всієї рослини або її окремих частин. Місцеві бактеріози - уражають тільки окремі ділянки рослин.
Передача збудників бактеріозів відбувається через заражені насіння, залишки хворих рослин, грунт, повітря, воду, шляхом перенесення комахами, молюсками, нематодами. Бактерії проника-ють в рослини через продихи, нектарники, через ушкодження. Усередині рослини бактерії можуть поширюватися 2-ма шляхами: 1) міжклітинний шлях; такі захворювання називаються паренхіматозними; 2) по судинах; бактерії закупорюють судини, тому рослини в'януть; такі захворювання називаються судинними.
Основні роди бактерій - збудників інфекційних захворювань рослин:
Рід Erwinia - викликає хвороби типу опіку, в'янення, мокрої або водянистої гнилі.
Рід Pseudomonas - викликає бактеріальну плямистість (на листках утворюються плями різного забарвлення і розмірів).
Рід Xanthomonas - викликає судинні бактеріози (закупорка судин, в'янення і загибель), вражає листя, викликає плямистість.
Рід Corynebacterium - судинні та паренхіматозні захворювання, бактеріальний рак.
Рід Agrobacterium- викликає утворення пухлин (корончаті галли).
Рід Pectobacterium - викликає переважно гниття рослин.
До вірусних захворювань рослин відносяться мозаїчні хвороби, жовтяниці, хвороба в'янення, карликовість.
Грибкові хвороби рослин- мікофітози: фузаріози, гнилі, аскохітоз.
Гриби, що вражають рослини, можуть у разі приготування з ураже-ного зерна продуктів харчування викликати харчові отруєння люди-ни - мікотоксикози.
Зрізані і зірвані при заготівлі лікарські рослини (рослинна сиро-вина) можуть містити велику кількість мікробів. Рослинна сировина може бути забруднена:
1) нормальною мікрофлорою рослин;
2) фітопатогенною мікрофлорою; тобто мікробами самих рослин,
3) мікробами з навколишнього середовища (грунту, повітря, від людей).
Рослинна лікарська сировина може забруднюватися мікроорганіз-мами з навколишнього середовища на всіх етапах заготівлі та зберігання: збирання, первинна обробка, сушка, подрібнення, упа-ковка, отримання різаної сировини, рослинних порошків, а також при приготуванні брикетів, гранул, таблеток.
Зрізані і зірвані рослини є сприятливим живильним середовищем для розмноження мікроорганізмів (грибів, гнильних і целлюлозо-руйнуючих бактерій). Тому відбувається мікробне псування сиро-вини. Ознаки псування: зміна кольору, поява вогнищ розмноження плісняви. Мікробне псування призводить до зміни фармаколо-гічних властивостей рослин і лікарських препаратів, отриманих з рослин, а також може служити причиною утворення токсичних продуктів. Патогенні мікроорганізми можуть викликати захворю-вання у людей, що використовують препарати.
Одним із способів, що перешкоджають росту мікроорганізмів на рослинах, є їх висушування. На висушених рослинах життєдіяль-ність мікробів значно знижується, багато бактерій гинуть. У зв'язку з цим, мікробне псування сировини відбувається в першу чергу при підвищеній вологості, яка сприяє розмноженню гнильних мікробів.
Тому необхідно строго дотримуватися умов зберігання рослинної сировини і проводити бактеріологічний контроль її мікробної забрудненості.
Для оцінки мікробного обсіменіння рослинної сировини викори-стовується метод змивів. Мікробну забрудненість лікарської сиро-вини виражають кількістю клітин мікроорганізмів в 1 г сировини.
56. Мікробіологічний синтез, синтез структурних елементів або продуктів обміну речовин мікроорганізмів за рахунок властивих мікробній клітці ферментних систем. При М. с., як і будь-якому органічному синтезі, складні речовини утворюються з простіших з'єднань. М. с. слід відрізняти від бродіння, в результаті якого теж виходять різні продукти мікробного обміну (наприклад, спирти органічні кислоти), але переважно за рахунок розпаду органічної речовини. Значна частина продуктів, що утворюються в ході М. с., володіє фізіологічною активністю і представляє практичну цінність для народного господарства.
До М. с. відносять широкий круг процесів. 1. Накопичення мікробної маси для використання її: а) як білково-вітамінні добавки до корм; би) як джерела здобуття білків, ліпідів, ферментів, токсинів, вітамінів, антибіотиків ; в) для боротьби з паразитами тварин і рослин; г) як носій ферментативної активності в реакціях мікробіологічної (ензіматічеськой) трансформації органічних сполук. 2. Здобуття тих, що накопичуються поза мікробною кліткою метаболітов, у тому числі ферментами, токсинами, антибіотиками, амінокислотами, вітамінами, нуклеотидами і т.п.
Технологічно сучасний процес М. с. складається з ряду послідовних етапів (операцій). Головні з них: підготовка необхідної культури мікроорганізму-продуцента; підготовка живильного середовища; вирощування посівного матеріалу; культивування продуцента в заданих умовах, в ході якого і здійснюється М. с., часто званий ферментацією (наприклад, ферментація антибіотиків); фільтрація і відділення біомаси; виділення і очищення необхідного продукту, коли це необхідно; сушка. Процеси виділення і очищення що часто займають важливе місце серед ін. технологічних операцій, визначаються хімічною природою отримуваної речовини і можуть включати екстракційні і хроматографічні методи, кристалізацію, осадження і ін. Найбільш прогресивним способом культивування вважається безперервний — з безперервними подачею живильного середовища і виведенням продуктів М. с. Так виробляють, наприклад, мікробну біомасу (кормові дріжджі). Проте безперервний спосіб розроблений далеко ще не для всіх процесів М. с., і більшість метаболітов (амінокислоти, антибіотики, вітаміни) отримують періодичним способом — з виведенням продукту в кінці процесу. В деяких випадках (наприклад, при виробництві ряду ферментів) продуценти вирощують не у ферментерах з аерацією і перемішуванням (глибинний спосіб), а на поверхні живильного середовища — т.з. поверхневим способом. Для виробництва всіляких продуктів М. с. в СРСР створена мікробіологічна промисловість, що вже випускає великий асортимент з'єднань різних класів. Роботи в області М. с. проводяться майже у всіх промислово розвинених країнах. У багатьох з них продукти М. с. є важливої складової економіки країни, наприклад виробництво ферментів і амінокислот — в Японії, лікарських препаратів — в Угорщині.
Антибіотики — один з перших продуктів М. с., які широко виробляють для медицини і сільського господарства. Більшість антибіотиків накопичуються поза клітками мікроорганізму-продуцента, якими в основному є актиноміцети, деякі гриби і бактерії, головним чином їх форми мутантів. Антибіотичні препарати, що вживаються переважно в медицині, відрізняються високою мірою чистоти. На корм тваринам частіше йде концентрат середовища після вирощування в ній продуцента, інколи разом з біомасою, що містить значну кількість ін. продуктів обміну речовин продуцента, у тому числі вітаміни, амінокислоти, нуклеотиди і т.п. Деякі антибіотики (фітобактеріоміцин, тріхотецин, поліміксин) використовуються як засоби захисту рослин від фітопатогенних мікроорганізмів.
Ферменти, що синтезуються мікроорганізмами, і створювані на їх основі ферментні препарати придбали велике значення в народному господарстві, особливо в харчовій промисловості. Продуцентами ферментів — протеаз, амілаз, фосфатаз, целюлаз, пектіназ, глюкозооксидази, ліпаз, каталази — служать багато міцеліальних грибів деякі актиноміцети і бактерії. Залежно від локалізації ферменту піддають обробці мікробну масу або фільтрат, вільний від мікробних кліток. Здобуття чистих ферментних препаратів пов'язане із значними технологічними труднощами. Такі препарати зазвичай дуже дороги; тому в промисловості використовують комплексні препарати, що містять, наприклад, протеази і ліпази, протеази і амілази.
57. Основою біотехнології як науки у процесі її формування стала мікробіологічна промисловість. Мікроорганізми, порівняно з іншими об’єктами, мають такі переваги: висока швидкість росту; використання для життєдіяльності дешевих субстратів; стійкість до зараження чужою мікрофлорою. Саме завдяки таким ознакам мікроорганізмів за останні роки мікробіологічна промисловість набула принципово нових рис: мікроорганізми стали використовувати не тільки як засіб підвищення інтенсивності біохімічних процесів, але і як мініатюрні синтетичні фабрики, що здатні виробляти, синтезувати цінні й складні хімічні сполуки. Ключовим моментом у розвитку біотехнології мікроорганізмів було відкриття і початок виробництва антибіотиків [Герасименко, 1989]. На сьогоднішній день завдяки біотехнології мікроорганізмів отримані такі сполуки: алкалоїди, амінокислоти, антибіотики, антиметаболіти, антиоксиданти, білки, вітаміни, гербіциди, інгібітори ферментів, інсектициди, іонофори, коферменти, ліпіди, нуклеїнові кислоти, нуклеозиди і нуклеотиди, окисники, органічні кислоти, пігменти, поверхнево активні речовини, полісахариди, антипухлинні агенти, розчинники, фітогормони, ферменти тощо [Сассон, 1997]. Значний вклад у розвиток біотехнології як науки в цілому і біотехнології мікроорганізмів зокрема внесли дослідження петербурзького академіка К. С. Кірхгофа, який у 1814 р. відкрив явище біологічного каталізу і намагався біокаталітичним шляхом отримати цукор із доступної сировини [Мишунин, Шевченко, 1989]. У 1891 р. у США японський біохімік Дз. Такаміне отримав перший патент на використання ферментних препаратів у промислових цілях. У 1916–1917 рр. російський біохімік О. М. Колєнєв намагався розробити спосіб, який дозволив би керувати процесом ферментації природної сировини при виробництві тютюну [Мишунин, Шевченко, 1989]. Академік О. Н. Бах та його учні розробили рекомендації щодо удосконалення технології хлібопечення, пивоваріння, виноробства, виробництва чаю та тютюну тощо, а також рекомендації для підвищення врожаю культурних рослин шляхом управління біохімічними процесами, що в них протікають. У першій половинні ХХ ст. технологічне забезпечення мікробіологічних процесів було вдосконалено. Почали впроваджувати спеціально підібрані чисті культури мікроорганізмів, які спрямовували процес у потрібному напрямку. У 1933 р. голландські вченні А. Клюйвер і Л. Х. Ц. Перкін запропонували основні технічні прийоми і підходи до оцінки отриманих результатів при глибинному культивуванні грибів. Також здійснювалась розробка і впровадження технології неперервного культивування. Одними з перших вивченням безперервних процесів займалися російські вчені С. В. Лебедєв, М. Д. Утенков, Д. Н. Клімовський [Попова, Попова, 2000]. Однак, незважаючи на суттєві досягнення, природні мікроорганізми, як правило, володіють низькою продуктивністю тих речовин, виробництво яких необхідне. Для біотехнології важливим є використання високопродуктивних штамів мікроорганізмів. Їх створюють направленим відбором спонтанних або індукованих мутагенів. Отримання таких штамів займає іноді багато років. У результаті селекції продуктивність продуцентів може зростати у сотні-тисяч разів. Наприклад, у роботі з Penicillium методами селекції вихід пеніциліну був збільшений приблизно у 10 тис. разів, порівняно з вихідним штамом. Відбору високопродуктивних штамів передують тонкі маніпуляції селекціонера з вихідним генетичним матеріалом. При цьому використовують весь спектр природних способів рекомбінації генів, відомих у бактерій, а саме: кон’югацію, трандукцію та інші генетичні процеси. Наприклад, кон’югація (обмін генетичним матеріалом між бактеріями) була успішно використана при створенні штаму Pseudomonas putida, що здатний утилізувати парафіни нафти [Герасименко, 1989]. Дуже часто використовують трансдукцію (перенесення гена від однієї бактерії до іншої за допомогою бактеріофагів), та ампліфікації, тобто збільшення числа копій потрібного гена. У багатьох мікроорганізмів гени біосинтезу антибіотиків та їх регулятори знаходяться не в основній хромосомі, а в плазмідах. Завдяки ампліфікацій можна збільшити кількість плазмід у клітинах та суттєво збільшити виробництво антибіотиків [Герасименко, 1989]. Наступним підходом в генетико-селекційній роботі є отримання генетичних рекомбінант шляхом злиття різних штамів бактерій, позбавлених клітинних стінок. Так, завдяки злиттю клітин 2-х штамів Streptomyсes був сконструйований новий високоефективний штам-продуцент рифампіцину С. На мікробіологічній основі намагаються виробляти паливо: метан і спирт. Спирт, отриманий мікробіологічним шляхом, конкурує з бензином за своїми властивостями, а також за важливими з точки зору охорони природи показниками: продукти згоряння спирту не забруднюють навколишнє природне середовище. Мікроорганізми використовують для виробництва білків одноклітинних організмів, які є кормом для тварин. Перспективність мікробіологічного виробництва полягає в тому, що по-перше, немає необхідності у великих площах – один апарат для отримання кормових дріжджів з парафінів нафти дає стільки ж білка, скільки міститься в урожаї гороху з 18 тис. га. Таке виробництво не залежить від кліматичних умов, його обслуговує невелика кількість робочої сили [Смирнов, Иванов, 1986]. При вирощуванні мікроорганізмів (переважно дріжджів) для цих цілей як живильний субстрат для їх росту використовують відходи інших галузей промисловості. Мікробна біомаса деяких культур використовується у вигляді заквасок, наприклад, для випікання хліба, виробництва пива, вин, спирту, оцту, кисломолочних продуктів, сирів. Мікробний білок (зруйновані клітини дріжджів чи бактерій) використовується як добавки в живильне середовище при вирощуванні мікроорганізмів для наукових і практичних цілей. Ще одним важливим напрямком біотехнології мікроорганізмів є використання продуктів їх життєдіяльності. Продукти життєдіяльності за природою і за призначенням можна розділити на три групи. До першої групи належать різні ферменти (целюлози, протеази, ліпази) і полісахариди. Сфера використання тих чи інших речовин надзвичайно широка — від харчової і текстильної промисловості до нафтодобувної. Другу групу утворюють первинні метаболіти, тобто речовини, які необхідні для росту і розвитку самої клітини: амінокислоти, пуринові і піримідинові нуклеотиди, вітаміни. До третьої групи належать вторинні метаболіти — речовини, які не потрібні для росту мікроорганізмів. Їх синтез спостерігається після вичерпання мікробними клітинами джерела вуглецю і енергії. У цю групу входять антибіотики, токсини, алкалоїди, фактори росту [Герасименко, 1989]. Мікроорганізми вирощують з використанням двох методів – періодичне і неперервне культивування. При періодичному методі культуру засівають у живильне середовище і культивують за умов відповідної температури, аерації, перемішування. Культура росте спочатку повільно, поступово її ріст прискорюється і досягає максимуму (логарифмічна фаза росту). Концентрація вуглецю і енергії поступово знижується, починають накопичуватися продукти обміну. Відтак настає період, коли приріст клітин припиняється, а згодом клітини відмирають. Від’ємно-доливний спосіб полягає в тому, що з посудини, в якій культивуються мікроорганізми вилучають частину клітин та продукти обміну і вносять відповідний об’єм живильного середовища. Якщо процедуру виконувати часто з певною періодичністю, то можна перейти до неперервного способу культивування мікроорганізмів [Герасименко, 1989]. Мікроорганізми використовують як біогенні агенти для трансформації деяких речовин, очистки вод, ґрунтів, повітря. Для добування металів із простих і складних руд (біотехнологія металів) використовують тіонові бактерії. Важлива роль мікроорганізмів у створенні, підтримці і збереженні ґрунтового плодоношення. Мікроорганізми беруть участь в утворенні гумусу, трансформують отруйні речовини в неотруйні або детоксикують їх. У біотехнології мікроорганізмів завдяки широкому спектру досліджень виділяють ґрунтову біотехнологію, одним із напрямків якої є використання мікроорганізмів для інокуляції (обробки насіння) рослин з метою створення симбіозу між азотофіксуючим мікроорганізмом і рослиною. Завдяки цьому можна зменшити внесення мінеральних азотних добрив або не вносити їх взагалі. Ще одним напрямком є використання мікроогранізмів для боротьби з хворобами рослин: рослини обробляють певними бактеріями, які зменшують розмноження патогенних форм мікроорганізмів [Смирнов, Иванов, 1986].
59. Антибіотики.
До хіміотерапевтичних препаратів належать антибіотики - це речовини природного походження, що володіють протимікробною активністю. Антибіотики - це продукти метаболізму будь- яких живих організмів (мікробів, рослин, тварин). Вони здатні вибірково пригнічувати ріст бактерій (бактеріостатична дія) або вбивати їх (бактерицидна дія). Початок вчення про антибіотики було покладено в 1929 році, коли англійський учений А. Флемінг відкрив пеніцилін - ця речовина була виділена із зеленої цвілі (цвілевих грибів Penicillium notatum). За походженням антибіотики ділять на 5 класів: 1) з грибів - пеніцилін; 2) з бактерій - субтілін, грамицидин; 3) з актиноміцетів - стрептоміцин; 4) з тканин тварин - лізоцим, інтерферон; 5) з рослин - хлорофіліпт з евкаліпта, аллілчеп - з цибулі, аллілсат - з часнику, з лишайників - уснінова кислота. Антибіотики можуть бути отримані і шляхом хімічного синтезу. За спектром дії антибіотики поділяють на 4 групи: 1) антибактеріальні широкого (тетрациклін, левоміцетин) і вузького (поліміксин, бензилпеніцилін) спектру дії; 2) протигрибкові широкого (амфотерицин В) і вузького (ністатин) спектру дії; 3) протипротозойні - проти найпростіших (фума- гиллин - антибіотик вузького спектра дії - проти амеб); 4) протипухлинні - препарати, що володіють цитотоксичною дією (рубоміцін). Антибіотики широкого спектру дії - впливають на всі види бактерій, грибів або найпростіших. Антибіотики вузького спектра дії - роблять вплив на невелику групу бактерій або інших мікроорганізмів. По механізму дії антибіотики поділяють на 4 групи: 1)пригнічують синтез білків клітинної стінки (β - лактами - пеніци-ліни, цефалоспорини); 2)порушують синтез клітинної мембрани (поліени - ністатин; поліміксини ) 3) інгібують синтез білків (тетрациклін, левоміцетин, аміногліко-зиди - стрептоміцин, мономіцин, неоміцин, канаміцин, гентаміцин); 4)інгібують синтез нуклеїнових кислот (противопухолинні антибі-отики: актиноміцин пригнічує синтез РНК, рубоміцин-синтез ДНК). Біологічну активність антибіотиків оцінюють в умовних одиницях, які містяться в 1 мл розчину (од/мл) або 1 мг препарату (од/мг). За одиницю антибіотичної активності приймають мінімальну кількість препарату, здатну затримати ріст певного числа клітин стандартного штаму тест- мікробів в одиниці об’єму живильного середовища.
60. Методи визначення чутливості бактерій до антибіотиків. 1. Диско-дифузійний метод. Напівкількісний метод, що визначає групи антибіотиків, активні у відношенні патогена. Перевага методу - можна визначити чутливість досліджуваної бактеріальної культури відразу до декількох антибіотиків. 2. Метод розведень в агарі. Кількісний метод, що визначає активні препарати та їх інгібуючі концентрації. Перевага методу - визначення мінімальної концентрації антибіотика, яка інгібує (пригнічує) зростання бактеріальної культури. 3. Метод розведень у рідких середовищах та Е-тест (епсілометричний метод). Кількісні методи, що визначають активні препарати та їх інгібуючі концентрації. 4. Автоматизований метод з використанням авто- матичних мікробіологічних аналізаторів. Визначає активні препарати та їх інгібуючі концентрації, прогнозує механізми стійкості, дозволяє створю- вати комп'ютерну базу резистентності всіх дослід- жених культур до антіботіків. 5. Генетичні методи, які дозволяють визначати генетичні маркери резистентності. Визначення концентрації антибіотиків у біологічних рідинах. При тяжких інфекційних процесах, наприклад, сепсисі інколи доводиться визначати концентрацію антибіотиків у біологічних рідинах, зокрема, сироватці крові, сечі. Для цього використовують метод серійних розведень (табл. 16) на рідкому середовищі з глюкозою та індикатором Андреде. У двох паралельних рядах готують серійні розведення сироватки і стандарту антибіотика. Потім до кожної пробірки, включаючи контрольні, додають стандартну суспензію тест-мікробів. Пробірки інкубують у термостаті при температурі 37 °С протягом 18 год. У тих пробірках, де концентрація антибіотика пригнічує мікроби, середовище залишається безбарвним і прозорим. Якщо мікроорганізми проростають, про це свідчить помутніння середовища і поява рожевого забарвлення. Можна використати також фенол-сироваткове середовище з індикатором фено- ловим червоним. У цьому випадку привідсутності росту мікроорганізмів сере- довище залишається червоним, а при наявності ознак росту стає мутним і набуває жовтого кольору. Виходячи із даних таблиці, розчин стандарту пеніциліну затримує ріст тест-мік- робів у концентрації 0,025 ОД/мл, а досліджувана сироватка – в розведенні 1:8. Отже, вміст пеніциліну в сироватці крові буде дорівнювати 0,2 ОД/мл (0,025 ОД/мл×8).
58.Санітарно-показові мікроорганізми Для оцінення санітарно-мікробіологічного стану довкілля, харчових продуктів, води, і предметів ужитку досліджують санітарно-показові мікроорганізми (СПМ). При цьому встановлюють кількісні характеристики мікробного забруднення. Санітарно-показові мікроорганізми за своїми екологічними характеристиками близькі до відповідних патогенних мікроорганізмів – вони виділяються з організмів людей чи тварин таким самим шляхом, зберігаються в довкіллі приблизно такий самий час, проникають у макроорганізм таким самим способом. СПМ легко виявляються в лабораторії, для них розробленні методи кількісного визначення. Потреба у дослідженні СПМ зумовлена тим, що патогенні мікроорганізми в довкіллі виявляти досить складно – навіть коли відомо , що через воду чи грунт відбулося зараження людей, встановити відповідного збудника не завжди вдається. Крім того виявлення СПМ, особливо збільшення їх кількості вказуєна санітарне неблагополуччя об’єкта і вимагає відповідних заходів для профілактики захворювань. До них належать: кишкова паличка, анаеробні спорові бацили і ентерококи (вказують на фекальне забруднення) , гемолітичні стафілококи і стрептококи(вказують на забруднення дихальних шляхів людини). Досягнення молекулярної біології і генетики мікроорганізмів останніх років дають змогу точніше оцінити санітарно-мікробіологічний стан довкілля на основі виявлення нуклеїнових кислот патогенних мікроорганізмів у воді, грунті чи харчових продуктах. Кількісними показниками мікробного забрудення є: -мікробне число – кількість мікроорганізмів в 1 г чи в 1 см3 твердої речовини, чи в 1 мл рідини. Виражається кількістю колоній, які виростають на твердому поживному середовищі, - у колонієутворювальних одиницях; -показники фекального забруднення – колі-індекс, за теперішньою номенклатурою – індекс бактерій групи кишкової палички (БГКП) – к-ть цих бактерій в 1 кг в 1л чи в 1дм3 речовини. Колі-титр, або титр БГКП, - найменша к-ть речовини в грамах або рідини в мілілітрах, в якій виявляють одну бактерію цієї групи.
