- •1. Медицинская микробиология. Предмет изучения, цели и задачи
- •2. Санитарная микробиология. Предмет изучения, цели и задачи.
- •3. Клиническая микробиология: цели и задачи
- •4. Методы исследования в микробиологии. Их диагностическая значимость
- •5. Биотехнологии. Методы, цели и задачи
- •6. Систематика и номенклатура микроорганизмов. Принципы классификации бактерий. Основные формы бактерий. Размеры
- •7. Световой микроскоп, микроскопия с иммерсией. Разрешающая способность. Применение. Принципы окраски по Граму. Этапы приготовления микропрепарата.
- •8. Характерные биологические свойства прокариотов и эукариотов. Структура бактериальной клетки. Обязательные структурные элементы бактериальной клетки, их роль.
- •9. Необязательные структурные элементы- включения, жгутики, капсула, пили, споры. Их функции. Примеры бактерий. Методы выявления.
- •11. Влияние физических факторов на микроорганизмы- ультразвук, температура, высушивание, лучистая энергия. Лиофильное высушивание.
- •13. Выделение чистой культуры аэробов. Биологических методов создания анаэробиоза.
- •14. Механизмы питания прокариотов. Типы питания бактерий. Классификация питательных сред. Примеры.
- •15. Простые и сложные методы окраски микроорганизмов. Дифференциальные методы окраски, практическое применение. Примеры.
- •16. Рост, размножение, фазы развития микробной популяции. Культуральные свойства бактерий.
- •17. Пигменты (основные представители пигментообразующих бактерий) их функции. Примеры.
- •18. Основные принципы культивирования микробов. Методы изучения ферментов бактерий. Практическое использование
- •19. Понятие чистой культуры, штамме, биоваре, сероваре, фаговаре, клоне микробов
- •20. Антигены микроорганизмов: локализация, химическая природа.
- •21. Получение микробных антигенов, практическое применение.
- •22. Антитела: определение, физико-химические свойства антител. Аффинность, авидность антител.
- •23. Бактериофаги. Биологические свойства. Вирулентный бактериофаг. Практическое применение.
- •24. Бактериофаги. Биологические свойства. Умеренный бактериофаг. Лизогения. Конверсия фагом.
- •25. Виды лекарственной устойчивости: основные механизмы, пути распространения. Примеры.
- •26. Химиотерапевтические препараты: определение, основные химические группы, примеры препаратов из каждой группы.
- •27. Механизм действия антибиотиков, спектр, примеры.
- •28. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
- •30. Нормальная микрофлора тела человека: определение, формирование, значение. Синдром раздраженного кишечника: понятие, причина, принцип микробиологической диагностики.
- •31. Представители микробиоценозов основных биотопов: конъюнктива глаза, слизистая оболочка носа, носоглотка
- •32. Представители микробиоценозов основных биотопов: ротовая полость, пищевод, желудок, толстый кишечник, органы мочеполовой системы
- •33. Инфекция: понятие, условия возникновения, динамика развития, инфекция, исходы
- •34. Микробоносительство: определение, виды, примеры. Диагностика микробоносительства
- •35. Понятия: патогенность, вирулентность микроорганизмов. Классификация микроорганизмов по патогенности, примеры
- •36. Понятие патогенность, вирулентность микроорганизмов. Факторы, влияющие на вирулентность возбудителей. Факторы патогенности бактерий, повреждающие организм хозяина, примеры.
- •37. Аттенуированные штаммы: методы получения, использование
- •38. Факторы вирулентности. Микробные токсины и их свойства. Количественное определение вирулентности. Аттенуация
- •39. Токсинемия, примеры токсинемических инфекций. Принцип специфической терапии.
- •40.Понятие инфицирующая доза. Входные ворота инфекции, Примеры. Распространение возбудителей в организме. Динамика развития и периоды инфекционного процесса.
- •41. Манифестные и субклинические формы инфекции. Микробоносительство: определение, виды, примеры. Множественная инфекция
- •42. Принципы классификации вирусов.
- •43.Морфология и физиология вирусов, отличительные особенности. Структура вириона
- •44. Типы взаимодействия вируса с клеткой.
- •45. Методы культивирования вирусов, принципы их индикации и идентификации
- •46. Формы вирусной инфекции
- •47. Микробиологические методы исследования воздуха лпу
- •48. Микробиологические методы исследования почвы
- •49. Вода как фактор распространения возбудителей инфекций. Микробиологические критерии качества питьевой воды
- •50. Санитарно-микробиологическое исследование молока и молочных продуктов. Критерии микробиологической безопасности
- •51.Санитарно_микробиологическое исследование мяса и мясных продуктов. Критерии микробиологической безопасности
- •52.Санитарно-микробиологическое исследование рыбы. Критерии микробиологической безопасности. Контроль качества свежей, охлажденной, мороженой рыбы и морских беспозвоночных
- •53. Санитарно-показательные мо: понятие, виды, требования, предъявляемые к санитарно-показательным мо
- •55. Внутрибольничные инфекции. Роль макроорганизма и внешней среды в возникновении госпитальных штаммов и госпитальной инфекции. Меры профилактики.
- •56.Госпитальные штаммы: понятие, характерные признаки, условия формирования
- •57. Спектр возбудителей внутрибольничных инфекций.
- •58.Объекты санитарно-микробиологического исследования на стерильность. Методы отбора проб и их исследование. Интерпретация результатов санитарно-микробиологических исследований на стерильность
- •59.Стерилизация.Методы стерилизации — основные режимы, объекты стерилизации, методы контроля. Преимущества и недостатки
- •60. Дезинфекция. Химические группы дезинфицирующих веществ, механизм их действия на микроорганизмы.
15. Простые и сложные методы окраски микроорганизмов. Дифференциальные методы окраски, практическое применение. Примеры.
Простой метод окраски является одноэтапным (1 краситель –анилиновые, фуксин, генцианвиолет, метиленовый синий в виде растворов или пропитанных бумажек). Окраска 3-5 минут, промывание, высушивание, микроскопия. Можно получить представление о форме, размерах, расположении (но не о деталях строения).
Сложные методы многоэтапные, различные красители, протравы, дифференцирующие вещества. Сложные методы бывают:
- Дифференциальные - позволяющие отличить один вид или группу бактерий от других ( по Грамму – характер клеточной стенки, метод Циля-Нильсена - кислотоустойчивые).
- предназначенные для выявления различных структур (споры- Ожешки, включения волютина-Нейссера, капсула- Бурри-Гинса).
Протравы - химические и физические вещества, повышающие окрашиваемость микроорганизмов. Уплотняют цитоплазму и делают окраску более прочной, либо разрыхляют клеточную стенку и способствуют проникновению краски в клетку (раствор Люголя в методе Грама, карболовая кислота в методе Циля-Нильсена)
Дифференцирующие вещества избирательно обесцвечивают одни виды или структуры бактериальных клеток и не обесцвечивают другие (спирт в методе Грама, серная кислота в методе Циля-Нильсена и Ожешко).
Окраска по Грамму.
|
цель метода |
Выявление грамположительных и грамотрицательных бактерий |
|
основной краситель |
карболовый раствор генцианвиолета |
|
протрава |
раствор Люголя (после окрашивания) |
|
дифференцирующее вещество |
этанол |
|
дополнительный краситель |
разбавленный карболовый раствор фуксина |
|
способ фиксации препарата-мазка |
в пламени спиртовки до окрашивания |
|
этапы окраски |
Окрасить раствором генцианвиолета 1 мин. (или с бумажкой – 3 мин.); Нанести на мазок раствор Люголя – 1 мин.; Промыть в этаноле 30 сек.; Промыть водой; Окрасить раствором фуксина 1 мин. (или с бумажкой – 5 мин.); Промыть водой; Высушить |
|
сущность метода |
Генцианвиолет образует комплекс с тейхоевыми кислотами в присутствии Люголя, который задерживается многослойным пептидогликаном у грамположительных бактерий. При дополнительной окраске фуксином грамотрицательные бактерии приобретают красный цвет. |
Метод Циля-Нильсона:
|
цель метода |
Выявление кислотоустойчивых и некислотоустойчивых бактерий |
|
основной краситель |
карболовый раствор фуксина |
|
протрава |
карболовая кислота (в момент окрашивания) |
|
дифференцирующее вещество |
серная кислота |
|
дополнительный краситель |
водный раствор метиленового синего |
|
способ фиксации препарата-мазка |
в пламени спиртовки в процессе окраски |
|
этапы окраски |
Окрашивать карболовым раствором фуксина (фуксин Циля) через фильтровальную бумажку при осторожном нагревании над пламенем спиртовки 3 раза до появления паров белого цвета (1); Промыть в 5% серной кислоте; Промыть водой; Окрасить раствором метиленового синего 1 мин.; Промыть водой; Высушить |
|
сущность метода |
При частичном гидролизе клеточной стенки фуксин взаимодействует с миколовыми кислотами и образует комплекс в присутствии фенола. Фенол разрыхляет бактериальную оболочку, и краска проникает внутрь клетки. Кислотоустойчивые -красные , некислотоустойчивые - синие |
Практическое применение: для диагностики заболеваний (туберкулез)