
- •Вопросы контроля исходного уровня
- •Тема 2 Структура бактериальной клетки. Сложные методы окраски бактерий ( Грама, Циля-Нильсена, Бурри-Гинса).
- •Основные вопросы темы
- •Вопросы контроля исходного уровня
- •1. Основные структурные элементы прокариотических клеток.
- •2. Сложные методы окраски.
- •Практические навыки.
- •Тема 3 Культивирование микроорганизмов. Питательные среды. Выделение чистых культур аэробных бактерий. Способы обеззараживания.
- •Основные вопросы темы
- •Вопросы контроля исходного уровня
- •1. Условия культивирования микробов.
- •2. Методы выделения чистых культур
- •3. Способы обеззараживания
- •Практические навыки
- •Демонстрационные препараты
- •Тема 4 Выделение чистой культуры аэробов, методы идентификации. Культивирование анаэробов.
- •Основные вопросы темы
- •Выделение чистой культуры аэробов и ее идентификация.
- •Методы культивирования анаэробов.
- •Практические навыки
- •Морфология микроорганизмов.
- •Физиология микроорганизмов.
- •Бакпрепараты.
- •Практические навыки
- •Тема 6 формы изменчивости микроорганизмов. Общая характеристика вирусов. Бактериофаги.
- •Основные вопросы темы
- •1. Формы изменчивости микроорганизмов.
- •2. Практическое значение учения о генетике микроорганизмов.
- •Бактериофаги
- •Практические навыки
- •Демонстрационные препараты
- •Тема 7 санитарная микробиология. Санитарно-микробиологические исследования воды, воздуха, пищевых продуктов, лекарственных препаратов.
- •Основные вопросы темы
- •1. Санитарно-бактериологическое исследование водопроводной воды.
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование воздуха.
- •3. Санитарно-бактериологическое исследование молока.
- •4. Микробиологический контроль чистоты лекарственных препаратов.
- •5. Исследование препаратов обладающих антимикробным действием.
- •1.Санитарно-бактериологическое исследование водопроводной воды.
- •2.Санитарно-бактериологическое исследование воды из открытого водоема
- •3. Определение микробного числа воздуха (количество бактерий в 1 м3).
- •4.Исследование молока
- •5. Определение чистоты рук.
- •Определение микробной обсемененности нестерильных лекарственных препаратов.
- •Тема 8 Нормальная микрофлора тела человека, ее возрастные особенности, значение для организма. Дисбактериоз.
- •Основные вопросы темы
- •1. Нормальная микрофлора человека.
- •2. Микрофлора кожи.
- •3. Микрофлора полости рта.
- •Микрофлора миндалин.
- •Микрофлора носа и носоглотки.
- •4. Микрофлора желудочно-кишечного тракта.
- •5. Значение нормальной микрофлоры тела человека.
- •6. Дисбактериоз.
- •Самостоятельная работа студентов.
- •Практические навыки
- •Литература
- •Приложение 1 Способы и режимы дезинфекции и стерилизации, применяемые в бактериологической лаборатории
- •Приложение 2 Анализ № 25 мсч п.О. “Планета”
- •Приложение 3 Анализ № 704 мсч п.О. “Планета”
- •Оглавление
3. Санитарно-бактериологическое исследование молока.
Молоко является широко используемым пищевым продуктом и основным продуктом для питания детей (особенно до 1 года). Вместе с тем молоко представляет собой хорошую питательную среду для развития многих микроорганизмов, в том числе и патогенных. Кроме того молоко имеет “первичную” микрофлору, которая проходит фазы развития: бактерицидную, переходную, молочнокислую, дрожжеплесневую и гнилостную. Условно-патогенные микроорганизмы при размножении в молоке вызывают “пороки молока” со значительным нарушением органолептических свойств продукта. Особенно опасным является попадание в молоко патогенных кишечных бактерий и стафилококка, которые, размножаясь в молоке, накапливают токсины и могут вызывать тяжелое пищевое отравление.
При употреблении инфицированного молока возникают заболевания: брюшной тиф, дизентерия, сальмонеллез, эшерихиоз, бруцеллез, туберкулез, ящур и др. Поэтому во всех молочных продуктах не допускается содержание патогенных бактерий.
Санитарно-бактериологическое исследование включает:
- определение микробного числа в 1 мл молока при его разведении 1:100 и 1:1000.
- определение титра кишечной палочки.
- обнаружение патогенных бактерий и токсинов.
Для определения титра кишечной палочки делают посев молока на среду Кесслера (пептонная вода, лактоза, желчь и генцианвиолет для подавления роста грамположительных бактерий). В три пробирки вносят по1,0 мл и в три по 0,1 мл молока, инкубируют при 43о С в течение суток, затем из забродивших проб делают высев на среду Эндо, на вторичную бродильную пробу и среду Козера. Показателем фекального загрязнения считают грамотрицательные палочки, вызывающие брожение при 43о С и не дающие роста на цитратной среде Козера.
Пастеризованное молоко бутылочное группы А имеет коли-титр 3,0, микробное число до 75.000.
При кипячении молока сохраняется стафилококковый энтеротоксин, но погибают патогенные и условно-патогенные микробы, вместе с тем молоко (особенно женское) теряет почти все защитные иммунные свойства.
4. Микробиологический контроль чистоты лекарственных препаратов.
Проблема микробной загрязненности лекарственных препаратов одна из наиболее важных в медицинской практике. Инфицирование лекарств может происходить на всех этапах их приготовления, в процессе получения из лекарственного сырья, через используемую воду, недостаточно стерильную лекарственную посуду, воздух производственных помещений, руки персонала, нарушения санитарных условий хранения, особенно температурно-влажностного режима. Поэтому необходим тщательный микробиологический контроль на всех этапах получения и хранения препаратов.
Инфицированные препараты могут вызвать заболевания человека, тяжелые пирогенные и аллергические реакции. Микроорганизмы значительно изменяют и свойства самого препарата. Может происходить накопление микробных токсинов и ферментов, расщепление химических структур, появление новых ядовитых свойств.
По технологии получения и санитарным нормам лекарственные препараты могут быть разделены на 3 группы:
1). Стерильные (для парентерального введения, капли в глаза, нос, мази для применения на рану, ожоговую и обмороженную поверхность и все препараты для новорожденных детей).
2). Нестерильные препараты без антимикробного действия.
3). Препараты обладающие антимикробным действием.
Для оценки качества всех препаратов определяют общее число бактерий в 1,0 г.
Количественное определение микроорганизмов производят методом двухслойных агаровых пластинок: лекарственный препарат 10,0 г растворяют в 100,0 мл фосфатного буферного раствора рН-7,0 (получают разведение препарата 1:10). По 1,0 мл растворенного препарата вносят в две пробирки с расплавленным МПА, все перемешивают и выливают на поверхность чашки Петри с МПА, инкубируют 5 суток в термостате и определяют число выросших колоний, делают пересчет на 1,0 г вещества.
По ТУ в препаратах, применяемых через рот, допускается содержание в 1,0 г 1000 бактерий из них 100 клеток дрожжевых и плесневых грибов.
В препаратах, предназначенных для введения в полость уха, носа, интравагинально, допускается содержание в 1,0 г 100 бактерий, в том числе и грибов.
Кроме микробиологического контроля чистоты препаратов по микробному числу, не разрешено содержание в них ряда микроорганизмов, что контролируется высевами на специальные среды.
- для обнаружения анаэробных микроорганизмов делают посев 1,0 мл разведенного препарата на тиогликолевую среду.
- для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae (кишечная палочка, сальмонелла, протей) 10,0 мл препарата вносят в накопительные среды или ГПС, затем делают высев на Эндо и Висмут-сульфитный агар. - для определения Pseudomonas aеruginosa (палочка синезеленого гноя). 10,0 мл вносят в МПБ с глицерином, инкубируют 48 часов и делают высев на МПА с глицерином или глюкозой.
- для обнаружения Staph. aureus. 10,0 мл препарата засевают сначала в мясо-пептонный бульон (МПБ) с маннитом, затем делают высев на МПА с маннитом или ЖСА.
При выделении указанных микроорганизмов лекарственные препараты бракуются и подлежат уничтожению.