Задача №7

У больного при подозрении на гемолитическую анемию необходимо определить осмотическую резистентность эритроцитов.

Задания

1. Что означает осмотическая резистентность эритроцитов, нормы этого показателя?

2. Как проводится определение осмотической резистентности?

3. Для диагностики каких заболеваний используется этот метод?

4. Перечислите функции эритроцитов.

5. Как осуществлять предстерилизационную очистку инструментов?

Эталон ответа к задаче №7

1. Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует их устойчивость к изменению концентрации солей. Эритроциты устойчивы при концентрации 0,85-0,9%. В гипотонических растворах происходит гемолиз эритроцитов. Концентрация раствора, при которой начинается гемолиз эритроцитов, называется минимальной резистентностью. Она равна 0,48-0,46%. Концентрация, при которой гемолизируются все эритроциты называется максимальной (0,34-0,32%).

2. В пробирки с разной концентрацией раствора NaCl добавляют гепаринизированную кровь. Степень гемолиза оценивают с помощью ФЭКа.

3. Осмотическая резистентность определяется при подозрении на гемолитическую анемию, при которой она снижается, и поэтому показатель минимальной резистентности становится выше, а максимальной - ниже.

4. Эритроциты:

1. транспортируют кислород при помощи гемоглобина и углекислоту буферными системами цитоплазмы;

2. участвуют в поддержании кислотно-основного равновесия, удаляя летучие кислоты (СО₂) из организма;

3. участвуют в свертывании крови, так как входят в состав первичного тромба;

4. являются универсальной транспортной системой, перенося молекулы Ig и другие молекулы.

5. Для предстерилизационной очистки инструментов используют:

1) Замачивание в 0,5% растворе кислот при температуре 40⁰ - 15 минут или в 0,5% растворе порошка "Астра", "Лотос", "Прогресс" при температуре 50⁰ - 15 минут.

2) Мытье каждого предмета в моющем растворе при помощи ерша или ватно-марлевого тампона 0,5 минуты.

3) Споласкивание проточной водой при использовании средства "Биолот" - 3 минуты, при использовании порошков "Астра", "Лотос", "Прогресс" - 10 минут.

4) Споласкивание дистиллированной водой 0,5 минуты.

5) Высушивание при температуре 50⁰ до полного исчезновения влаги.

Задача №8.

При определении группы крови с цоликлонами агглютинация произошла в лунке с

цоликлоном А.

Задания.

1. Какая группа крови у пациента? Какие группы крови системы АВО вам известны?

2. На каком принципе основана реакция; для чего определяют группы крови?

3. Что такое цоликлоны?

4. Для чего используется перекрёстный метод?

5. Как продезинфицировать пластины для определения групп крови?

Эталон ответа к задаче №8

1. На поверхности эритроцитов имеются олигосахариды, обладающие

антигенными свойствами. Их два вида. Они были названы А и В. В сыворотке крови были

обнаружены естественные антитела двух видов к этим антигенам: альфа и бета.

2. При смешивании крови, эритроциты которой содержат антиген А с кровью, в сыворотке которой есть антитело альфа, происходит агглютинация эритроцитов. При смешивании крови, эритроциты которой содержат антиген В с кровью, в сыворотке которой есть антитело бета, также происходит агглютинация эритроцитов. Поэтому антигены А и В были названы агглютиногенами, антитела - агглютининами, а процесс их взаимодействия - реакцией изогемагглютинации. По наличию и отсутствию в крови агглютининов и агглютиногенов кровь людей была разделена на 4 группы:

I – на эритроцитах антигены отсутствуют, в сыворотке содержатся антитела альфа и бета,

II – на эритроцитах имеется антиген А, в сыворотке – антитела бета,

III - на эритроцитах - антиген В, в сыворотке - антитела альфа,

IV - на эритроцитах антигены АВ, в сыворотке антитела отсутствуют.

Эти 4 группы объединены в систему групп крови АВО. В бланках анализов принято обозначать группы крови следующим образом:

первая - 0(I),

вторая - А(II),

третья – В(III),

четвёртая - AB(IV).

Результат исследования: вторая, третья, четвёртая и первая группы. В случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, т.е. установлении группы крови AB(IV), необходимо провести дополнительное контрольное исследование данного образца крови с физиологическим раствором. Для этого смешивают одну большую каплю (0,1 мл) физ. раствора с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к группе АВ(IV).

3. Цоликлоны – это продукты слияния мышиных миеломных клеток с антигенами "А" и антигенами "В".

4. Перекрёстный метод используется для определения групповых антигенов. Результаты реакций при использовании цоликлонов и стандартных эритроцитов должны совпадать.

5. Пластины, на которых происходило определение, замачиваются на 1 час в дез. растворе, на 60 минут.