2 . Электронная микроскопия

• электронный микроскоп изобретён в 30 - х годах XX в. , даёт увеличение до 10⁶ раз

• применим только к фиксированным клеткам ( фиксатор убивает клетку , но не вызывает грубых изменений структур ; под действием фиксатора вещества клетки переходят в нерастворимую форму

• в основе действия лежит просвечивание пучком электронов тончайших , обработанных электронопоглощающими и одновременно фиксирующими соединениями или напылённых парами металлов срезов и фиксация микропрепаратов в сильно увеличенном виде на специальный экран или фотопластинку

• применяется для исследования субмикроскопического строения клеток и органелл

3. Электронная растровая эмиссионная ( сканирующая ) микроскопия

• даёт возможность получать трёхмерную ( обьёмную ) картину изображения поверхности срезов и целого объекта

4. Микрохимические ( цитохимические ) методы

• применение специальных цветных реакций непосредственно в клетке

• служат для определения локализации и количественного содержания отдельных химических веществ

5. Биохимические методы

- дают возможность получения индивидуальных химических соединений и отдельных органелл

• метод дифференциального центрифугирования - различные клеточные органеллы и включения имеют различную плотность , поэтому при очень быстром вращении ( до 60 тыс. об \ мин ) в специальном приборе - ультрацентрифуге - органеллы тонко измельчённых клеток выпадают в осадок из раствора , располагаясь слоями в соответствии со своей плотностью ( более плотные компоненты осаждаются при более низких скоростях центрифугирования ) . Эти слои разделяют и изучают отдельно

• хроматографическое разделение смесей

• электрофорез

6. Биофизические методы

• метод меченых атомов - замена в молекуле одного из атомов соответствующим радиоактивным изотопом ( ³ Н , ³² Р , ¹⁴ С ) - радиоактивная метка ( не отличается по химическим свойствам , зато легко регистрируется счётчиком при перемещениях в результате химических превращений ) ; позволяет установить последовательность этапов , продолжительность во времени , зависимость от условий биохимических процессов , происходящих в живой клетке

• изотопный анализ

• регистрация биоэлектрических потенциалов с помощью электрофизиологической аппаратуры

• хемилюминесценция

• математическое моделирование

- исследуется функционирование мембран , функции органоидов , механизмы возникновения и проведения возбуждения , возникновение мышечного сокращения , биофизические особенности клеток и др

7. Микрохирургические методы

• применяется для генетических , эмбриологических и физиологических исследований , для извлечения частей клетки и их последующего биохимического анализа

• микрооперации производятся с помощью прибора микроманипулятора и при большом увеличении микроскопа ( пересадка ядер , хлоропластов , слияние протопластов , пересадка фрагментов зародышевых слоёв зиготы , гибридизация соматических клеток и др .)

8. Метод культуры клеток и тканей

• выращивание выделенных из организма клеток или тканей на искусственных стерильных питательных средах

• культура клеток и тканей - модель для изучения процессов формирования органелл , депонирования запасных органических соединений , роста клеточных оболочек , биосинтеза физиологически активных веществ и т . п .

9. Рентгеноструктурный анализ

• основан на дифракции рентгеновских лучей при прохождении через вещества с упорядоченной структурой ( лежит в основе расшифровки структуры ДНК , гемоглобина , миоглобина , коллагена и др . биологических веществ