Йонообмінна хроматографія. В основі лежить процес йонного обміну
рА + Ві Аі + Вр
р – до розчинника
і – до йонообмінника
Розділення в йонообмінній хроматографії грунтується на різниці спорідненості аналізованих йонів до йонів протилежного знаку, жорстко закріплених в йонообміннику. Такі йони називають фіксованими, а йони що компенсують їх заряд – протийонами, які входять в склад рухомої фази.
При хроматографії йон А, який входить в колонку, буде обмінюватись згідно рівняння обміну з рухомим протийоном йоніоніту В. Оскільки йонний обмін проходить при безперервному русі елюенту, що містить В, рівновага буде зсуватись в бік десорбції йону А. Він буде заміщатись на йон В, який поступає з розчину. Почнеться обернена реакція. За цей час зона проби посунеться на колонці. Зона йонів з великою спорідненістю до фіксованих йонів протилежного знаку буде відставати від зони йонів з меншою спорідненістю.
Нерухомою фазою є мінеральні матеріали: цеоліти, глинисті матеріали (каолін, монтморилоніт, слюди і інші), синтетичні неорганічні йоніти і спеціально приготоване сульфоване вугілля.
Тонкошарова хроматографія
Тонкошарова хроматографія (ТШХ) – вид хроматографії, в якій розділення забезпечується переміщенням рухомої фази (РФ) через нанесений на поверхню тонкий шар сорбенту. Рух по пластинці забезпечується капілярними силами.
Є кілька видів ТШХ, які відрізняються способом подачі розчинника. Найбільш поширена є (висхідна) хроматографія. Для її здійснення елюєнт наливають на дно камери, а нижній край пластинки з нанесеними пробами поміщають в розчинник, який підіймаючись по пластинці знизу вверх, розділяє при цьому компоненти суміші, які слабо рухаються по шару.
Для нисхідної хроматографії розчинник подають зверху. При цьому до капілярних сил додаються ще й сили гравітації. Тут розділення проходить швидше.
Досить ефективною є радіальна хроматографія, для якої пробу наносять в центр пластини і знизу за допомогою фітиля подають елюєнт, який розносить пробу у всіх напрямках. При цьому хроматограма має вид концентричних кіл, кожне із яких відповідає окремому компоненту.
Хроматограми мають вид.
висхідна нисхідна
хроматографія хроматографія
радіальна
хроматографія
В залежності від режиму подання елюєнта, розрізняють ТШХ безперервного, багаторазового, ступінчатого, градієнтного і двохмірного хроматографування.
При безперервному хроматографуванні розчинник постійно подається на пластину, а досягнувши кінця шару, або випаровується, або поглинається паперовим фільтром. Для покращення розділення компонентів суміші можна багатократно повторяти одним і тим же розчинником, висушуючи пластину перед кожним послідуючим хроматографуванням. Ступінчате хроматографування проводять різними розчинниками так, що новий розчинник піднімається по пластинці вище рівня попереднього. Якщо компоненти суміші забарвлені, то їх можна побачити візуально.
Незабарвлені суміші необхідно проявляти. При цьому в залежності від визна-чуваних речовин їх можна виявити:
1) в світлі УФ плями речовин можуть самі світитись, або гасити люмінісценцію, якщо пластинки оброблені люмінісціюючими речовинами (UV-250 Silufol).
2) в парах йоду – виявляються речовини, які мають подвійні зв’язки.
3) обприскування проводити спеціальними обприскувальними реагентами. Застосування реагента залежить від того, які речовини виявляють.
4) застосування свідків (точно відомих речовин) – є надійним методом виявлення компонентів.