2.2. Исследование пространственных эффектов в гомогенной постановке.

К сегодняшнему дню существует ограниченное число работ, посвященных экспериментальному исследованию пространственно-временных характеристик процесса свертывания крови. Это связано, по-видимому, с тем, что внимание пространственным аспектам свертывания стало уделяться сравнительно недавно. В последние годы подробно была исследована кинетика образования тромбина в клеточной модели гемостаза [36, 37]. По постановке данные эксперименты следует отнести к гомогенным, однако выводы, которые делают авторы, идейно развивают пространственный подход. В этих работах к тромбоцитарной суспензии добавлялись плазменные концентрации очищенных факторов свертывания (без фибриногена), TFPI и АТIII, а активация осуществлялась маленькой концентрацией несущих TF фосфолипидных везикул или клеток (активированных моноцитов - предшественников лимфоцитов - или фибробластов - клеток соединительной ткани). В такой постановке пространственно разделены фаза инициации гемостаза (на активированных лимфоцитах или фибробластах) и фаза образования больших концентраций прокоагулянтных факторов (на тромбоцитах), однако в ходе эксперимента исследуется гомогенная кинетика активации тромбоцитов и фактора Х или протромбина. Показано также [38,39], что фактор Ха необходим как для активации тромбоцитов (вблизи поверхностей, несущих TF), так и для производства тромбина (на поверхности тромбоцитов), причем для нормальной генерации тромбина на тромбоцитах достаточно лишь 3% от плазменного уровня фактора X [40]. Фактор IXа не нужен для фазы инициации (на поверхностях с TF), однако необходим для производства тромбина на тромбоцитах. Отсутствие фактора VIII также не влияет на фазу инициации гемостаза, но полностью ингибирует производство тромбина вне поверхностей, несущих TF [42].

Суммируя полученные данные, авторы выдвинули гипотезу, согласно которой в процессе образования тромба можно выделить две фазы, происходящие на пространственно разных поверхностях [36,37]. Первая фаза происходит на клетках, несущих TF. При этом на фосфолипидной поверхности, окружающей молекулы TF, во-первых, образуются небольшие концентрации фактора Ха и тромбина, которых достаточно для активации тромбоцитов, а во-вторых, происходит активация фактора IX. Вторая фаза свертывания определяется диффузией молекул фактора IXa от места своего производства на поверхность активированных тромбоцитов, где собирается внутренняя теназа (комплекс IXa-VIIIa), производящая фактор Xа. Факторы Ха и Vа на мембране тех же тромбоцитов образуют протромбиназу, и тем самым осуществляют свертывание вдали от поверхностей локализации TF. В отсутствие внутренней теназы (при гемофилиях А и В) фактор Xа может образовываться лишь на поверхности клеток, несущих TF. Поскольку в объеме плазмы свободный (не связанный с поверхностью) фактор Ха быстро ингибируется антитромбином III, за счет диффузии от места производства на несущей TF поверхности только небольшая часть молекул фактора Xа достигает тромбоцитарной мембраны. Таким образом, согласно [36], роль внутренней теназы заключается в том, что она производит протромбиназу на той поверхности, которая может успешно поддерживать свертывание вокруг места повреждения. При гемофилии свертывание должно происходить, но лишь на богатых тканевым фактором фибробластах и гладкомышечных клетках (начальная фаза образования сгустка), и на тромбоцитах в непосредственной близи от места повреждения, а роста сгустка происходить не должно. Очевидно, гипотеза Хоффман М. предполагает, что кинетика роста сгустка определяется в первую очередь диффузией фактора IXa от места повреждения. Однако экспериментальной проверки своих выводов для случая пространственного роста тромба авторы не проводили.