Обнаружение возбудителя листериоза в кормах

Выше была уже отмечена более высокая чувствительность РНФ по сравнению с бактериологическим методом исследования при обнаружении возбудителя листериоза в почве и воде. Поэтому необходимо было определить возможность использования РНФ для обнаружения возбудителя листериоза в кормах, в частности, силосе и комбикорме.

Для проведения РНФ был использован фаг L4A, обладающий хорошей адсорбционной способностью, коротким латентным периодом, высокой урожайностью, специфичностью. Индикаторной культурой для фага L4A служил штамм 9-72. Он обладает характерными для листерий морфологическими и культурально-биохимическими свойствами, по антигенному строению относящийся ко 2 серогруппе.

Результаты исследований свидетельствуют, что возбудитель листериоза выявляется с помощью РНФ в силосе и комбикорме, заражённых культурой листерий в дозах не только 10⁶м.т./г, но и в дозах 10³м.т./г без выделения их в чистом виде, при наличии посторонней микрофлоры. На обнаружение возбудителя листериоза в кормах с помощью РНФ затрачивается не более 24 часов.

Таким образом, полученные данные указывают, что для обнаружения возбудителя листериоза в силосе и комбикорме может быть с успехом использована РНФ.

Выводы

Итак, проведённые исследования по изучению возможности использования РНФ для обнаружения листерий в органах и объектах внешней среды показывают следующее:

Во-первых– РНФ как метод диагностики чувствительней бактериологического исследования при обнаружении возбудителя листериоза в различных субстратах. Это выражается в большей частоте положительных результатов РНФ по сравнению с бактериологическим методом исследования. Положительные результаты появляются при наличие такого количества листерий, которое бактериологическими исследованиями не выявляется.

Во-вторых,– РНФ является ускоренным методом диагностики. Она позволяет за относительно коротко срок (24-48 часов) обнаружить возбудителя листериоза в присутствия посторонней микрофлоры.

В-третьих, при помощи РНФ можно определить серогрупповую принадлежность листерий, которыми вызвана вспышка заболевания, без выделения культуры в чистом виде.

Указанная методика постановки РНФ даёт положительные результаты с использованием листериозных монофагов L2A и L4A

Раздельное применение монофагов вызывает ряд затруднений технического характера связанных, в частности, с объемом исследований и необходимостью расхода большого количества лабораторной посуды реактивов и питательных сред. В связи с этим, с целью сокращения объёма исследований и одновременного выявления листерий IиIIсерогрупп рекомендуем использовать технику постановки РНФ смешанными листериозными фагами. Исходя из того, что листериозные монофаги L2А и L4A строго специфичны, они не интерферировали. При использовании смеси фагов в РНФ для обнаружения возбудителя листериоза были проведены исследования МПБ, инфицированного отдельно культурами листерий 1 и 2 серогруппы,E.coli,Streptococcus albusи Staphylococcua aureus, a так же почвы песчаной и воды водопроводной, инфицированных культурой листерийIсерогруппы (штамм 9-127) в концентрации 810²– 810⁷м.т./мл(г)и культурой листерий иII серогруппы) штамм – 9-72) в концентрации 10²– 10⁸м.т./мл (г). Параллельно для исследования этих проб использовали РНФ с монофагами.

Проведенные исследования позволили установить, что листериозные бактерии могут быть выявлены при постановке РНФ как с монофагами, так и со смесью фагов. Кроме того, использование смеси фагов позволяло определять листерий как I, так иIIсеро­групп. Тогда как с помощью монофагов выявляли листерии по серогруппам.

При использовании монофагов и их смеси в РНФ при исследовании с гетерологическими бактериальными культурами ни в одном случае не было увеличения количества фага, что указывает на высокую спецефичность данных биологических агентов и методики их использования.