3. Ветеринарная микробиология, вирусология, паразитология и эпизоотология

__________________________________________

УДК 619:616.69-008.8-022.7:636.2

Атрощенко М.М., Пименов Н.В.

Микрофлора спермы жеребцов-производителей

Выделяемый из спермы жеребцов видовой и количественный состав микрофлоры разнообразен и непостоянен. И очень часто зависит от соблюдения санитарно-гигиенический требований, предъявляемых к получению и технологической обработке спермы.

По данным Куклина А.Д. (1973) при микробиологическом исследовании семени жеребцов были выделены: Sarcina citrea, B. megaterium, E. coli, B. proteus vulgaris, B. mesenthericus var flavus, Micrococcus parvulus. Большинство выделенных микроорганизмов были сапрофитными.

По результатам исследований Храбровой Л.А. (1990) в сперме жеребцов преобладает сапрофитная микрофлора, представленная бациллами, микрококками, флавобактериями, грибами.

По действующему ГОСТу 23681-79 «Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная» содержание патогенных и условно патогенных микроорганизмов в сперме не допускается.

В связи с этим, мы поставили перед собой задачу, определить общую микробную загрязнённость спермы жеребцов, видовой состав микроорганизмов и их патогенность.

Экспериментальные исследования проводились в отделе физиологии ВНИИ коневодства, в лаборатории микробиологии РГСХА им. П.А. Костычева, в МУЗ «Диагностический центр» г. Рязани в течение 2003-2005 гг.

Мы изучили количественный и видовой состав микрофлоры свежеполученной спермы жеребцов. Для проведения исследований, была использована сперма 16 жеребцов-производителей различных пород.

Исследуемый материал (сперму) высевали на среды: МПА, кровяной агар, желточно солевой агар, среду Эндо, среду Сабуро.

После инкубации посевов в термостате при 37±0,5°С в течении 24 часов, изучали культуральные свойства изолированных колоний. Из выделенных культур готовили мазки, окрашивали их по Граму, и изучали под микроскопом морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов. Пересевали культуры на дифференциально диагностические среды. Изучали биохимические свойства (ферментативную активность) культур. Патогенность выделенных микроорганизмов определяли по гемолитическим и плазмокоагулирующим свойствам. Количество микробных тел выделенных культур выражали в колониеобразующих единицах – КОЕ/мл.

Общая микробная загрязнённость спермы жеребцов представлена в таблице 1.

Таблица 1.Количество микробных тел в сперме жеребцов, взятой согласно инструкции по искусственному осеменению кобыл (1969).

№ п/п	Клички жеребцов	Число эякулятов	Количество микробов в сперме, тыс. КОЕ/мл
			в среднем	колебания
1	Нарцисс	27	32,4	12,0-69,0
2	Гарант	18	4,2	1,2-12,4
3	Чуткий	9	7,4	5,7-10,2
4	Тагай	12	35,7	16,4-43,0
5	Эгеюс	3	70,7	34,8-115
6	Каюр	4	4,5	3,2-5,6
7	Акбелек	4	18,4	15,8-21,3
8	Жрец	12	64,3	44,2-98,0
9	Другие жеребцы (8 голов)	21	38,9	2,1-300,0
В среднем по 110 эякулятам			30,2	1,2-300,0

Из таблицы 1 видно, что сперма, взятая согласно существующей инструкции (1969), содержит большое число микроорганизмов. Из 1 мл такой спермы выделено в среднем 30,2 тыс. микробов с колебаниями в пределах от 1,2 до 300 тыс., при коли-титре: от отрицательного до 0,0001. При этом в 1,8% случаев сперма контаминирована грибами.

От общего числа эякулятов только 18, что составляет 16,4% соответствуют установленным санитарным требованиям. Следовательно, существующий комплекс санитарных мероприятий не обеспечивает получения спермы с минимальной бактериальной загрязнённостью. Поэтому для получения спермы, свободной от микроорганизмов, требуется введение непосредственно в сперму новых санирующих веществ, с помощью которых будет возможно получение максимально большего числа эякулятов соответствующих санитарным требованиям.

Видовой состав микроорганизмов спермы жеребцов представлен в таблице 2.

Таблица 2. Микрофлора нативной спермы жеребцов

Микроорганизмы	Частота высева, %	Содержание в 1 мл обсеменённых образцов, тыс. КОЕ/мл
		минимальное	максимальное
Общее кол-во микроорганизмов	100	1,2	300,0
Стафилококки	36	0,4	100,0
Стрептококки	26	0,3	100,0
Микрококки	6	21,0	40,0
Энтеробактерии	24	0,6	100,0
Псевдомонады	4	0,4	1,0
Дрожжеподобные грибы рода Кандида	4	0,3	1,0

Стафилококки обнаружены в сперме у большинства жеребцов (75%). Из них гемолитических штаммов 58%, по отношению к общему количеству представителей рода Staphylococcus, штаммов, способных коагулировать плазму, соответственно 37%.

Представители семейства Enterobacteriaceae обнаружены в 24% проб, в сперме у 56% исследованных производителей.

Стрептококков выделили из эякулятов 50% жеребцов. Гемолитических штаммов 79% от общего количества стрептококков, из них штаммов с β-гемолизом 29%.

Псевдомонады выделены в 4% исследуемых эякулятов. Из них один штамм Pseudomonas aeruginosa обладал гемолитическими свойствами.

Дрожжеподобные грибы рода Candida выделены из эякулятов у двух жеребцов, в ассоциации с микроорганизмами.

Микрококки были выделены в трёх эякулятах.

Выделенные из эякулятов микроорганизмы чаще всего встречаются в ассоциациях (91,3%), чем в монокультурах (8,7%).

Из 74% эякулятов были выделены штаммы с гемолитическими свойствами.

В результате проведенных бактериологических исследований можно сделать следующие выводы:

1. Сперма большинства исследованных жеребцов содержала условно патогенные микроорганизмы в ассоциациях. Чаще всего флора представлена кокками и энтеробактериями.

_{2. Только 16,4% полученных эякулятов жеребцов соответствуют установленным санитарным требованиям.}

УДК 639.13:591.2

Денисенко Т.Е.