Соотношение нейтрофилов и лимфоцитов в крови рысаков

В производственных условиях Тамбовского ипподрома в период летнего (май – октябрь) и зимнего (ноябрь - февраль) беговых сезонов исследовали кровь тренируемых рысаков орловской и русской пород. Под опытом было 43 лошади 2, 3, 4-х лет и старшего возраста.

Подопытные лошади – жеребцы и кобылы – получали одинаковый рацион кормления (овёс – 5 кг, сено – 6 кг).

В день резвостных испытаний у них в состоянии покоя в конюшне, до выезда на беговой круг брали кровь на анализ.

Кровь брали из ярёмной вены. В пробирку с 10% раствором лимонно-кислого натрия накапливали около одного миллилитра крови. Изготавливали мазки крови и окрашивали их по методу Май-Грюнвальда. Так как краситель содержит метиловый спирт, отдельную фиксацию мазков не проводили. Высушенные мазки микроскопировали в счётной камере Горяева. Рассчитывали соотношение числа нейтрофилов и лейкоцитов (н/л), которое по данным П.Д. Горизонтова (1983), изменяется вследствие физической нагрузки или при развитии состояния стресса.

Следующие исследования проводили сразу после резвостного испытания (через 4-5 минут после финиша) и в восстановительный период (через 1 час после финиша). В восстановительный период лошадь подавалась на место исследования в поводе.

Показатель соотношения числа нейтрофилов и лейкоцитов (н/л) используется в клинической диагностике, в животноводстве и, в частности, спортивном коневодстве для того, чтобы оценить степень воздействия фактора внешней среды или физической нагрузки на организм животного. Исследования показали, что величина соотношения н/л в покое незначительно отличается у орловских и русских рысаков (0,46 и 0,51 соответственно).

Таблица 1. Соотношение нейтрофилов и лейкоцитов в крови рысаков разных пород до и после выступлений

Порода	Время взятия крови
	До выступления	Сразу после финиша	Через 1 час после финиша
Орловская	0,46	0,83	0,69
Русская	0,51	0,75	0,72

Однако в результате бега на приз у орловских рысаков величина этого показателя увеличилась на 80,4%, тогда как у русских – всего лишь на 47%; через 1 час после выступления у орловцев н/л был увеличен по сравнению с состоянием покоя (до выступления) на 50%, а у русских на 41,2%. Таким образом, одна и та же физическая нагрузка обуславливает неодинаковые изменения систем организма, ответственных за развитие состояния напряжения (гипоталамус–гипофиз-кортикоадреналовая система).

УДК 619:616.1-073.178

Милаёва И.В., Тульская Е.В.

Научные руководители – профессор Зайцев С.Ю., профессор Максимов В.И.

Исследование поверхностного натяжения сыворотки крови лошадей методом межфазной танзиометрии

Метод межфазной тензиометрии (измерение поверхностного натяжения биологических жидкостей) уже длительное время успешно применяется в медицине для ранней диагностики болезней и контролем за лечением. Исследованы показатели поверхностного натяжения биологических жидкостей при целом ряде болезней человека (сахарный диабет, хронический гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др.), определены нормативные показатели для здоровых людей в зависимости от возраста и пола.

Для ветеринарии этот метод совершенно новый, данных о его использовании при лечении животных нет. Мы провели исследование поверхностного натяжения сыворотки крови лошадей до и после размораживания с целью определения оптимальных условий для исследования поверхностного натяжения. Для исследования были взяты пробы крови от коней разного возраста на Центральном Московском ипподроме. Исследования проводились на кафедре органической и биологической химии МГАВМиБ им. К.И. Скрябина. Сыворотки крови исследовались сразу после отделения сыворотки, затем замораживались при температуре -2⁰ С и хранились в таких условиях одну неделю, затем размораживались при комнатной температуре и исследовались повторно.

Измерение поверхностного натяжения проводилось с помощью прибора ВРА-1Р (Maximum Bubble Pressure Tensiometer, Sinterface Technologies, ФРГ). Принцип работы тензиометра ВРА основан на методе максимального давления в пузырьке, который был разработан одним из первых, но является до сих пор наиболее удобным для исследования биологических систем.

Исследования проводились при комнатной температуре 24⁰ С стандартным методом, время эксперимента 30 мин, частота образования пузырьков 5 секунд, ошибка измерения от 0,01 до 0,50 мН/м.

В результате проведённых экспериментов были получены следующие данные, представленные в таблице 1.

Таблица 1. Показатели межфазной тензиометрии сыворотки крови жеребцов до и после размораживания.

Вид, пол	возраст	Состояние сыворотки	Показатели межфазной тензиометрии, мН/м
			0,01 с	1 с
Лошадь, жеребец	2 года	свежая	71,32	72,21
		размороженная	71,52	71,24
	3 года	свежая	73,59	72,18
		размороженная	71,93	71,24
	4 года	свежая	75,66	68,39
		размороженная	71,62	69,79
	5 лет	свежая	73,63	75,65
		размороженная	72,71	72,65
	6 лет	свежая	75,53	66,01
		размороженная	68,65	64,42

_{Как видно из таблицы 1 поверхностное натяжение сыворотки крови жеребца в возрасте 2 года самое низкое как для свежей, так и для размороженной сыворотки в 0,01с измерения 71,32мН/м до размораживания и 71,52 мН/м после размораживания. К 1 с измерения значения изменяются соответственно до 72,21мН/м у свежей сыворотки и 71,24 мН/м у размороженной.}

_{Максимальное значение поверхностного натяжения в начале измерения у жеребца в возрасте 6 лет 75,53 мН/м и 4 года 75,66 мН/м у свежей сыворотки, но после размораживания оно существенно снижается соответственно до 68,65 мН/м и 71,62 мН/м. В возрасте 3 года значение поверхностного натяжения в 0,01с измерения до размораживания 73,59 мН/м, после – 71,93 мН/м, а к 1 с снижается до 72,18 мН/м и 71,24 мН/м. У пятилетнего животного в начале измерения эти показатели соответственно 73,63 мН/м (свежая сыворотка) и 72,71 мН/м (размороженная сыворотка).}

К 1 с измерения наблюдается во всех возрастах снижение поверхностного натяжения как в свежей так и в размороженной сыворотки кроме свежей сыворотки жеребцов двух и пяти лет. Наибольшее снижение поверхностного натяжения наблюдается к 1 с измерения в возрасте 4 года (от 75,66 до 68,39 мН/м) и 6 лет (от 75,53 до 66,01мН/м).

Выводы: 1. Значение поверхностного натяжения сыворотки крови у жеребцов изменяется в зависимости от возраста.

2. После размораживания значение поверхностного натяжения сыворотки крови жеребцов отличается от такового у свежей сыворотки.

Литература

1. Казаков В.Н., Синяченко О.В., Игнатенко Г.А. и др. // Межфазная тензиометрия биологических жидкостей в терапии. – Донецк: Донеччина, 2003. – С. 1-126

2. Казаков В.Н., Миллер Р., Синяченко О.В. и др. Динамическая межфазная тензиометрия - новый метод изучения биологических жидкостей человека: Используемая техника // Вестн. нов. мед. технол.- 1997. - Т.4,№4. - С. 100-103.

3. Русанов А.И., Прохоров В.А. Межфазная тензиометрия – СПб: Химия, 1994. – 400 с.

4. Makievski A.V., Miller R., Fainerman V.B. // Adsorption of proteins at the liquid/air and liquid/oil interfaces as studied by the pendent drop method / In: Food Emulsions and Foams: Interfaces, Interactions and Stability / Eds.: E.Dickinson, J.M.Rodriguez Patino.-Special Publication N227.-Royal Soc. Chem. – 1999. – P. 269-284.

5. Trukhin D.V., Kazakov V.N., Sinyachenko O.V. et al. // Dynamic surface tension and surface rheology of biological liquids // Coll. Surfac. Biointerf..- 2001. – Vol.21. – P. 231-238

УДК 636.3:612.128+636.3:612.6

Пименов Н.В., Адамсон Г.А.