Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
практика микра.doc
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.03.2025
Размер:
60 Кб
Скачать
☆

3.Определение чувствительности к химопрепаратам и антибиоткам методом бумажных дисков и серийных разведений.

На культуру бактерий накладывают бумажные диски, пропитанные разными антибиотиками и там б где появилось зона гемолиза более 1 см-чувствителен. Серийные разведения-часто после бум.дисков ,например ряд пазведений пенициллина и добавляют определенное количество бактерий, на сутки в термостат.

4.Иммунологические реакции при серологической диагностике инфекционных заболеваний: рск, рнга, ртга , инфекционный и поствакцинельный Видаль, реакция Вассермана.

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), те происходит связывание комплемента комплексом антиген - антитело. Если же комплекс антиген - антитело не образуется, то комплемент остается свободным. PCK проводят в две фазы 1-я фаза - инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент, 2-я фаза (индикаторная) - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген - антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит - антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

РСК- не протекает в организме. Использ. для обнаруж Ат. Опытная система-Аг Ат и С. Индикаторная система-гем сыв и эр барана. титр Аг-наиб кол Аг при котором гемолиз. Титр С –мин кол-во при котором полн гемолиз.Исполз для клещ энцеф .Если р-я при 0.2-это титр а 0.25-рабочая доза, т.е. 25% от титра. При наличии свобод С-гемолиз, а положит рез-т отстствие видимых измен . Интенсивность задержки гемолиза обозначают знаками ++++.Реакция специфична и чувств, использ для серодиагност.

РНГА(непрямой)-нагружают эритроциты, можно латекс или уголь и белок А стафилококка., ищут Ат. Нагруженные Аг эритроциты+исследуемая сыв=агглютинация.

РТГА (торможение) для обнаружения Ат в сыворотке вольного и типа вируса. Сыв разводят 1:5 +в каждую по 0,25 мл суспензии вируса, содержащей 4 гемагглютинирующие дозы вируса(1 ед-наибольшее разведение которое возвают полную агглютинацию эритроцтов.) +эритроциты. Если сыв нейтр. вирус то + р-я задержки.

Видаль- берут 4 ряда пробирок по 6 в каждом. По 1 мл сыв разведения 1:100 наливают в первую пробирку каждого ряда, 1:200 во ворую, 1:400, и т.д. в шестую-1 мл физиологич р-ра. Во все пробирки 1 ряда по 1-2 капле брюшнотфозного Н-диагностикума, 2 по брюшнотифозного О –дагностикума, 3-А-паратифозеой и В- паратифозый диагносткуумы. В термостат на 2 часа. Взбудитель-тот котрый агглютинирует, р-я положит если агглют-я хотя бы в 1:100.если агглют-я с несколькими то возбудитель тот где агглют-я с большим разведением.если агг-я с одинаковыми титрами, тонужна р-я адсорбции аглюининов по методу Кастеллани. Для дифферинциации прививочного и анамнестического прибегают к повторной постановке через 5-6 дней, если болен-то кол-во Ат увеличится, если нет останется прежним.

Вассерман –сифилис, сыв больного(Ат)+известный Аг(липоидные экстракты из ор-в животных)+комплемент + гемолит сыв+эр барана+физ раствор. Неспецичич Аг-вытяжки из органов, неспецифич Аг-из больного органа. Если нет гемолиза то,,+,, и чем больше плюсов тем боьше вероятность болезни.