20. Кариотип и идиограмма человека. Основные показания для исследования кариотипа у человека.

Кариотип - совокупность данных о числе, размерах и структуре метафазных хромосом. Каждый вид хромосом в кариотипе, содержащий определенный комплекс генов, представлен двумя гомологами, унаследованными от родителей с их половыми клетками.Двойной набор генов, заключенный в кариотипе,— генотип — это уникальное сочетание парных аллелей генома. В генотипе содержится программа развития конкретной особи. Характеристики: диплоидное (2п) число хромосом, размеры и форма хромосом, наличие перетяжек и спутников, соотношение длин плеч, чередование эу- и гетерохроматина.

Идиограмма - графическое изображение хромосом с учетом их абсолютной и относительной длины, цеитромерного индекса, наличия вторичной перетяжки и спутника.

21. Методы получения материала для исследования кариотипа человека

Кариотипический анализ - определение кариотипа и идиограммы. Исследуют кариотип человека в окрашенных микропрепаратах клеток на стадии метафазы.

Методики приготовления микропрепаратов для кариотипического анализа: объект - делящиеся клетки костного мозга, ткани семенника, хорион, фибробласты кожи, клетки амниотической жидкости. Наиболее удобным объектом является культура лимфоцитов периферической крови. Берут 1- 2 мл венозной крови и добавляют ее в смесь питательной среды с фитогемагглютинином (стимулятором митоза). Культивирование лимфоцитов составляет 48-72 часа. Для остановки процесса деления клеток на стадии метафазы используют колхицин, который добавляют в культуру клеток за 2-3 часа до окончания культивирования. Важное условие - гипотенизация клеток: клетки помещают в гипотонический раствор хлорида кальция или цитрата натрия, где они набухают, клетка разрывается, хромосомы разобщаются и свободно располагаются в цитоплазме.клеточную суспензию фиксируют смесью метанола и уксусной кислоты (3:1), наносят на предметное стекло, высушивают, окрашивают красителем. Анализируют препараты под иммерсионным увеличением, отыскивая такие метафазные пластинки, в которых хромосомы располагаются свободно в одной плоскости, и фотографируют их.

22. Рутинный и дифференциальный методы окрашивания метафазных хромосом для последующего кариотипирования, их разрешающая способность

Определить число, структуру и групповую принадлежность хромосом позволяет простой метод равномерной окраски хромосом -рутинный.

Индивидуализировать каждую хромосому можно только с помощью методов дифференциальной окраски. Все методы идентификации хромосом человека основаны на выявлении линейной неоднородности хромосом (бандирование хромосом): каждое плечо хромосомы разделено на районы, нумеруемые по порядку от центромеры к теломере; поперечным темным полосам, выявляемых с помощью красителя присвоены определенные номера, относительно них картируют гены.

Методы дифференциального окрашивания хромосом человека: Q-метод: Q-сегменты (флуоресцентные красители), G-метод: G-сегменты (Романовского-Гимза), R-метод: R-сегментьт, С- метод: С-сегменты, окраска по Фельгельну.

23.Характеристика крупных хромосом человека

Крупные хромосомы - это хромосомы А(1-3 пары) и В(4-5 пары) групп. Из них 2 пары - метацентрические (1А (имеет вторичную перетяжку qh), ЗА) и 3 пары - субметацентрические (2А, 4-5В)

24.Характеристика средних хромосом человека

Средние хромосомы - это хромосомы С и D групп, а также Х-хромосомы. Из них все хромосомы С группы(6-12 пары) и Х-хромосомы(23 пара) - субметацентрические (9-я пара имеет вторичную перетяжку qh), а все хромосомы группы D( 13-15 пары) - акрометацентрические и имеют вторичную перетяжку ph и спутник s.

25.Характеристика мелких хромосом человека

Мелкие хромосомы - это хромосомы Е, F, G групп и У-хромосомы.Из них все хромосомы группы Е(16-18 пары) - субметацетрические (16 пара имеет вторичную перетяжку qh), группы F( 19-20 пары) - метацентрические, группы G(21-22 пары) и У-хромосомы(23 пара, имеет вторичную перетяжку qh) - акроцентрические(имеют вторичную перетяжку ph и спутник s).

26. Характеристика X и У хромосом человека

Х-хромосома — одна из самых больших во всём наборе 23-х хромосом человека, Y — самая маленькая. Х-хромосома - средняя субметацентрическая , У-хромосома - мелкая акроцентрическая, имеет вторичнуб перетяжку qh.

Феномен инактивации хромосомы X в клетках женского организма на самом деле является тонким фактором регуляции соотношения доз определенных генов, требуемого для воспроизведения нормального фенотипа