Добавил:

Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.

Вуз:

Тюменский государственный медицинский университет

Предмет:

[НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Файл:

методичка фф.doc

Скачиваний:

Добавлен:

19.11.2019

Размер:

441.34 Кб

Скачать

☆

1 / 21 2 > Следующая >>>

План ответа на вопросы по частной микробиологии

1. Таксономия возбудителя:

- для бактерий – отдел Gracilicutes, Firmicutes, Tenericutes);

- для эукариотов – классы, виды;

- для вирусов – к ДНК или РНК-геномные вирусы, семейство, род.

2. Характеристика возбудителя:

- морфологические и тинкториальные свойства;

- культуральные свойства;

- биохимические свойства;

- антигенные свойства;

- факторы патогенности;

- резистентность к различным факторам;

- биологические модели.

3. Характеристика вызываемых заболеваний:

- краткие эпидемиологические сведения (источник заболевания, механизм

заражения, пути передачи, восприимчивый коллектив);

- патогенез;

- основные клинические проявления;

- особенности иммунитета.

4. Микробиологическая диагностика:

- материал для исследования;

- применяемы методы диагностики.

5. Специфическая профилактика и этиотропное лечение (вакцины, сыворотки; фаги, химиотерапевтические средства).

Тема: Вирусные инфекции

Занятие №6.

Вирусы - возбудители респираторных и кишечных инфекций. Принципы диагностики вирусных инфекций. Препараты для лечения и профилактики.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

Выработать чёткое представление о лабораторной диагностике вирусных инфекций.
Изучить биологические свойства возбудителей острых респираторных и кишечных вирусных инфекций (ОРВИ и ОКИ).
Научиться подбирать препараты для идентификации, лечения и профилактики респираторных и кишечных вирусных инфекций.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

Основные семейства РНК- и ДНК-содержащих вирусов, вызывающих респираторные и кишечные вирусные инфекции (ОРВИ и ОКИ).
Классификацию, антигенную структуру и биологические свойства вирусов семейства Оrthomyxoviridaeа и Enteroviridaea.
Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм передачи инфекции при ОРВИ и ОКИ.
Принципы лабораторной диагностики вирусных инфекций
Профилактические, лечебные и диагностические препараты, которые применяются при вирусных инфекциях.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

интерпретировать результаты лабораторной диагностики гриппа, аденовирусных и энтеровирусных инфекций;
классифицировать препараты, применяемые при гриппе, аденовирусных и энтеровирусных инфекциях в соответствии с их назначение.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:

о правилах забора материала для вирусологических исследований;
о новых вакцинных препаратах, используемых для профилактики вирусных инфекций.

Самостоятельная работа

Работа № 1. Строение вирусов гриппа, аденовируса и полиомиелита

Цель: Изучить морфологию вируса гриппа и аденовируса. Зарисовать. Сделать вывод

Прямоугольник 355

вирус гриппа аденовирус вирус полиомиелита

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________

Работа № 2. Принципиальная лабораторная диагностика вирусных инфекций

Цель: Составить алгоритм диагностики вирусных инфекций (направления и этапы диагностики).

См. методические указания

И сследуемый материал:

____________________

Прямая со стрелкой 352 Прямая со стрелкой 353 ____________________

____________________

Стрелка вниз 351

Работа № 3. Иммунные реакции, применяемые для диагностики вирусных инфекций

Цель: Изучить иммунные реакции, применяемые для диагностики респираторных и кишечных вирусных инфекций.

А) Цель: Определить наличие вируса гриппа в аллантоисной жидкости куриного эмбриона с помощью постановки реакции гемагглютинации (РГА) на стекле. Сделать вывод.

Запомнить! РГА- не серологическая, а индикаторная реакция

Направление:__________________________________________________________________

Ингредиенты:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Механизм:

Постановка:

Прямоугольник 350

Результат:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Б) Цель: Определить тип вируса гриппа в аллантоисной жидкости куриного эмбриона с помощью постановки РСК. Учесть результат готовой реакции. Сделать вывод

Направление:__________________________________________________________________

Ингредиенты:_________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Механизм:

Постановка:

Тип вируса гриппа

Контроли

КА

КС

КГС

Результат постановки РСК

Цилиндр 349

В) Цель: Определить подтип вируса гриппа в аллантоисной жидкости куриного эмбриона с помощью постановки РТГА. Учесть результат готовой реакции. Сделать вывод.

Направление:__________________________________________________________________

Ингредиенты:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Механизм:

Подтипы вируса	А,	А₂	Аз	Контроли к
гриппа А				опыту
гриппа А				КА	КС
Результат постановки РТГА

Результат:_____________________________________________________________________

Г) Цель: Определить тип вируса полиомиелита в реакции нейтрализации по результату постановки цветной пробы, используя антитела к поверхностным антигенам вирусов полиомиелита 3-х типов (VP-1, УР-2и VP-3). Учесть результат реакции. Сделать вывод.

Направление:__________________________________________________________________

Механизм:

Диагностические сыворотки, содержащие антитела к поверхностным антигенам вируса полиомиелита

Контроль специфической сы-

воротки

Контроль культуры клеток

Контроль вируса

VP-1 (тип1)

VP-2 (тип2)

VP-3 (тип З)

Результат

постановки

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 4. Антимикробные препараты.

Цель: Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные)

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Название
Классификационное положение
Действующее начало
Принцип получения
Применение
Методика применения

Задания для самоконтроля:

ОРВИ

Таксономия возбудителя:

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Морфологические свойства______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Резистентность________________________________________________________________________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции___________________________________________________________________

Механизм передачи___________________________________________________________________

Пути передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенность для животных__________________________________________________________________

Патогенез и клиника

Входные ворота_____________________________________________________________________

Места первичной локализации_________________________________________________________________Инкубационный период_____________________________________________________________________

Клинические симптомы______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вид инфекции (генерализованная, локальная)_________________________________________________________________

Длительность болезни____________________________________________________________________

Иммунитет_________________________________________________________________

Лабораторная диагностика______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия)_________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты)___________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лечение (препараты)_______________________________________________________

Подпись преподавателя__________________________________________________________

Методические указания

Основные семейства рнк— и днк— содержащих вирусов, вызывающих острые респираторные вирусные инфекции (орви)

Семейства РНК-содержащих вирусов

Ортомиксовирусы (вирусы гриппа А, В и С).

Парамиксовирусы (парагриппозные вирусы, вирус эпидемического паротита, вирус ньюкастлской болезни, вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус).

Пикорнавирусы более 110 серотипов риновирусов, а также некоторые
серотипы вирусов Коксаки А и В и ЕСНО).
Реовирусы (3-й серотип).
Коронавирусы.

Семейство ДНК-содержащих вирусов

• Аденовирусы (41 серотип, из них 8 являются возбудителями ОРЗ).

• Риновирусы и коронавирусы.

• Энтеровирусы Коксаки и ЕСНО — вызывают ринит и фарингит.

• Реовирусы вызывают лёгкие респираторные заболевания верхних дыхательных путей.

Вирусная инфекция характеризуется накоплением вирусных частиц в клетках организма человека и выходом сформировавшихся вирионов из клеток. Лабораторная диагностика проводится в трёх направлениях:

1. Выявление внутриклеточных включений, вызванных репродукцией вируса.

Внутриклеточные включения формируются в заражённых вирусом клетках — это места синтеза и сборки вирусных структур. Они являются продуктами взаимосодействия вируса и клетки. Внутриклеточные включения могут быть в цитоплазме и в ядрах зараженных вирусом клетках. По форме включения могут быть округлыми, кристаллоподобными, в виде тяжей и т.п. Для идентификации внутриклеточных включений (принадлежности к тому или другому вирусу) часто используют различные серологические реакции (РИФ, ИФА, РИА, ПЦР, метод молекулярной гибридизации, метод иммуноэлектронной микроскопии и др.).

2. Вирусологическая диагностика, включающая накопление вируса в живых системах (куриный эмбрион, лабораторное животное и различные культуры клеток), индикацию накопленного вируса в живых системах и идентификацию выделенного вируса с помощью серологический реакций, позволяющих установить антигенную структуру выделенного вируса.

Вирусы обладают тропизмом к определённой ткани организма и поэтому в одних клетках репродукция вируса сопровождается гибелью клетки (очаговую мелкозернистую деструкцию вызывают вирусы гриппа, клещевого энцефалита, а гроздевидную дегенерацию - аденовирусы) — цитопатическим действием (ЦПД), а в других клетках вирус репродуцируется, а гибели клеток не наблюдается. Поэтому, в первом случае, индикация вируса проводится по ЦПД, бляшкообразующей активности (способность вируса разрушать клетки под слоем агара или на поверхности хорионаллантоисной оболочки куриного эмбриона) или гибели лабораторного животного. Во втором случае, наличие вируса определяют по выявлению поверхностного гемагглютинирующего антигена вируса. Для этого исследуют аллантоисную жидкость куриного эмбриона, культуральную жидкость (питательная среда для роста клеток, в которые был внесён для накопления вирус) и т.п. Гемагглютинирующий антиген вируса определяют с помощью постановки реакции гемагглютинации (РГА). Если вирус не разрушает клетки, но репродукция его происходит, то репродукцию вируса определяют по феномену гемадсорбции — клетки, продуцирующие вирус клетки адсорбируют на своей поверхности эритроциты крови различных лабораторных животных. Идентификацию выделенного вируса проводят на основании выявления антигенной структуры выделенного вируса. Для этого используют антитела к различным антигенам вируса и ставят серологические реакции: РСК, РТГА, РН (реакция нейтрализации), РП, РПНА (реакция подавления нейраминидазной активности вируса), ИФА, РИА и др.

3. Серодиагностика — постановка диагноза заболевания на основании иммунобиологической перестройки в организме. Для этого используются различные серологические реакции, позволяющие выявить в крови больных людей или реконвалесцентов циркуляцию различных классов иммуноглобулинов к определённым антигенам вирусной частицы.

При проведении серодиагностики определяют суммарные иммуноглобулины. В этом случае кровь больного (реконвалесцента) исследуют в динамике с интервалом 10-14 дней. Для постановки диагноза заболевания необходимо, чтобы концентрация антител в крови возросла не менее, чем в 4 раза. Кроме этого в крови определяют различные классы иммуноглобулинов к антигенам вирусных частиц. В этом случае используют обычно однократное исследование сыворотки крови больного.

Серодиагностика при гриппе имеет ретроспективное значение и предназначена для подтверждения результатов вирусологических исследований с целью решения вопроса о выборе вакцинного препарата для иммунизации угрожаемых контингентов населения. Определяют подтип вируса гриппа, вызвавшего эпидемию или пандемию.

Достоверное нарастание титров антител к вирусам гриппа отмечается на 2-3 неделе после перенесённого заболевания. В РСК парные сыворотки исследуют одновременно с вирусами трех типов. РСК более чувствительна, чем РТГА, и позволяет диагностировать грипп в очагах до 90% случаев.

РТГА применяется для определения подтипа штамма вируса гриппа, тип которого был определен в РСК. РН применяют в основном для установления штаммовой принадлежности вируса гриппа.

В последнее время для серодиагностики гриппа и др. вирусных инфекций применяют метод непрямой иммунофлюоресценции, позволяющий выявить и титровать специфические противовирусные антитела в сыворотках людей и ставить диагноз в 75% случаев.

РПНА (реакция подавления нейраминидазной активности) используется для идентификации новых штаммов вирусов гриппа. Для изучения антигенной структуры вирусов гриппа используют реакцию иммуноадсорбции, метод радиоиммунного анализа и иммуноэнзимный метод.

Для диагностики парагриппозной инфекции ставят РТГА с 4 антигенами (типовыми) парагриппозных вирусов. В реакции используют эритроциты морских свинок.

Серодиагностика аденовирусных заболеваний проводится на основании нарастания титра антител в парных сыворотках больных и реконвалесцентов. Применяется реакция нейтрализации вируса в культуре клеток, РСК, РТГА. Комплементсвязывающие антитела появляются с 10-15 дня болезни, носят группоспецифический характер и сохраняются несколько лет. Эту реакцию сложно использовать для выявления свежих случаев заболевания, т.к. многие люди имеют постоянно высокие титры антител к аденовирусам. Это связано с тем, что все аденовирусы имеют единый комплементсвязывающий антиген. РН и РТГА ставят с эталонными типами аденовирусов. Четырехкратное нарастание типоспецифических антител свидетельствует об установлении типа аденовируса.

Схема лабораторной диагностики аденовирусных инфекций

Исследуемый материал:

Отделяемое носоглотки, конъюнктивы глаз, кровь, испражнения, сыворотка крови

Прямая со стрелкой 297