- •Морфология и ультраструктура бактерий. Шаровидные и палочковидные формы бактерий. Простые методы окраски препаратов.
- •1.Теоретический разбор материала (30 мин).
- •11. Практическая работа студентов (40 мин).
- •Правила поведения в учебной лаборатории:
- •Во время работы в лаборатории категорически запрещается:
- •111.Оформление и проверка протоколов (10 мин).
- •Споры и спорообразование. Метаболизм бактерий. Обмен веществ у микроорганизмов.
- •1.Теоретический разбор материала (30 мин).
- •11.Практическая работа студентов (40 мин).
- •111.Оформление и проверка протоколов (10 мин).
111.Оформление и проверка протоколов (10 мин).
Литература:
1.К.Д.Пяткин, Ю.С. Кривошеин. Микробиология, 1992.
2.Л. Б. Борисов и соавт. Медицинская микробиология, 1994.
Приложение к лабораторной работе №1
Задание 2. Приготовить фиксированный мазок-препарат из культуры микроорганизмов, окрасить препарат простым методом окраски и промикроскопировать.
Мазки из культуры микроорганизмов приготавливают для изучения их морфологии и тинкториальных свойств (способность микроорганизмов воспринимать красители). Во время работы с живыми культурами тщательно соблюдайте правила техники безопасности.
Алгоритм приготовления мазка:
- подготовьте предметное стекло (обезжирить), нанесите контуры будущего мазка (перевернуть стекло, нанести снизу)
- в левом верхнем углу стекла поставить свой номер
- зафламбируйте стекло в пламени горелки (стекло удерживать І и ІІ пальцами руки за ребра стекла)
- положите стекло в чашку Петри
- зафламбируйте бактериологическую петлю, возьмите микробиологическую культуру
- нанесите каплю культуры на предметное стекло, разотрите равномерно тонким слоем до 1,5 см (для получения изолированных бактериальных клеток)
- зафламбируйте бактериологическую петлю
- оставьтемазок для высыхания.
Фиксация мазка.
Мазки фиксируют для: закрепления материала на стеклк, обеззараживания, улучшения качества окраски (убитые микроорганизмы лучше поглащают краситель).
Физический способ. Фиксацию проводят в пламени горелки в течении 6-8 сек. Для этого стекло берут пинцетом или пальцами правой руки и проводят несколько раз медленно над верхней частью пламени горелки мазком кверху. Прпавильность фиксации проверяют дотрагиваясь нижней поверхностью стекла к тыльной стороне левой руки. Мазок должен быть гарячим, но не обпекать руку. Этим методом фиксирую мазки, приготовленные из культуры микроорганизмов при условии, если во времени нагревания не изменяется структура микробной клетки (капсульные формы бактерий, спирохеты).
Окрашивание препарата простым методом.
Во время простого метода окраски используют один краситель – чаще всего это фуксин Пфейфера или метиленовый синий. Этот метод называется еще ориентировочным, так как его используют только для обнаружения микробных клеток, определения их численности, формы, взаимного расположения
Алгоритм «Окрашивание препарата простым методом»:
- расположите препарат на подставку в посуде для окрашивания
- нанесите краситель так, чтобы он покрыл весь препарат
- проконтролируйте время действия красителя (фуксин Пфейфера – 1-2 мин, метиленовый синий – 3-5 мин)
- промойте препарат водой
- высушите препарат фильтровальной бумагой.
Подготовьте микроскоп, рассмотрите препарат, определите форму, размещение бактериальных клеток
Приложение к лабораторной работе №1
Задание 3. Зарисовать и подписать основные шаровидные формы бактерий (микрококки, диплококки, тетракокки, сарцины, стрептококки, стафилококки).
|
Монококки (от лат. mono – один), или микрококки – это одиночные кокки, делящиеся в одной плоскости с последующим отделением образовавшихся клеток друг от друга |
|
Диплококки (от лат. diplos – двойной) – парные кокки, делящиеся в одной плоскости без последующего отделения дочерних клеток друг от друга. Соприкасающиеся стороны клеток диплококков могут быть сферическими, уплощенными, вогнутыми, а сами клетки – шаровидными, бобовидными, либо ланцетовидными напоминающими пламя свечи. |
|
Тетракокки (от греч. tetra – четыре) – это кокки, делящиеся попеременно в 2 взаимно перпендикулярных плоскостях с образованием тетрад. |
|
Сарцины (от лат. sarcina – связка, тюк) – это кокки, делящиеся в 3 взаимно перпендикулярных плоскостях, и образующие кубические пакеты из 8, 16, 32 или более клеток. Клетки сферические или почти сферические, диаметром 1,8-3,0 мкм, обычно уплощены в местах контакта с соседними клетками. Некоторые бактериальные тела располагаются одиночно или в парах и тетрадах. |
|
Стрептококки (от греч. streptos – цепочка) – это кокки, делящиеся в одной плоскости и в одном направлении без последующего отделения дочерних особей, образующих цепочки клеток различной длины. Клетки стрептококков – сферические или овальные, диаметром 0,5-2,0 мкм, иногда удлинённые вдоль оси цепочки (ланцетовидной формы). Количество клеток в цепочке – от 2 до нескольких десятков. |
|
Стафилококки (от греч. staphyle – гроздь винограда) – кокки диаметром 0,5-1,5 мкм, делящиеся в различных плоскостях с образованием неупорядоченных скоплений клеток, напоминающих виноградную гроздь. В препаратах-мазках встречаются одиночные, парные клетки и группы неправильной формы. |
Приложение к лабораторной работе №1
Задание 4. Зарисовать и подписать основные палочковидные формы бактерий.
|
Бактерии – это палочки, не образующие спор, имеют цилиндрическую форму, превышающую более чем в 1,5 раза диаметр бактериальной клетки и имеющие изгиб по продольной оси менее 1/4 завитка спирали. |
|
Клостридии (от лат. closter – веретено) - палочковидные бактерии, образующие споры, диаметр которых превышает диаметр палочки. Споры могут располагаться терминально, субтерминально, либо центрально.
|
|
Бациллы (от лат. bacillus – палочка) – это цилиндрические бактерии, образующие споры, диаметр которых не превышает диаметр бактериальной клетки |
Лабораторная работа №2
Тема: Извитые формы бактерий. Жгутики бактерий. Размножение и рост бактерий.