2. Глицин

Как нейромедиатор впервые идентифицирован в спинном мозге. Он играет ключевую роль в рефлексах спинного мозга, вызы­вая реципрокное торможение мотонейронов через вставочные интернейроны (клетки Реншоу).

Глициновые рецепторы относятся к ионотропным и сопряжены с ионными каналами для хлора. Расположены они на постсинаптичес­кой мембране. Аналогично ГАМК глицин увеличивает проницае­мость мембраны для ионов хлора, вызывая ее гиперполяризацию, что сопровождается тормозным эффектом. Глициновые рецепторы бло­кируются стрихнином, чем объясняется механизм его судорожной активности. Высвобождение глицина из нервных окончаний блоки­руется столбнячным токсином.

Глициновые рецепторы обнаружены и в высших отделах голов­ного мозга, включая гиппокамп, мозжечок, кору головного мозга. Взаимодействуя с NMDA-рецепторами, они совместно с глутаматом способствуют их активации.

В противоположность ГАМК_А-рецепторам на глициновые рецеп­торы не оказывают влияния бензодиазепины и барбитураты. Однако их активация модулируется некоторыми общими анестетиками, включая диэтиловый эфир для наркоза, фторотан, хлоралгидрат, трихлорэтилен т.д.

3. L-глутаминовая кислота (глутамат)

L-глутаминовая кислота (глутамат) – главный возбуждающий нейромедиатор в мозге млекопитающих, а также предшественник дру­гих аминокислот, в частности ГАМК. Обнаруживается во всех отде­лах ЦНС. Глутамат обеспечивает передачу возбудительных сигна­лов по длинноаксонным волокнам. В ЦНС находится около миллиона длинноаксонных нейронов, и в большинстве из них пере­дача нервных импульсов происходит посредством глутаминовой кис­лоты. Так, афферентные сенсорные волокна, передающие зритель­ные, слуховые, тактильные, болевые сигналы, содержат в качестве медиатора глутамат. Это же относится и к большинству ассоциатив­ных волокон, связывающих различные структуры мозга. Глутамат вовлечен в процессы восприятия и обработки стимулов, благодаря тому, что он обеспечивает быструю синаптическую передачу (в миллисекундном интервале времени).

Высвобождение глутамата из пресинаптического окончания происходит путем Са-зависимого экзоцитоза, а удаление из синаптической щели путем обратного захвата пресинаптическим окончанием.

Рецепторы к глутамату подразделяются на следующие функциональные группы (рис. 4):

• ионотропные – лиганд-управляемые:

• NMDA-рецепторы широко распространены в ЦНС, располагаются пресинаптически и постсинаптически. Высокая их плотность обнаружена в кортикальных структурах, базальных ганглиях, сенсорно-ассоциа­тивных системах, в гиппокампе. NMDA-рецепторы образуют неспе­цифические ионные каналы, обеспечивающие прохождение ионов К⁺, Na⁺ и Са²⁺. В отличие от He-NMDA-рецепторов, вызывающих быструю деполяризацию, активация NMDA-рецепторов приводит к пролонгированной деполяризации мембраны. NMDA-рецепторов являются потен­циал-зависимыми кальциевыми каналами, канал которых в состоянии покоя блокируются ионами Mg²⁺ (рис. 5). Для их разблокирования необходи­ма деполяризация мембраны, а также глицин в качестве сомедиатора глутамата. В отсутствие глицина рецептор не активируется глутаматом. Это представляет определенный интерес с фармакологической точки зрения, так как антагонисты глициновых рецепторов могут быть использованы в качестве ингибиторов медиации глутамата. Еще одна важная особенность NMDA-рецепторов с точки зре­ния регуляции – их чувствительность к концентрации водородных ионов: частота открывания ионных каналов снижается по мере воз­растания концентрации ионов водорода, таким образом, при рН 6,0 активация рецептора оказывается почти полностью подавленной.

• не-NMDA-рецепторы распространены по всему мозгу. Они под­разделяются на подтипы:

• АМРА-рецепторы (активируются анало­гом глутамата) при возбуждении которых открываются каналы для ионов Na⁺ и Са²⁺, что способствует быст­рой деполяризации мембран.

• каинат-рецепторы (активируются каиновой кис­лотой), локализованы преимущественно на терминалях нейронов, высвобождающих глу­тамат, и при их возбуждении увеличивается его выход в синаптичес­кую щель

При активации пресинаптических не-NMDA-рецепторов ионы Са²⁺ входят в пресинапс, увеличивается их концентрация в терминали, что обеспечивает высвобождение медиатора в синаптическую щель.

• метаботропные – mGluR, осуществляющий свой биологический эффект через вторичные мессенджеры IP₃ (инозитолтрифосфат) и DAG (диацилглицерол). Метаботропные рецепторы играют роль в механиз­мах памяти, боли, тревоги, в нейродегенеративных процессах.

Одновременная стимуляция метаботропного mGluR и ионотропного АМРА рецептора делает возможным развития такого процесса как долговременная депрессия синаптической передачи (Long-Term depression – LTD). Механизм формирования LTD следующий (рис. 6):

• выделение пресинаптическим полюсом глутамата приводит к одновременной активации АМРА и mGluR рецепторов на постсинаптической мембране;

• рецептор mGluR активирует фосфолипазу С, которая в свою очередь расщипляет PIP₂ (фосфатидилинозитол-3-4,5-дифосфат) на DAG и IP₃;

• IP₃ вызывает высвобождение Са²⁺ из ЭПР, кроме того, Са²⁺ поступает через электровозбудимые каналы мембраны клетки, что приводит к дополнительному усиления выброса кальция из ЭПР;

• п овышение уровня Са²⁺ и появление DAG совместно активируют протеинкиназу С (ПКС), которая меняет свойства АМРА рецепторов, что приводит к возникновению долговременной депрессии синаптической передачи (DTP).

Одновременная стимуляция ионотропных NMDA и АМРА рецепторов делает возможным развитие другого процесса, характеризующего степень активности синапса – долговременной синаптической потенциации (Long-Term potentiation – LTP). Механизм формирования LTP следующий (рис. 7):

• выделение пресинаптическим полюсом глутамата приводит к одновременной активации ионотропных АМРА и NMDA рецепторов на постсинаптической мембране;

• через катионный канал АМРА в постсинапстическую область входят ионы Na+. деполяризующие синаптическую мембрану;

• в результате деполяризации постсинаптической мембраны открывается потенциалзависимый NMDA рецептор (пора рецептора освобождается от иона Mg²⁺, блокировавшего его в состоянии покоя) и через него в постсинаптический полюс входят Na⁺ и Са²⁺;

• вход Са²⁺ в клетку активирует протеинкиназу С;

• параллельно Са²⁺ связывается в комплекс с кальмодулином и активирует Са²⁺/кальмодулин-киназу II;

• в результате фосфорилируются синаптические белки и в мембрану встраиваются дополнительные АМРА рецепторы, что способствует проявлению долговременной синаптической потенциации (Long-Term potentiation – LTP).

Кроме того, при одновременной стимуляции ионотропных NMDA и АМРА рецепторов возможно развитие долговременной синаптической депрессии (Long-Term depression – LTD). В данном случае будет наблюдаться процесс, противоположный описанному выше. Т.е. результатов некоторых реакций в глутаматергическом синапсе будет не встраивание новых АМРА рецепторов, а их интернализация (поглощение в клетку). Данные процесс реализуется следующим образом (рис. 8):

• выделение пресинаптическим полюсом глутамата приводит к одновременной активации ионотропных АМРА и NMDA рецепторов на постсинаптической мембране;

• низкоамплитудный подъем концентрации Са2+ приводит к активации протеинфосфотазы, находящейся в постсинаптической зоне;

• в результате происходит дефосфорилирование синаптических белков, благодаря чему проявляется интернализация АМРА рецепторов из постсинаптической мембраны;

• тем самым, уменьшается возможность связывания глутамата с освободившимися АМРА рецепторами. Благодаря этому возникает долговременная депрессия синаптической передачи (DTP).

Нарушение глутаматергической медиации лежит в основе ряда патологических состояний нервной системы, в частности эпилепсии. Имеются экспериментальные доказательства, что процессы иници­ации и сохранения эпилептических приступов связаны с высвобож­дением глутамата при ослаблении ГАМК-ергической передачи. Beщества, блокирующие NMDA-рецепторы, используются в экспериментах в качестве антиконвульсантов.

Глутамат обнаружен в большинстве сенсорных волокон, переда­ющих болевые стимулы. В качестве сомедиатора глутамата в этих волокнах представлен нейропептид – вещество Р. Он вызывает до­полнительную деполяризацию мембраны, что способствует разбло­кированию потенциал-зависимых Са²⁺-каналов и поэтому вносит существенный вклад в передачу болевых стимулов.

АМРА-рецепторы активируются в ответ на интенсивные и короткие стимулы и обеспечивают быструю передачу болевых сигналов, NMDA-рецепторы – на последовательно повторяющиеся импульсы. Активация этого типа рецепторов в задних рогах спинного мозга приводит к расширению и пролонгированию нейрональных ответов при постоянстве стимула, что в итоге приводит к усилению болевых ощущений при длительных болях. NMDA-рецепторы вовлекаются в передачу болевых сигналов при таких патологических состояниях, как воспаление, ишемические, не­вропатологические, хирургические боли. Блокатор этих рецепто­ров – кетамин – используется в клинике для анестезии.

Глутаматные NMDA-рецепторы участвуют в процессах памяти. Экспериментально показано, что ключевую роль в механизме памя­ти играет длительная потенциация (LTP) пирамидных нейронов поля CA₁ гиппокампа. Длительная потенциация – это устойчивое усиление эффективности синапсов в нейронах гиппокампа в ответ на высокочастотную стимуляцию. В возникновении LTP существен­ную роль играют высвобождение глутамата и активация постсинаптических NMDА-рецепторов на апикальных дендритах пирамидных нейронов. В результате активируются потенциал-зависимые Са²⁺-каналы и происходит длительная деполяризация мембраны. Важную переключающую функцию в формировании длительной потенциации пирамидных нейронов гиппокампа выполняют ГАМК-ергические механизмы, обеспечивая синхронизацию глутаматергических входов. Помимо гиппокампа LTP обнаружена в коре, миндалине и спинном мозге.

Глутамат играет важную роль в развитии мозга и пластичности его связей. Эксперименты показали, что повышенное содержание глутамата в мозге молодых животных стимулировало рост дендритов пирамидных клеток гиппокампа, способствовало развитию ней­ронов мозжечка. Плотность NMDА-рецепторов в хвостатом ядре и гиппокампе молодых крыс была существенно выше, чем у взрослых особей. В незрелом гиппокампе возбуждающие постсинаптические потенциалы (ВПСП), образующиеся при активации NMDA-рецепторов, существенно оказались выше по амплитуде и менее чувстви­тельны к ионам Mg²⁺. Результаты этих экспериментов позволяют предположить, что глутамат регулирует рост и дифференциацию ней­ронов развивающегося мозга.

В то же время высокое содержание возбуждающих аминокислот (глутамата и аспартата) токсично для нервной ткани. Высвобождение большого количества этих нейромедиаторов в синаптическую щель приводит к гиперактивации глутаматных рецепторов, в результате ко­торой увеличивается концентрация Са²⁺ в клетках, повышается осмо­тическое давление, что ведет к набуханию и гибели нейронов. Кроме того, рост содержания Са²⁺ в клетках сопровождается активацией киназ и фосфолипаз, в результате увеличивается протеолитическая и липолитическая активность. Эти процессы, получившие название ре­акции «эксайтотоксичности» (exitotoxicity), - начальная ступень в гибели нейрональных и глиальных клеток при острых сосудистых на­рушениях мозга и, возможно, при нейродегенеративных заболеваниях (болезнь Альцгеймера, паркинсонизм, хорея Гентингтона).