1. Дослідження на рівні цілого організму. Межі застосування. Переваги та недоліки.

Дослідження такого типу проводяться з метою вивчення метаболізму різних лікарських препаратів або сполук, які претендують на лікарські препарати, а також досліджуються пошкодження того чи іншого організму без порушення його цілісності – застосовуються ізоферменти. Зазвичай проводиться на тваринах, але можливі й ін. варіанти.

Переваги:

• Не порушується взаємодія між органами і клітинами

• Живлення, нервова та гормональна регуляції залишаються без змін

Недоліки:

• існує проблема перенесення отриманих результатів із тваринного організму на людський (для цього застосовують дослідження на різних тваринах);

• особливості утримання піддослідних тварин;

• необхідно враховувати велику низку факторів

Враховуємо:

• яким чином була введена речовина (внутрішньовенно, внутрішньклітинно, внутрішньм»язово……)

• яким способом введена речовина зв»язується із транспортними альбумінами і як транспортується організмом

• як взаємод із кл мембраною

• як кровопостачається орган на який діємо

• здатність речовини накопичуватись в організмі та як швидко вона виводиться

• стать, вік досліджуваного організму, церкадні ритми, умови утримання тварин

• використовуються однакові групи тварин (лінійні) + контрольна група

2. Дослідження на ізольованих органах та тканинах. Межі застосування. Переваги та недоліки.

Переваги: зберігається природнє тканинне оточення клітин.

Недоліки: відсутність гормональної та нервової регуляції.

Найчастіше для такого дослідження використовують метод перфузії. Для цього орган (печінка, нирки, серце) видаляють із організму тварини та поміщають в спеціальний термостатуючий прилад. Потім до пер фузійної рідини, що пропускається через орган, додають препарат та вводять через артерію до органа, а потім досліджують перфузійну рідину із вени, що виходить із органу. Перфузійну рідину можна пропускати через орган 1 раз або декілька, самотоком або за допомогою насоса (коли пропускають декілька раз). Перфузію можна проводити не тільки на повністю ізольованому органі, а й на органі вскритої живої тварини під анестезією. При цьому нервова та гормон.регуляція залишаються нормальними.

Також, використовуючи ізольовані органи можна робити зрізи тканин для метаболічних досліджень. Товщина зрізів повинна бути 0,5-5 мм – це необхідно для забезпечення вільного доступу кисню, крім того така товщина забезпечує мінімум пошкодження оточуючих клітин. Для кращого виготовлення зрізів використовують мікротом.

3.Культури тканин та клітин. Межі застосування. Переваги та недоліки.

Цей метод має широке застосування завдяки ряду переваг:

• Можна виростити велику кількість однотипних клітин з мінімум затрат

• Можна спостерігати ріст, поділ та диференціацію клітин

• Значно полегшується доставка досліджуваних речовин до клітин (тканин)

• Культивують клітини тварин (епітеліальні, кл печінки, стовбурові кл), рослин (кл кореня, меристеми…… ) + мікроорганізми

Суть методу полягає у тому, що виділені клітини культивують на поживних середовищах. Проте необхідно дотримуватися суворих умов стерильності щоб запобігти контамінації досліджуваних кл іншими кл або бактеріями,вірусами. Оцінку росту кл здійснюють за рахунок обрахування кількості кл (в камері Горяєва із барвником) та збільшення об»му кл. недолік: проблема перенесення отриманих результатів із кл на організмовий рівень.