- •Учреждение образования «Гомельский Государственный медицинский университет» Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Основные морфологические группы бактерий
- •Этапы выделения чистых культур аэробных бактерий
- •Идентификация выделенных чистых культур:
- •Культивирование анаэробных бактерий
- •Этапы выделения чистых культур анаэробных бактерий
- •Идентификация выделенных чистых культур:
- •Способы изучения биохимических свойств бактерий:
- •Бактериофаги
- •Практическое использование бактериофагов:
- •Мпа без фенола мпа с фенолом
- •Выявление генетических маркеров в реакции гибридизации нуклеиновых кислот
- •Полимеразная цепная реакция (пцр)
- •Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Диско-диффузионный метод (метод стандартных дисков)
- •Метод е-тестов
- •Метод серийных разведений в бульонной среде
- •Учет посева микрофлоры:
- •Микроскопия препаратов
- •1. Плазмокоагулаза
- •2. Фибринолизин
- •3. Гиалуронидаза
- •4. Лецитовителлаза (лецитиназа)
- •Бактериальные токсины
- •Периоды развития инфекционного заболевания
- •Формы инфекции
- •1. Оценка бактерицидной активности кожи по Клемпарской
- •2. Определение активности комплемента (с) в реакции иммунного гемолиза
- •3. Определение активности лизоцима
- •4. Оценка фагоцитоза.
- •Характеристика иммуноглобулинов
- •2. Проба Кумбса (антиглобулиновый тест)
- •Основные серологические реакции
- •Варианты постановки прямой реакции агглютинации:
- •Варианты постановки непрямой реакции агглютинации:
- •Разновидности реакций преципитации:
- •1. Реакция иммунного бактериолиза (риб) _______________________________________________________
- •2. Реакция иммунного гемолиза ________________________________________________________________
- •3. Реакция связывания комплемента (рск) Ингредиенты рск:
- •Принципиальная схема твердофазного иммуноферментного анализа
- •Принципиальная схема иммуноблотинга
- •Принципы диагностики аллергических заболеваний
- •Постановка прик-тестов с помощью одноразового аппликатора
- •Приложение к постановлению Министерства здравоохранения Республики Беларусь 29.09.2006 №76 «о проведении профилактических прививок»
- •Перечень профилактических прививок, сроков их проведения, а также групп населения, подлежащих профилактическим прививкам
- •Методы оценки т-системы:
- •1. Оценка способности к пролиферации в реакции бластной трансформации лимфоцитов
- •2. Определение количества т-супрессоров, т-хелперов и т-киллеров в реакции иммунофлюоресценции (риф)
- •Иммунологический статус Тесты первого уровня (ориентировочные):
- •Тесты второго уровня (аналитические):
Методы оценки т-системы:
►Количественная оценка
Определение количества Т-лимфоцитов (CD3+) методом иммунных розеток в готовых препаратах
Принцип метода: На 1 этапе методом центрифугирования в градиенте плотности из крови выделяют лимфоциты. На 2 этапе с помощью реакции розеткообразования с эритроцитами барана определяют процент Т-лимфоцитов от общего числа лимфоцитов. Реакция розеткообразования основана на наличии на поверхности Т-лимфоцитов рецепторов, способных фиксировать эритроциты барана. При добавлении к суспензии лимфоцитов эритроцитов барана, последние адсорбируются Т-лимфоцитами, а образующиеся при этом структуры называются розетками. Общее количество лимфоцитов подсчитывают под микроскопом по количеству розеток.
|
Препарат _____________________ Окраска ______________________ Увеличение __________________ |
►Качественная (функциональная) оценка
1. Оценка способности к пролиферации в реакции бластной трансформации лимфоцитов
Принцип метода: Т-лимфоциты под воздействием некоторых биостимуляторов, например, фитогемагглютинина (ФГА) в культуре in vitro способны превращаться в большие бластоподобные клетки с разрыхленным ядром и базофильной цитоплазмой, активно синтезирующие ДНК.
2. Определение количества т-супрессоров, т-хелперов и т-киллеров в реакции иммунофлюоресценции (риф)
Принцип метода: Лимфоцитарная взвесь обрабатывается моноклональными антителами против CD-маркеров отдельных субпопуляций Т-лимфоцитов, а затем меченой флюорохромом антиглобулиновой сывороткой. Подсчет флюоресцирующих клеток проводят под люминесцентным микроскопом (двухэтапная РИФ).
Иммунологический статус Тесты первого уровня (ориентировочные):
№ |
Тест |
Показатель |
Содержание |
1. |
Число лейкоцитов; лейкоформула |
Общее число лейкоцитов |
4,5-9,5 тыс/мкл |
Нейтрофилы |
50-77% |
||
Лимфоциты |
18-38% (1250-2500 в 1 мкл) |
||
Моноциты |
2-10% |
||
Базофилы |
0,5-1,0% |
||
Эозинофилы |
1-5% |
||
2. |
Т- и В-лимфоциты |
Т-лимфоциты |
55-75% |
Т-лимфоциты абс. |
1000-2000 в 1 мкл |
||
В-лимфоциты |
10-15% |
||
В-лимфоциты абс. |
100-300 в 1 мкл |
||
3. |
Уровень Ig в сыворотке крови |
Ig M |
0,5-2,0 г/л |
Ig G |
10,0-20,0 г/л |
||
Ig A |
1,25-3,0 г/л |
||
4. |
Фагоцитарная активность лейкоцитов крови (показатели фагоцитоза) |
Фагоцитарный индекс |
Для кандиды 1-2,5 Для стафилококка 4-9 |
Фагоцитарное число |
Для кандиды 40-90 Для стафилококка 40-80 |
Источник информации: О.К. Поздеев «Медицинская микробиология» под редакцией акад. РАМН В.И. Покровского (Москва, 2001)