Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
микра методичка.doc
Скачиваний:
178
Добавлен:
24.12.2018
Размер:
786.43 Кб
Скачать

Иммуноблоттинг

Качественный метод, позволяющий выявлять антигены и антитела в исследуемой пробе.

Для выявления антител:

Исследуемую сыворотку больного инкубируют с известными антигенами нанесенными на нитроцеллюлозную мембрану, затем добавляют меченную диагностическую сыворотку против иммуноглобулинов человека.

Для выявления антигена:

С помощью электрофореза разделяют белки в исследуемой пробе от больного, затем их пере­носят на нитроцеллюлозную мембрану и добавляют меченную диагностическую сыворотку против известных антигенов

Иммуноблоттинг широко применяется для подтверждения твердофазного иммуноферментного анализа.

Характеристика некоторых реакции иммунитета (ри)

РИ

Направление исследования

Ингредиенты

Дополн.

ф-р

Феномен (учетный признак)

Антиген

Антитело

РА

1 .Серодиагностика

Корпускулярный

диагностикум

(взвесь клеток)

Агглютинины

сыворотки крови больного (Х)2

ИХН

Образование хлопьев агглютината

2.Идентификация

клеток

Взвесь микробных

или др. клеток (X)

Агглютинины диагностич. сыворотки

Тот же

Тот же

РПГА

1.Серодиагностика

Эритроцитарный

антигенный диагностикум

Агглютинины

сыворотки крови больного (Х)

Тот же

Образование рыхлого осадка эритроцитов

2.Индикация

антигена

Корпускулярный

или растворимый

Эритроцитарный иммуноглобулиновый

диагностикум

Тот же

Тот же

РП

Индикация

антигена

Прозрачный экстракт (X)

Преципитины

диагн. с-ки

Тот же

Выпадение

осадка

РН

1. Идентификация

токсина

Токсинсодер-

жащий экстракт (X)

Антитоксины

диагн. сыворотки

Тот же

Отсутствие

отравления и гибели животных

2.Определение

титра антитоксина

Препарат токсина

в известной дозе

Испытуемая сыворотка (X)

Тот же

Тот же

ИФ

Индикация

антигена

Корпускулярный

(Х)

Антитела, меченные флюорохромом

Тот же

Свечение

клеток при УФО

ИФА

1.Индикация

антигена

Корпускулярный

или растворимый

(X)

1 .Фиксированнные AT

2.АТ, меченные

ферментом пероксидазой

1. ИХН

2. 5-АСК

3. Н2Н2

Цветная

реакция

2.Серодиагностика

Фиксированный известный

1.Сыворотка больного (X) 2.Антиглобулиновые AT, меченные ферментом

Тот же

Тот же