Физхим методы, лабораторная 1

Тема работы: Фотометрические методы анализа.

Цель работы: Освоение фотоколориметрического метода.

Ход работы:

1. Приготовили раствор в колбах (25 мл.). Добавили по 0.2/0.3/0.4/0.5/1 мл. красителя, довести до метки на колбе дист. водой.

2. Используя раствор с V красителя 0.5 мл. выбрали светофильтр, соответствующий максимальному пику оптической плотности.

Таблица 1: Определение оптимального светофильтра для раствора

Длинна волны, нм.	Оптическая плотность, о.ед.
364	0,32
400	0,59
440	0,76
490	1,3
540	1,4
590	0,31

*Проверка точности, повторили измерение 3 раза на длине волны 540нм.

D (ср) = (1.4+1.4+1.3)/3=1.4 ед.

3. Определение оптической плотности раствора на длине волны =540 нм.

Таблица 2: Определение оптической плотности растворов на длине волны 540 нм.

Номер раствора, №	V красителя , мл.	Оптическая плотность, о.ед.
1	0.2	0.205
2	0.3	0.8
3	0.4	1.1
4	1	2.75
5	X	0.29

4. Рассчитываем концентрацию растворов:

Р-р 0.2 мл: С= (0.0002*0.0037) /0.025=2.96*10^-5 моль/л

Р-р 0.3 мл: С= (0.0003*0.0037) /0.025=4.44*10^-5 моль/л

Р-р 0.4 мл: С= (0.0004*0.0037) /0.025=5.92*10^-5 моль/л

Р-р 0.5 мл: С= (0.0005*0.0037) /0.025=7.4*10^-5 моль/л

Р-р 1 мл: С= (0.001*0.0037) /0.025=14.8*10^-5 моль/л

5. Построили график зависимости:

Рис.1. График зависимости оптической плотности от концентрации раствора.

6. Определяем неизвестную концентрацию по графику:

=2.245*10^-5 моль/л

Расчётный теоретический показатель: 2.829*10^-5 моль/л

Вывод: Определили оптимальный светофильтр для раствора. Определили оптическую плотность растворов с заданной концентрацией. Определили концентрацию неизвестного раствора (2.829*10^-5 моль/л). Имеются некоторые отклонения теоретической концентрации с концентрацией, рассчитанной по графику, поскольку скорее всего имели место быть незначительные погрешности при приготовлении растворов и измерениях.

Тема работы: Определение концентрации пигментов спектрофотометрическим методом.

Цель работы: Определить концентрацию пигментов растения.

Ход работы:

1. Вытяжку пигментов налили в кювету и определили оптическую плотность, против спирта, на различных длинах волн.

Таблица 1: Определение оптической плотности вытяжки пигментов растения.

Длина волны, нм	Оптическая плотность D, о.ед.
470	0.720
649	0.265
665	0.568
720	0.013

2. Рассчитали концентрацию хлорофиллов А и В и коротиноидов. Также рассчитали количество пигментов по формуле:

N(x) =C(x)*V(мл)/m (навески)

V=225 мл.

m=8.39 г.

C (a) = 6.15 мкг/л 13.7*(0.586-0.013)-5.76*(0.2 65-0.013) =6.15

C (b) = 2.28 мкг/л 25.8*(0.265-0.013)-7.6*(0.568-0.013) =2.28

C (кар) = 2.814 мкг/л ((0.720-0.013)-6.15*0.0066-2.28*0.03315)/0.21)) = 2.814

N (a) = (6.15*225)/8.39=164.93 мкг/г

N (b) = (2.28*225)/8.39=61.14 мкг/г

N (кар) = (2.814*225)/8.39=75.465 мкг/г

3. Измерили оптическую плотность раствора с неизвестной концентрацией:

Таблица 2: Определение оптической плотности неизвестного раствора.

Длинна волны, нм.	Оптическая плотность, D, ед.
649	0.226
665	0.447
750	0.016

C (a) = 4.7 мкг/л

Метод добавок:

4. Измерили объем неизвестной вытяжки:

V = 5мл.

5. Добавили к раствору 2 мл. раствора с неизвестной концентрацией.

6. Измерили оптическую плотность полученного раствора, на определенных длинах волн:

Таблица 3: Определение оптической плотности неизвестного раствора методом добавок.

Длинна волны, нм.	Оптическая плотность, D, о.ед.
649	0.231
665	0.460
720	0.016

7. Определение концентрации неизвестного раствора:

C(x) = (C(o)*V(o))/(((A(x)+g)/A(x))*(V(x)+V(o))-V(x))

C(x) = 5.6 мкг/л

Вывод: При исследовании раствора пигментов с неизвестной концентрациями были получены следующие результаты:

C (a) = 4.7 мкг/л

C(x) = 5.6 мкг/л

Результаты различаются поскольку расчетные формулы в используемых методах различны, и одна из них не учитывает мутность раствора.

Результаты по вытяжке пигментов:

C(a) = 6.15 мкг/л

C(b) = 2.28 мкг/л

C(кар) = 2.814 мкг/л

N(a) = (6.15*225)/8.39=164.93 мкг/г

N(b) = (2.28*225)/8.39=61.14 мкг/г

N(кар) = (2.814*225)/8.39=75.465 мкг/г

Содержание хлорофилла A, выше чем хлорофилла B, т.к хл. A, является основным пигментом растений, а хл. B – вспомогательный.