Исследование желудочного сока. Определение кислотности желудочного сока (общей, свободной и связной нСl)
Принцип метода. Кислотность желудочного сока выражается количеством моль гидроксида натрия, необходимого для нейтрализации 1 л (1000 мл) желудочного сока. Различают следующие виды кислотности желудочного сока:
свободная HCl;
связанная HCl (кислореагирующие хлористоводородные соли белков и других слабых оснований);
общая кислотность (свободная и связанная HCl, а также кислые фосфорнокислые соли и органические кислоты).
Свободную и связанную соляную кислоту определяют путем титрования желудочного сока 0,1 М NaOH в присутствии индикатора диметиламиноазобензола, имеющего зону перехода окраски в кислой среде (рН=3-4). В качестве индикатора при определении общей кислотности используют фенолфталеин (зона перехода окраски фенолфталеина лежит в слабощелочной среде).
Ход работы. Отмеривают в колбочку 5 мл профильтрованного желудочного сока и прибавляют по 1-2 капли индикаторов (парадиметиламиноазобензола и фенолфталеина). Если желудочный сок содержит свободную НСl, получается красное окрашивание, если нет- оранжевое. При получении красной окраски содержимое колбочки титруют 0,1 М NaOH до оранжевого цвета. Записывают результаты и продолжают титровать до розовой окраски, которая держится 30-60 сек.
Производят расчет кислотности по формуле:
где А – кислотность (мммоль/л),
х – результат титрования (мл),
0,1 – молярность раствора NaOH,
0,005 – объем пробы желудочного сока.
При расчете свободной НCl «х» соответствует титрованию от красного до оранжевого цвета, если цвет оранжевый – свободная кислотность отсутствует. При определении связанной РCl «х» соответствует переходу от оранжевого до желтого цвета.
При определении общей кислотности «х» равен количеству мл NaOH, ушедшему на титрование желудочного сока от начала титрования до розового окрашивания.
Норма: свободная HCl -20-40 ммоль/л; связанная – 2-15 ммоль/л; общая кислотность 40-60 ммоль/л.
Клинико-диагностическое значение анализа. Значительные изменения кислотности желудочного сока могут наблюдаться при заболеваниях желудка. При язвенной болезни желудка и гиретацидном гастрите происходит увеличение свободной соляной кислоты и общей кислотности.
Уменьшение свободной НСl и общей кислотности свидетельствует о гипоацидном гастрите. При раке желудка в желудочном содержимом может полностью отсутствовать соляная кислота (ахлоргидрия).
Обнаружение молочной кислоты (реакция Уфельмана)
Принцип метода. Молочная кислота с фенолятом железа (III) образует лактат железа, имеющий желто-зеленую окраску.
Ход работы.К 20 каплям 1% раствора фенола добавляют 102 капли 1% FeCl3, т.е. получают фенолят железа, окрашенный в фиолетовый цвет. В данную смесь по каплям приливают желудочный сок. Регистрируют изменение окраски.
Норма: в норме реакция Уфельмана отрицательная.
Клинико-диагностическое значение анализа. Накопление молочной кислоты в желудочном содержимом характерно для рака желудка. Реакция возможна только в отсутствии свободной HCl.
Реакция на кровь с бензидином (кровь в желудочном соке – при изъявлении слизистой оболочки стенки желудка)
А) В пробирку наливают 1 мл желудочного сока, добавляют 4-5 капель 0,2% спиртового раствора бензидина и 5 капель 1% раствора перекиси водорода.
Б) Наблюдают окраску. Результаты записывают в таблицу.
В) При наличии крови в соке развивается синее окрашивание – продукт окисления бензидина.
Контрольные вопросы по теме
1. Дайте общее определение обмена веществ. Назовите основные этапы обмена.
2. Роль белков в жизнедеятельности организма.
3. Объясните динамическое состояние белков в организме.
4. Роль белков в питании. Норма белков в питании, в зависимости от таких факторов она может варьировать?
5. Что такое «коэффициент изнашивания»? Чему он равен?
6. Что такое азотистый баланс? Каким он может быть и почему? Что такое «квашиоркор»?
7. Каково Ваше представление о биологической ценности белка? Назовите заменимые и незаменимые аминокислоты. Приведите формулы.
8. Что такое биологический минимум белка? Чему он равен?
9. Каким превращениям подвергаются белки в желудочно-кишечном тракте? Биологическое значение этих процессов.
10. Какой химический процесс лежит в основе переваривания белков? Объясните процесс переваривания с биологической точки зрения.
11. Назовите протеолитические ферменты, а также основные органические и минеральные компоненты желудочного, панкреатического и кишечного соков.
12. Каков механизм образования соляной кислоты в слизистой оболочке желудка?
13. В чем заключается роль соляной кислоты в процессе пищеварения?
14. Перечислите виды кислотности желудочного сока. Метод их определения. Величины кислотности желудочного сока в норме.
15. Понятие об аутокатализе. Приведите примеры.
16. Какой механизм активирования протеолитических ферментов?
17. Охарактеризуйте действие пепсина, трипсина, химотрипсина. Какие связи они преимущественно гидролизуют и при какой оптиуме рН среды?
18. Как действуют карбоксипептидаза, аминопептидаза?
19. Укажите, на какие компоненты происходит расщепление хромопротеидов, фосфопротеидов и гликопротеидов при их переваривании.
20. Какие продукты переваривания простых и сложных белков (кроме нуклеопротеидов) могут всасываться из кишечника в кровь?
21. Укажите, для чего нужны аминокислоты в организме.