- •Методические указания для студентов
- •К практическому занятию №7
- •«Культивирование прочих микроорганизмов – грибов, простейших, риккетсий, хламидий. Определение чувствительности микробов к лекарственным веществам.
- •Основы химиопрофилактики и химиотерапии»
- •4.1. Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
- •Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола занятия и его оформлением
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом дисков
- •Культивирование спирохет
- •Питательные среды для культивирования лептоспир
- •Культивирование грибов
- •Культивирование простейших
- •Культивирование риккетсий
Культивирование простейших
Среда NNN (3 N - Нови, Ниль, Николь): вода, поваренная саль, агар-агар,дефибринированная кровь кролика.
Для размножения лейшманий - среда 3 N модифицированная (свежую кровьзаменяют переваром или разведенной сывороткой крови человека).
Для выделения чистой культуры трихомонад - обрабатывают материалпенициллином и стрептомицином (для устранения бактерий), добавляютнистатин (для устранения дрожжевых грибов).
Затем засевают материал на одну из сред:
МПБ с 1% глюкозой и 5% лошадиной сыворотки. После посева среду сверху заливают вазелиновым маслом.
Среда Т (печеночный бульон, раствор Рингера, пептон, агар-агар, цистеин солянокислый. После стерилизации добавляют мальтозу, инактивированную сыворотку человека или асцитическую жидкость).
Приложение 6
Культивирование риккетсий
1. В развивающихся 7 - 11 дневных куриных эмбрионах: заражение производят в желточный мешок, температура и продолжительность выращивания зависят от вида риккетсий.
2. В культуре клеток:
- первичные однослойные культуры клеток (чаще – трипсинированныекультуры) куриных, мышиных, крысиных, человеческихфибробластов;
- перевиваемые культуры клеток (опухолевых или нормальных тканей);
- трипсинизированные культуры клеток почечного эпителия; первичные культуры ретикулярных клеток макрофагов (из костного мозга, селезенки).
3. В организме чувствительных животных:
- легочный реккетсиоз у мышей (интраназальное введение материала молодым мышам);
- легочный риккетсиоз у кроликов (введение в трахею);
- перитониальный риккетсиоз у морских свинок и кроликов (внутрибрюшное введение);
4. Заражение вшей микроинъекциями: per rectum методом Вейгеля (введение заразного материала через стеклянный капилляр в кишечник членистоногих под контролем через бинокулярную лупу с увеличителем в 10-15 раз или per os (на кормилках);
- методами непосредственного кормления насекомых на больных добровольцах.