1.2. Лечебно-профилактические гетерологичные сыворотки и иммуноглобулины

Для получения лечебно-профилактических сывороток применяет­ся метод гипериммунизации животных. Суть его заключается во введе­нии нарастающих доз антигенов, чтобы добиться наивысшей ответной реакции организма (т.е. максимального нарастания в крови титров анти-теп). В настоящее время общепризнанным объектом для получения гипериммунных сывороток является лошадь. В комплексе специфической иммунизации лошадей - продуцентов антитоксических сывороток - можно выделить три основных процесса, состоящих из отдаленного грундиро­вания животных соответствующими антигенами, подготовительных цик­лов иммунизации и последующих циклов иммунизации.

Грундирование чаще всего проводят путем двукратного введения антигена с интервалом в 21 - 30 дней. Через 1-6-9 месяцев после грундирования проводят иммунизацию соответствующим антигеном в нарастающих дозах (7-8 инъекций с интервалом между ними 4 – 5 дней). На 7-й день после введения последней дозы препарата делают кровопускание и используют кровь для получения сыворотки. Спустя две недели кровопускание проводят второй цикл гипериммунизации и т. д.

У приученных к кровопусканию крови лошадей количество забираемой крови должно равняться 1/50 живой массы (т. е. на 50 кг веса получают 1 л крови). Поскольку средняя масса продуцента составляет 400-450 кг, обычно у лошади забирают 8-9 литров крови. Нативная сыворотка крови в дальнейшем подвергается очистке и концентрированию методом "Диаферм-3", затем стерилизуется фильтрацией. Метод "Диаферм-3" включает стадии ферментативного гидролиза сыво­роточных белков пепсином, термоденатурации (45 мин при 58 градусах), высаливания глобулинов сульфатом аммония, диализ и дополнительную очистку диализата от балластных белков в присутствии хлороформе. Длительность технологического процесса - 6 дней.

Поскольку гетерологичные сыворотки являются для человека чу­жеродными антигенами, они вызывают образование антител к белкам введенной сыворотки. В связи с этим период полувыведения введенных специфических антител составляет около 2-х недель. Кроме того, у 10-15% реципиентов сыворотки может развиться сывороточная болезнь; а у лиц с аллергией к лошадиному белку - анафилактический шок.

Для профилактики анафилактического шока перед введением любой гетерологичной сыворотки обязательна постановка внутрикожной пробы с разведенной 1:100 лошадиной сывороткой (она находится в коробке с препаратом и маркирована красным цветом). При отсутствии специально изготовленной сыворотки её необходимо изгото­вить путем разведения 0.1 сыворотки в 9.9 мл стерильного физиоло­гического раствора. Инъекцию производят в сгибательную поверхность предплечья. 0.1 мл разведенной сыворотки вводят внутрикожно и на­блюдают за реакцией 20 минут. Пробу считают отрицательной, если диаметр отека и (или) покраснения на месте введения меньше 1 см. Ес­ли покраснение (или отек) имеют диаметр более 1 см пробу считают положительной.

При отрицательной пробе 0.1 мл неразведенной сыворотки вводят подкожно в область средней трети плеча. При отсутствии местной или общей реакции через 30-60 минут внутримышечно вводят назначенную дозу сыворотки, подогретой до 36°9.

При положительной кожной пробе (а также при развитии реакции на подкожное введение 0.1 мл неразведенной сыворотки) препарат вводят лишь по жизненным показаниям (т.е. при наличии угрозы жизни больного). Для десенсибилизации разведенную в 100 раз сыворотку вводят подкожно последовательно в объёмах 0.5; 2.0; 5.0 мл с интерва­лами 15-20 минут, затем подкожно инъецируют 0.1 мл и 1.0 мл цельной сыворотки (также с интервалом 15-20 мин). При отсутствии реакции вво­дят всю необходимую дозу сыворотки. Одновременно с началом десенсибилизации больному вводят средства противошоковой терапии (в первую очередь глюкокортикоиды). В случае появления симптомов анафилактического шока на любую из указанных доз сыворотки после­дующие введения препарата проводят под наркозом.