Mikrobiologia_Immunoprofilaktika_i_terapia

Иммунопрофилактика, иммунотерапия инфекционных заболеваний.

Одним из важнейших направлений прикладной микробиологии является создание эффективных препаратов для иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекционных заболеваний.

Иммунопрофилактика – применение иммунологических преператов для создания искусственного иммунитета (активного или пассивного).

Иммунотерапия – это применение иммунологических препаратов для лечения больных.

Среди препаратов для иммунопрофилактики и иммунотерапии различают:

• Вакцины – содержат антигены, индуцируют в организме развитие гуморального и клеточного иммунного ответа, то есть формируют активный иммунитет, который, как правило, развивается через несколько недель и сохраняется достаточно долго (от 6 месяцев до 10 лет и более лет).

• Гипериммунные сыворотки и иммуноглобулины – содержат готовые антитела, при их введении возникает пассивный иммунитет, который возникает немедленно после введения препарата, но сохраняется недолго (период полувыведения гетерологичных антител составляет около 2 недель, а гомологичных – около 4 недель.

Вакцинопрофилактика – введение вакцин – антигенных препаратов для создания искусственного активного приобретенного иммунитета. Обладают высокой иммуногенностью (обеспечивают надежную противоинфекционную защиту), ареактивностью (не дают выраженных побочных реакций), безвредностью для макроорганизма и минимальным сенсибилизирующим действием.

По назначению вакцины делятся на:

• Профилактические.

• Лечебные.

По характеру микроорганизмов, из которых они созданы:

• Бактериальные.

• Вирусные.

• Риккетсиозные.

По способу приготовления:

• Живые.

• Убитые.

• Химические.

• Анатоксины.

• Искусственные.

• Генноинженерные.

• Антиидиотипические (в стадии разработки).

• Липосомальные (в стадии разработки).

Название вакцины было дано Л.Пастером всем прививочным препаратам, полученным из микроорганизмов и их продуктов. Заслугой Л.Пастера была разработка принципов направленного получения вакцинных штаммов – селекция спонтанных мутантов с пониженной вирулентностью и сохраненными иммуногенными свойствами путем культивирования их в определенных условиях. Э.Дженнером была получена первая живая вакцина, содержащая вирус коровьей оспы, идентичный по антигенным свойствам вирусу натуральной оспы человека, но маловирулентный для человека.

1. Живые вакцины – содержат ослабленные (аттенуированные) штаммы микроорганизмов, создают, как правило, длительный (напряженный) иммунитет, сходный с противоинфекционным, в большинстве случаев, достаточно однократной вакцинации, а интервалы между вакцинациями достаточно продолжительны, так как вакцинный штамм может размножаться и персистировать в организме. Однако использование живых вакцин может представлять опасность для лиц с иммунодефицитами.

Аттенуированные микробы являются наследственно измененными и характеризуются стойко сниженной вирулентностью (или ее отсутствием) при сохранении иммуногенности.

Вакцинные штаммы получают разными способами:

• Путем пассажа возбудителя через организм невосприимчивого животного (фиксированный вирус бешенства).

• Путем культивирования микроорганизмов на неоптимальных питательных средах или в неоптимальных условиях (вакцина БЦЖ).

• Из внешней среды путем селекции вакцинных штаммов (сибиреязвенная вакцина СТИ).

• Путем выделения аттенуированных мутантов от больных (вакцинный штамм краснухи Джерри Линн).

2. Убитые (инактивированные) вакцины подразделяют на:

Корпускулярные – содержат бактерии или вирусы, накопленные в субстрате. Вакцины готовят из микроорганизмов, обладающих максимально выраженной иммуногенностью, инактивированных прогреванием, УФ-лучами или химическими веществами в условиях, исключающих денатурацию антигенов.

Химические вакцины – выделение из бактериальных клеток компонентов, соответствующих протективным антигенам. По сравнению с убитыми и живыми вакцинами химические вакцины менее реактогенны. Аналогами бактериальных химических вакцин являются вирусные субъединичные (расщепленные) вакцины, содержащие лишь некоторые наиболее иммуногенные компоненты вирионов. Для повышения иммуногенности химических и субъединичных вакцин к ним добавляют разного рода адьюванты: гидрооксид алюминия, алюминиевокалиевые квасцы, фосфат алюминия. Те же адьюванты добавляют и к анатоксинам.

Анатоксины получают путем обработки экзотоксинов 0,3 – 0,5% раствором формалина при 37С в течение 28 – 40 дней. При этом токсин утрачивает ядовитость, но сохраняет способность индуцировать синтез антитоксических антител. Анатоксины индуцируют образование активного антитоксического иммунитета, формируется стойкая иммунологическая память, в связи с этим повторное введение анатоксинов через 10 и более лет сопровождается выработкой антител в высоких титрах.

Генноинженерные вакцины – содержат антигены, полученные методами генной инженерии – на основе картирования геномов микроорганизмов гены, контролирующие нужные антигенные детерминанты переносят в геном других микроорганизмов и клонируют в них, добиваясь экспрессии этих генов в новых условиях.

Липосомальные вакцина. Достижения современной фундаментальной иммунологии и молекулярной биологии позволяют получить в чистом виде антигенные детерминанты (эпитопы). Правда, изолированный эпитоп не обладает иммуногенностью, поэтому создание вакцин нового поколения требует коньюгации антигенных детерминант с молекулой носителем. Решение проблемы доставки антигенных эпитопов к иммунокомпетентным клеткам без изменения их структуры под действием ферментов связано с использованием липосом – микроскопических пузырьков, состоящих из двуслойных фосфолипидных мембран. Благодаря их сходству с клеточными мембранами липосомы не токсичны для организма, а заключенное в них вещество защищено от разбавления и деградации в крови. Липосомы способны адсорбироваться на клетках, причем их содержимое медленно поступает внутрь клетки. Фагоцитирующие клетки могут захватывать липосомы путем эндоцитоза с последующей деградацией их мембран. Антигены, включенные в состав поверхностной мембраны липосом, приобретают свойства адъюванта – способны усиливать иммунный ответ. Другие антигены можно вводить в содержимое липосом.

Антиидиотипические вакцины. Сравнительно недавно была обоснована принципиальная возможность получения вакцин на основе антиидиотипических антител. Это объясняется близким структурным сходством между эпитопом антигена и активным центром антиидиотипического антитела, распознающим идиотипический эпитоп антитела к данному антигену.

Вакцинотерапия – введение антигенных препаратов с целью стимуляции механизмов специфической защиты. Применяются при вялотекущих длительных хронических формах инфекции для перевода из хронической формы в обострение. К лечебным вакцинам относятся аутовакцины, приготовленные из убитых прогреванием при 70 – 80ºС в течение 1 часа штаммов возбудителей, выделенных от данного больного.

Серопрофилактика и серотерапия – введение лечебно-профилактических сывороток и иммуноглобулинов – биологических препаратов, содержащих антитела. Предназначены для лечения и экстренной профилактики путем создания пассивного антитоксического, антибактериального или антивирусного иммунитета.

Все лечебно-профилактические сыворотки и иммуноглобулины делятся на 2 группы: гетерологичные и гомологичные. Гетерологичные сыворотки и иммуноглобулины получают из крови животных (лошадей, волов), гипериммунизированных антигеном или анатоксином. Гипериммунизация – это введение нарастающих доз антигена, чтобы добиться наивысшей ответной реакции организма (максимального титра антител). Гетерологичные сыворотки и иммуноглобулины подвергают очистке от балластных веществ методом ферментативного гидролиза «Диаферм-3». Для профилактики анафилактического шока такие препараты вводят дробно по методу Безредко: 0,1 мл разведенной сыворотки 1:100 внутрикожно; при полном отсутствии местной или общей реакции 0,1 мл – подкожно; при отсутствии реакции – всю дозу внутримышечно или внутривенно по показаниям. При положительной внутрикожной пробе вводить только по жизненным показаниям под прикрытием противошоковой терапии с подключением глюкокортикоидов.

Гомологичные иммуноглобулины из крови человека выгодно отличаются от препаратов животного происхождения тем, что не являются для организма чужеродными и поэтому менее реактогенны. Получают из донорской, абортной или плацентарной крови методом фракционирования по Кону (то есть выделяют иммуноглобулины добавлением этанола при низкой температуре), стерилизуют фильтрованием. Существующие методы приготовления глобулинов полностью исключают возможность присутствия в них вирусов, в том числе и ВИЧ, но они могут содержать агрегированные в процессе приготовления реактогенные белки. Поэтому препараты иммуноглобулинов вводят только внутримышечно, подкожно или накожно. Иммуноглобулины, предназначенные для внутривенного введения, подвергают дополнительной обработке для снижения реактогенности. Иммуноглобулины готовят либо путем отбора доноров, у которых при титровании обнаруживается высокий титр определенных антител (например, жители эндемичных зон для приготовления иммуноглобулина против клещевого энцефалита), либо из крови людей, специально вакцинированных.