Методы, используемые для изучения нативных препаратов

Метод «раздавленной» капли. На поверхность обезжиренного предметного стекла наносят каплю исследуемого материала или суспензию бактерий и покрывают ее покровным стеклом. Капля должна быть небольшой, не выходящей за край покровного стекла. Микроскопируют препарат с объективом 40х.

Метод «висячей» капли. Препарат готовят на покровном стекле, в центр которого наносят одну каплю бактериальной культуры. Затем предметное стекло с лункой, края которой предварительно смазывают вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением переворачивают препарат покровным стеклом вверх. В правильно приготовленном препарате капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь ее дна или края. Для микроскопии вначале используют сухой объектив 8х, под увеличением которого находят край капли, а затем устанавливают объектив 40х и исследуют препарат.

Прижизненная (витальная) окраска. Взвесь микроорганизмов вносят в каплю 0,001% раствора метиленового синего или нейтрального красного. Затем готовят препарат «висячая» или «раздавленная» капля и микроскопируют. После микроскопии препараты «висячей» или «раздавленной» капли опускают в дезинфицирующий раствор.

Задания для самостоятельной работы студентов:

СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ. ОКРАСКА ПО ГРАМУ. Зарисовать:

1.	Кокки	Диплококки	Тетракокки	Сарцины	Стафилококки	Стрептококки
2.	Палочки	Бактерии	Бациллы	Клостридии	Коринебактерии дифтерии
3.	Извитые	Вибрионы	Спириллы	Трепонемы	Боррелии	Лептоспиры
4.	Нитчатые	Актиномицеты

Подпись преподавателя_________________________________________________________

ЗАНЯТИЕ №3 Дата____________

Сравнительная морфология групп микроорганизмов. Актиномицеты. Спирохеты. Микоплазмы. Риккетсии. Хламидии. Вирусы

Цель: изучить морфологию актиномицет, спирохет, микоплазм, риккетсий, хламидий, вирусов.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

1. Морфология актиномицетов, спирохет, микоплазм, риккетсий, хламидий, вирусов.

2. Принципы классификации изучаемых групп микроорганизмов.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

• дифференцировать микроорганизмы в микропрепаратах.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ

о методах окраски для выявления актиномицетов, спирохет, микоплазм, риккетсий, хламидий.

Надцарства Вирусы Прокариоты Эукариоты

(доклеточн., доядерн.) (клеточн., доядерн.) (клеточн., ядерн.)

Царства Вирусы Бактерии грибы простейшие

риккетсии актиномицеты спирохеты

хламидии

Работа № 1. Актиномицеты. Методы выявления

Цель: изучить морфологию актиномицет (см. теоретическую справку)

Результат:

Результат:

Вывод:

Работа № 2. Спирохеты. Методы выявления

Цель: изучить морфологию спирохет (см. теоретическую справку)

Результат:

Результат:______________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

Результат:______________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

Ультраструктура

Результат:

Особенности строения клеточной стенки

Результат:

Вывод:

Работа № 3. Микоплазмы. Методы выявления

Цель: изучить морфологию микоплазм (см. теоретическую справку)

Результат:

Вывод:

Работа № 4. Хламидии; морфология, цикл развития

Цель: изучить морфологию хламидий, цикл развития

1. Что изображено на схеме? Охарактеризовать основные этапы процесса; Перечислите признаки микроба, позволяющее сделать заключение. Какими методами необходимо воспользоваться для подтверждения диагноза? Опишите пути заражения и закономерности патогенеза.

Вывод:

Работа № 5. Морфология риккетсии и цикл развития

Цель: изучить морфологию и цикл развития риккетсий (см. теоретическую справку)

Результат:

Две формы:

Результат:

Вывод:

Работа № 6. Вирусы. Методы выявления

Цель: изучить морфологические особенности внутриклеточного паразитизма вирусов.

1. Опишите строение вирусов.

Перечислите основные биологические свойства

- простоустроенный вирус - сложноустроенный вирус

Вывод:

Методы выявления вирусов:

1)

2)

3)

4)

Работа № 7. Бактериофаги

Цель: Изучить морфологию и биологические свойства типовых бактериофагов

Взаимодействие бактериофага с оболочкой бактерии

1. Опишите строение бактериофагов.

Перечислите основные биологические свойства

Вывод:

Теоретическая справка

к Работе № 1

Методы выявления актиномицет

По химическому составу оболочка актиномицетов близка к оболочке бактерий, поэтому они окрашиваются анилиновыми красителями. Обычно их окрашивают простыми методами или по Граму. Актиномицеты являются грамположительными микроорганизмами.

С помощью прокаленного и остуженного скальпеля отрезают небольшой кусочек культуры актиномицета на плотной питательной среде и помещают его в каплю воды на предметном стекле. Каплю накрывают вторым чистым предметным стеклом. Стекла плотно придавливают друг к другу, растягивают и таким образом получают два мазка, которые высушивают, фиксируют обычным способом и окрашивают водным фуксином.

При микроскопии видно сплетение тонких нитей, истинное ветвление их и большое количество свободно лежащих экзоспор - конидий. В гистологическом срезе из органа при актиномикозе центральная часть друзы актиномицета представляет сплетение тонких нитей, окрашенных в темно-фиолетовый цвет. Отходящие на периферию концевые нити образуют колбовидные вздутия, окрашенные в розовый цвет

Теоретическая справка

к Работе № 2