ЗАНЯТИЕ 1.1.4

Физиология микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики

Цель занятий:

изучить условия и методы культивирования микроорганизмов, освоить бактериологический метод диагностики.

Студент должен знать:

1. Особенности метаболизма бактерий.

2. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.

3. Питание бактерий.

4. Основные принципы культивирования.

5. Ферменты бактерий. Идентификация бактерий по ферментативной активности.

Студент должен уметь:

• Применять бактериологический метод диагностики для идентификации бактерий.

Студент должен владеть:

• алгоритмом лабораторной диагностики инфекционных болезней;

• методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителей

Работа № 1. Питательные среды

Цель: изучить питательные среды, применяемые в бактериологии и вирусологии.

Самостоятельная работа: классифицировать предложенные питательные среды, результаты оформить в виде таблицы (см. теоретическую справку).

среда	происхождение			консистенция				назначение
	естест-венное	искусст-венное	жидкая		полужидкая	плотная	общего		ДДС	элективные
Мясопептон- ный агар (МПА)
Мясопептон ный бульон (МПБ)
1 % пептонная вода
Среда Эндо
Среды Гисса
Кровяной агар
Молоко
Желточно- солевой агар (ЖСА)
Среда 199

Вывод:

______________________________________________________________________________________

Работа № 2. Характер роста бактерий на питательных средах

(культуральные свойства)

Цель: изучить характер роста бактерий на плотной питательной среде (МПА).

Самостоятельная работа: описать культуральные свойства колоний, выросших на МПА, результаты внести в таблицу.

Критерии	Варианты описания	Описание колонии
форма	Круглая, розеткообразная, в форме листа и др..
размер	Крупные – d> 4-5 мм; Средние - d= 2-4 мм; Мелкие - dдо 2 мм.
характер края	Гладкий (S-тип) Шероховатый (R-тип)
пигмент (цвет)	Белый, желтый, красный и др.
поверхность	Плоская, выпуклая, куполообразная, с выпуклым центром, с вогнутым центром и др.
прозрачность	Прозрачная, непрозрачная, полупрозрачная
структура	Гомогенная, негомогенная
консистенция (вязкость)	Сухие, вязкие, слизистые, маслообразные и др.

Вывод:

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Работа № 3. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах

Цель: изучить особенности роста микроорганизмов на жидких питательных средах

Самостоятельная работа: описать характер роста на жидкой питательной среде

Опыт № 1 Опыт № 2 Опыт № 3

МПБ МПБ 1% пептонная вода

(кишечная палочка) (возбудитель сибирской язвы) (возбудитель холеры)

Результат (характер роста):

_________________ __________________ ___________________

Вывод:

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 4. Техника посева на питательные среды

Цель: ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку).

Самостоятельная работа: рассмотреть готовые демонстрационные посевы, зарисовать и указать назначение каждой техники посева.

Название	Рисунок	Значение
седиментация по Коху
посев по Дригальскому
посев по Шукевичу
посев методом укола
посев на скошенный агар

Вывод:

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 5. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)

Цель: изучить ферментативную активность микроорганизмов с позиции их дифференциации (см. теоретическую справку)

Самостоятельная работа:определить сахаролитическую и протеолитическую активность предложенной культуры и идентифицировать микроорганизм.

А) сахаролитическая и протеолитическая активность

вид м/о	Сахаролитическая активность						Протеолитическая активность
	лактоза	глюкоза	мальтоза	маннит	сахароза	индол		Н2S

Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Б) каталазная активность аэробов

Цель: изучить каталазную активность микроорганизмов; определить тип дыхания исследуемой культуры (см. теоретическую справку).

Самостоятельная работа: определить каталазную активность исследуемой культуры.

Результат: _______________________________

_________________________________________

_________________________________________

Вывод: __________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________

Работа № 6. Алгоритм выделения чистых культур аэробных микроорганизмов

Цель: освоить алгоритм выделения и идентификации чистых культур аэробных микроорганизмов.

Самостоятельная работа: под руководством преподавателя разобрать схему бактериологического метода диагностики возбудителей инфекционных болезней

(см. теоретическую справку).

Алгоритм выделения чистых культур аэробных микроорганизмов

1 этап

2 этап

3 Этап

а) д)

4 Этап

III

е) ⃰

б)

е)

в) РА

ж)

г)

1 этап. Забор и доставка исследуемого материала

2 этап. Посев материала на питательные среды с целью получения изолированных колоний

3 этап Накопление чистой культуры на скошенной питательной среде

4 этап. Идентификация выделенной чистой культуры:

а) изучение морфологических и тинкториальных свойств;

б) изучение культуральных свойств:

в) изучение антигенной структуры возбудителя с помощью постановки реакции агглютинации на стекле с поливалентными, моновалентными и монорецепторными сыворотками;

г) изучение биохимических свойств возбудителя по результатам посева на дифференциально-диагностические среды (ДДС);

д) биопроба на лабораторных животных – изучают клинику и патогенез заболевания;

е) реакция фаголизабельности с диагностическими бактериофагами для выявления вида возбудителя;

е)* реакция фаготипирования - проведение внутривидовой идентификации для выявления источников инфекции;

ж) определение чувствительности микробов к антибиотикам диско-диффузионным методом (метод бумажных дисков).

Подпись преподавателя______________________________________________________________