Стоматологический факультет
Кафедра микробиологии ТГМА
Занятие № 14
Микрофлора ротовой полости
Цель:
Изучить микрофлору полости рта в норме и при патологии. Освоить методы дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний полости рта. Изучить способы микробиологического исследования кариеса, пародонтита, стоматита.
Студенты должны знать:
Основные представители нормальной микрофлоры полости рта.
Значение анаэробных и микроаэрофильных бактерий полости рта.
Основные группы микроорганизмов зубного налета.
Роль слюны как фактора, определяющего природу и состояние флоры полости рта.
Изменение микрофлоры ротовой полости при стоматите, кариесе.
Микробный пейзаж при заболеваниях пародонта.
Этиологию, патогенез и осложнения заболеваний полости рта.
Студенты должны уметь:
1. Сделать правильно забор материала из полости рта для бактериологического исследования.
2. Сделать посев материала на питательные среды.
3. Окрашивать готовые препараты по методу Грама.
4. Исследовать в биологическом микроскопе мазки из микробной культуры.
5. Интерпретировать результаты исследований.
Студенты должны иметь представление:
о роли микроорганизмов в патологических процессах полости рта;
о физиологических и гуморальных защитных механизмах полости рта;
о режиме работы с материалом, содержащим патогенные
микроорганизмы.
Методические указания
Работа № 1. Микрофлора полости рта.
Цель: изучить качественный и количественный состав микрофлоры полости рта.
Самостоятельная работа
Ход работы:
1. Произвести забор материала со слизистых оболочек и поверхности языка стерильным ватным тампоном.
2. Высев на питательные среды.
3.Инкубировать посевы в термостате в течение 24 часов.
4. Идентифицировать выделенные штаммы микроорганизмов на основании морфоло-гических, тинкториальных и культуральных признаков.
5. Сделать вывод.
Культуральные свойства
ЖСА
Результат:
Среда Эндо
Результат:
Кровяной агар
Результат:
Среда Сабуро
Результат:
Среда тиогликолевая
Результат:
Вывод:
Морфологические и тинкториальные свойства
Со среды ЖСА
Результат:
Со
среды Эндо
Со среды Эндо
Результат:
С кровяного агара
Результат:
Со среды Сабуро
Результат:
С тиогликолевой среды
Результат:
Вывод:
Работа № 2. Дифференциально – диагностическая микрофлора при различных патологических состояниях полости рта
Цель: Используя теоретическую справку заполнить предложенную таблицу
|
Представители микрофлоры |
стоматит |
кариес |
пародонтит |
|
стафилококки |
|
|
|
|
стрептококки |
|
|
|
|
фузобактерии |
|
|
|
|
бактероиды |
|
|
|
|
вейлонеллы |
|
|
|
|
грибы рода Candida |
|
|
|
|
актиномицеты |
|
|
|
|
спирохеты |
|
|
|
|
лактобактерии |
|
|
|
|
коринебактерии |
|
|
|
|
лептотрихи |
|
|
|
|
Пептококки, пептострептококки |
|
|
|
|
превотеллы |
|
|
|
|
порфиромонады |
|
|
|
Вывод:
Работа № 3. Микрофлора кариозной полости.
Цель:изучить микрофлору кариозной полости.
У пациента с множественным кариесом взят материал на бактериологическое исследование. Сделан посев на различные питательные среды: КА, Сабуро, тиогликолевую. Из выросших колоний сделаны мазки, окрашены по Граму. Изучить готовые посевы и микропрепараты. Зарисовать. Сделать вывод об этиологических факторах кариеса.
КА Сабуро Тиогликолевая среда
Описать морфологические и тинкториальные свойства
Результат:
Результат:
Результат:
Вывод:
Работа № 4. Микрофлора десневого экссудата при пародонтите.
Цель:определить микрофлору при гнойном воспалении
Задача.
Мужчина в возрасте 45 лет обратился с просьбой удаления подвижного зуба. При осмотре полости рта: слизистая рыхлая, отечная, ярко малинового цвета, при нажатии из зубо-десневого кармана выраженное гноетечение, шейки фронтальной группы зубов оголены на 1/2, имеют 3 степень подвижности, также на жевательной группе зубов множественный кариес. Врачом стоматологом был поставлен предварительный диагноз «пародонтит»? Какие методы лабораторной диагностики следует назначить больному для подтверждения диагноза?
Самостоятельная работа студента. Изучить готовые посевы. Сделать заключение.
Описать культуральные свойства микроорганизмов.
КА ЖСА Среда тиогликолевая
Описать морфологические и тинкториальные свойства
Результат:
Результат:
Результат:
Вывод:
Работа № 5. Основные способы микробиологического исследования стоматитов.
Задача № 1: К врачу стоматологу обратился пациент после травмы слизистой оболочки полости рта. При осмотре врачом выявлены пузырьки, наполненные кровянистой жидкостью, неприятный гнилостный запах изо рта, повышенная температура. Врач направил соответствующий материал в бактериологическую лабораторию на диагностику. Сделан посев на кровяной агар.
Цель: Зарисовать и описать культуральные свойства колоний с кровяного агара. Отметить назначение данной среды, ее состав, на основе чего можно сделать вывод о наличии патогенной микрофлоры. Определить вид стоматита, его этиологию.
Результат:
Кровяной агар
Приготовить
мазок. Окрасить по Граму. 
Результат:
Вывод:
Задача № 2. В стоматологическую клинику обратился пациент с жалобами на болезненность при приеме пищи, движениях губ и языка, повышенное слюнотечение. Из анамнеза известно, что пациент болен туберкулезом, болевые ощущения в ротовой полости появились около недели назад. При осмотре врачом стоматологом обнаружена язвочка, окруженная ярко красным ободком. Отделяемое язвочки направлено в бактериологическую лабораторию. Произведен посев на среду ЖСА.
Цель: Зарисовать и описать культуральные свойства колоний со среды ЖСА. Отметить назначение данной среды, ее состав, на основе чего можно сделать вывод о наличии патогенной микрофлоры. Определить вид стоматита. Его этиологию.
ЖСА
Результат:
Приготовить мазок. Окрасить по Граму.
Результат:
Вывод:
Задача № 3: В отделение детской стоматологии обратилась мама с ребенком, у которого на слизистой оболочке полости рта появился налет, напоминающий творожную массу. Из анамнеза - ребенок родился недоношенным, питается материнским молоком. Врачом был собран материал с пораженной поверхности и отправлен в бактериологическую лабораторию для диагностики. Сделан посев на среду Сабуро.
Цель: Зарисовать и описать культуральные свойства колоний со среды Сабуро. Отметить назначение данной среды, ее состав, на основе чего можно сделать вывод о наличии патогенной микрофлоры. Определить вид стоматита. Его этиологию.
Результат:
Среда Сабуро
Приготовить мазок. Окрасить по Граму.
Результат:
Вывод:
Задача № 4: При обследовании пациента врачем-стоматологом обнаружен стоматит на фоне имеющейся вирусной инфекции. Доктором выписано направление в бактериологическую лабораторию. Сделан посев на тиогликолевую среду.
Цель: Учесть результат, отметить назначение данной среды, ее состав, на основе чего можно сделать вывод о наличии патогенной микрофлоры. Выявить возможную этиологию стоматита.
Результат:
«К» «О»
Вывод:
Работа № 6. Морфологические и тинкториальные свойства условно-патогенных микроорганизмов возбудителей стоматита.
Цель: Отметить морфологические и тинкториальные свойства условно-патогенных микроорганизмов возбудителей стоматита.
Род Fusobacterium
Род Actinomyces
По Граму
Вывод:
Теоретическая справка
Кариес — это патологический процесс, при котором происходит деминерализация и размягчение твердых тканей зуба с последующим образованием дефекта в виде полости.
В настоящее время общепризнанным механизмом возникновения кариеса является прогрессирующая деминерализация твердых тканей зубов под действием органических кислот, образование которых связано с деятельностью микроорганизмов.
Основные факторы, предрасполагающие к возникновению кариеса.
В инициировании кариозного процесса принимает участие множество факторов, что позволяет считать кариес сложным и своеобразным инфекционным заболеванием с точки зрения этиологии и патогенеза.
Основными предрасполагающими к возникновению кариеса факторами являются:
- микрофлора полости рта;
- характер и режим питания, содержание фтора в воде;
- количество и качество слюноотделения;
- общее состояние организма;
- экстремальные воздействия на организм.
В настоящее время считается, что кариозный процесс может развиться при наличии:
1) микроорганизмов в полости рта;
2) избыточного количества углеводов в пище;
3) контакта углеводов и микроорганизмов с эмалью зуба.
Хорошо известно, что прием углеводов вызывает усиленное кислотообразование. Так, прием 10 г сахара ведет к возрастанию количества молочной кислоты в слюне в 10-16 раз, что обусловливает понижение рН.
При рН ниже 6,2 слюна из перенасыщенной гидроксиапатитом становится недонасыщенной, следовательно, превращается из минерализирующей в деминерализирующую (разрушающую твердые ткани зубов) жидкость. При значении рН ниже 4-5 возникает реальная опасность возникновения кариеса.
Образование органических кислот связано с постоянной ферментативной деятельностью микроорганизмов. Длительное их воздействие на ткани ведет к возникновению кариеса и часто наблюдается при плохой гигиене полости рта, когда на эмали формируется зубная бляшка, под которой создается кислая среда как результат ферментативной деятельности огромного количества микроорганизмов, способных идеально усваивать углеводы, задерживающиеся в полости рта. Таким образом, кариозная полость образуется в местах интенсивной кислотопродукции под зубной бляшкой, где рН ниже 4-5.
Сложность бактериального сообщества в зубной бляшке человека делает трудным определение единственного бактериального агента кариеса. Однако есть много данных, что стрептококки (особенно S. mutans и S. sobrinus) являются этиологическими агентами кариеса. Наиболее часто S. mutans вызывает кариес, локализующийся в фиссурах и на гладких поверхностях, где он ассоциируется c другими видами микроорганизмов:Lactobacillus,Leptotrichiaа в случае кариеса корня возможно с видамиActinomyces.
Стрептококки разлагают углеводы, вызывая закисление рН, что приводит к декальцинации эмали зубов, а также образуют из сахарозы полисахариды. Из полисахаридов образуются декстран, способствующий образованию зубных бляшек, и леван, разлагающийся в дальнейшем до кислот.
Лактобактерииспособствуют развитию кариозного процесса, образуя большое количество молочной кислоты.
Leptotrichia buccalis — строгий анаэроб, не проявляет тенденции к ветвлению и в качестве основного метаболита образует молочную кислоту. L. buccalis — центр осаждения зубного налёта и зубного камня. Доказано их участие в развитии кариеса за счёт значительного кислотообразования, причём L. buccalis является синергистом лактобацилл и участвует в процессах деминерализации тканей зуба.
Актиномицеты ферментируют углеводы с образованием кислот, способствующих повреждению эмали зубов, и проявляют умеренную протеолитическую активность. За счёт выраженной способности к адгезии они быстро колонизируют слизистую оболочку, вытесняя другие бактерии. Актиномицеты — основная группа бактерий, выделяемых в налёте зубов и зубном камне. Актиномицеты нередко выделяют из кариозных полостей, поражений слюнных желёз и пародонта. Основные возбудители — A. israelii и A. viscosus.
Стоматит (stomatitis; греч. stoma, stomatos рот + -itis - воспаление слизистой оболочки ротовой полости). Стоматит - собирательное понятие, т.к. изолированное поражение какой-то одной части слизистой оболочки обычно имеет соответствующее название: гингивит (воспаление десны), глоссит (воспаление языка), хейлит (воспаление губы), палатинит (воспаление нёба). Стоматит может развиваться как самостоятельное заболевание, так и осложнение или проявление других, таких как корь, скарлатина, грипп и пр. Наиболее подвержены заболеванию женщины, особенно во время беременности и в отдельные фазы менструального цикла и дети.