Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Овладеть методом определения бактерицидности кожи по Клемпарской

Задание. Определить бактерицидную активность собственной кожи (индекс бактерицидности). Оформить протокол в виде рисунков. Сделать заключение.

0	10

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

На поверхность кожи предплечья (ладонная сторона) наносят пипеткой 1 каплю культуры E. coli. Распределяют суспензию стерильным стеклянным шпателем. Делают первый отпечаток с кожи пластинкой со средой Эндо (0 мин экспозиции). Через 10 мин экспозиции контакта микробов и кожи делают второй отпечаток (рядом с первым, но не с того же участка). Чашки с предметными стеклами-отпечатками помещают в термостат на 24 часа. Подсчитывают количество колоний на пластинках со средой Эндо. На основании полученных результатов рассчитывают индексы бактерицидности (ИБ) по формуле:

ИБ = (К_о – К₂₀)/К_о 100%,

где К_о– количество колоний сразу после контаминации кожи;

К₁₀– количество колоний через 10 мин после контаминации кожи.

В норме ИБ > 95%.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Время исследования	Количество колоний	Индекс бактерицидности
После нанесения культуры
Через 10 минут

Вывод:(Ответить на вопросы: 1. Соответствует ли индекс бактерицидности значениям нормы? 2. Возможные причины снижения бактерицидности кожи?)

Р а б о т а №2

Цель: Овладеть методом определения активности лизоцима в слюне

Задание. Определить активность (титр) лизоцима в собственной слюне. Учесть полученные результаты и данные занести в таблицу. Оформить протокол. Сделать заключение.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

В пробирках готовят разведения слюны, начиная от 1:10 и заканчивая 1:640. В контрольную пробирку вместо слюны добавляют физиологический раствор. К каждому разведению добавляют 2-х млрд. взвесь микрококка (M. luteus) по 5 капель. Ставят в термостат на 20 мин. Определяют титр лизоцима по наличию просветления в среде (полный лизис микрококка). В норме титр лизоцима > 1:320.

Разведения слюны/ Ингредиенты	1 : 20	1 :  40	1 : 80	1 : 160	1 : 320	1 : 640	1 : 1280	Контроль
Слюна 1 : 10, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	–
Физ.раствор, мл	1,5	1,5	1,5	1,5	1,5	1,5	1,5	2,0
2-х млрд. взвесь M. luteus, капли	3	3	3	3	3	3	3	3
Инкубация 20 мин, 37°С
Результат

в дез. раствор

«+» – лизис культуры, «–» – отсутствие лизиса

Цель:

ПРОТОКОЛ

Таблица

Вывод: Ответить на вопросы: (1. Соответствует ли активность лизоцима слюны норме? 2. Возможные причины снижения активности лизоцима? 3. Почему в качестве объекта использован Micrococcus luteus? 4. Зачем поставлен контроль культуры? 5. Что такое титр лизоцима в слюне?)

занятие №4:	Цитокины. апоптоз Изучение активности гуморальных факторов врожденного иммунитета (продолжение)
УЧЕБНАЯ Цель:	1. Изучить гуморальные факторы врожденного иммунитета 2. Познакомиться с методами определения активности гуморальных факторов врожденного иммунитета. 3. Овладеть навыками определения и оценки естественной резистентности организма человека.