Вопросы для подготовки

1. Главный комплекс гистосовместимости (МНС). Генетическая структура локуса. Гены МНС I, II и III классов.

2.Строение молекул МНС I и II классов. Антигенсвязывающая щель и ее роль в иммунном ответе.

3. Методы исследования и типирования HLA (ПЦР, ДНК-гибридизация).

4. HLA и заболевания человека, механизмы.

Задания для подготовки

Заполнить таблицу «Антиген-представляющие молекулы»:

Свойства молекул	МНС I	МНС II	Другие
Клеточное распределение
Локализация в клетке
Тип эпитопа
Место и условия связывания с эпитопом

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель:Овладеть методикой проведения и оценки результатовHLA-типирования

Задание.Используя готовые демонстрации познакомиться с методикой проведенияHLA-типирования. Оформить протокол.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Суспензию лимфоцитов смешивают с антисывороткой к определенному антигену (HLA-В8,HLA-B27 и т.д.), инкубируют 1 час при 25°С, добавляют комплемент и инкубируют вновь 2 ч при 37°С, а затем добавляют трипановый синий или эозин. В случае присутствия в лимфоцитах антигена, соответствующего антителам, содержащимся в сыворотке, антитела в присутствии комплемента повреждают мембрану лейкоцитов, краска проникает в их цитоплазму и они окрашиваются в синий или же красный цвет (если используется эозин).

Протокол

Цель:

Рис. с обозначениями

Вывод:(Ответить на вопросы: 1. Какие HLA обнаружены? 2. Как получают сыворотки для HLA-типирования? 3. Как защитить содержимое лунок от высыхания в процессе постановки реакции? 4. Когда и с какой целью проводят HLA-типирование?)

занятие №7:	Т-, В-лимфоциты. Клеточный и гуморальный иммунный ответ Методы выявления маркеров и рецепторов иммунокомпетентных клеток. Определение количества Т- и В-лимфоцитов
УЧЕБНАЯ Цель:	1. Изучить механизмы клеточного и гуморального адаптивного иммунного ответа. 2. Овладеть методикой определения количества Т- и В-лимфоцитов.

Вопросы для подготовки

1.Субпопуляции Т-лимфоцитов и корецепторы. Дифференцировка субпопуляций Т-клеток.

2. Регуляторные Т-лимфоциты. Их разновидности, развитие и роль в контроле иммунного ответа.

3. Строение Т-клеточного рецептора (ТСR). Полипептидлные цепи CD3. Основные принципы внутриклеточной сигнализации – мотивы ITAM и ITIM.

4. Дифференцировка CD4+ Т-лимфоцитов в Th1- и Th2-клетки. Факторы, определяющие этот процесс. Роль цитокинов. Спектры цитокинов, вырабатываемых Th1- и Th2-клетками. Антагонизм Th1- и Th2-клеток.

5. Процессинг антигена с помощью МНС I и II. Структура комплекса антигенного пептида с молекулами МНС.

6. Особенности распознавания антигенов рецепторами Т-клеток (феномен двойного распознавания).

7. Эффекторное звено клеточного иммунного ответа. Тс, маркеры и функции.

8. Объединенная схема клеточной кооперации в процессе клеточного иммунного ответа.

9.Субпопуляции В-лимфоцитов и корецепторы. Дифференцировка субпопуляций В-клеток. Строение В-клеточного рецептора (ВСR).

10. Постановка и механизм реакции Е-РОК и ЕАС-РОК для определения количества Т- и В-лимфоцитов.

11. Проточная цитометрия. Суть метода, оборудование. Применения в иммунологии.

12. Объединенная схема клеточной кооперации в процессе гуморального иммунного ответа.

13. Иммунологическая память. Клетки памяти. Их свойства, маркеры, пути миграции, гомеостатический контроль, иммунологические функции. Преимущества вторичного иммунного ответа перед первичным.