Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Овладеть навыком определения лейкоцитарной формулы крови

Задание. Провести определение лейкоцитраной формулы своей крови. Оформить протокол в виде рисунка. Сделать заключение.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Для установления лейкоцитарной формулы крови человека или лабораторных животных необходимо правильно приготовить мазки крови, которые получают следующим образом. На середину хорошо вымытого и обезжиренного предметного стекла без царапин наносят каплю исследуемой крови величиной с «просяное зерно». Затем делают мазок при помощи другого шлифованного предметного или покровного стекла более узкого, чем основное предметное стекло. При этом узкое стекло прикладывают к основному стеклу под углом 45°. Дают капле крови растечься по краю шлифа и быстро продвигают его к противоположному концу стекла. Мазки крови должны быть равномерными и тонкими и не доходить до края предметного стекла. Мазки крови сушат на воздухе, а затем фиксируют в закрытой кювете химически чистым этиловым спиртом в течение5 минут. Зафиксированные мазки окрашивают в течение 20 минут по методике Романовского-Гимза. В основе методики лежит способность смеси основных (азур II) и кислых красителей (водорастворимый желтый эозин) окрашивать элементы клеток крови в разные цвета и оттенки. После окраски препараты крови промывают дистиллированной водой и сушат на воздухе. Плохое приготовление мазка приводит к не равномерному распределению

Лейкоцитов и дает при подсчете не правильное соотношение их отдельных популяций. В толстом мазке форменные элементы крови трудноразличимы. Подсчет лейкоцитарной формулы крови осуществляют с помощью светового микроскопа при иммерсионном увеличении объектива×90 (или при увеличении объектива×20 иокуляре×10). Начинают подсчет клеток крови с середины окрашенного мазка, передвигая предметное стекло зигзагообразно от центра к краю по всей поверхности мазка (зубчатая линия Меандра). Более крупные по величине клетки крови располагаются по краям препарата. Считают подряд все встречающиеся в поле зрения форменные элементы (всего200 клеток), распределяя их в отдельные популяции с учетом величины клеток, формы и окраски ядра и цитоплазмы. Определяют процентное содержание клеток различных популяций в исследуемом образце. Сравнивают полученную лейкоцитарную формулу анализируемой крови с представленными в табл. 2 приложения данными о количественном содержании отдельных популяций клеток в крови людей разного возраста.

Протокол

Цель:

Рис. с обозначениями	Лейкоцитарная формула

Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Соответствует ли лейкоцитарная формула норме? 2. Возможные причины отклонения от нормы?)

Справочный материал для оформления протоколов

Таблица Лейкоцитарная формула крови

Показатель	Среднее значение М±т у людей в возрасте
Лейкоциты, 109/л Лимфоциты, % Лимфоциты, 10 /л	18–25 лет 6,53±0,025 (3,23 – 9,60) 30,8±1,07 18–48 2,02±0,15 (0,85–4,19)	27–55 лет 5,60+0,21 (3,12–9,50) 29,4+1,11 17–46 1,65±0,11 0,72–4,10	60–80 лет 4,90±0,26 (2,65–8,60) 27,1±1,00 16–44 1,33+0,12 0,60–3,50
Моноциты, %	6,50±0,27 (2–10)	6,20±0,24 (2–10)	5,90±0,25 (1–10)
Нейтрофилы Палочкоядерные Сегментоядерные Эозинофилы, %	1,80+0,02 1–5 58,2+1,13 (40–72) 2,30±0,03 (1–5)	1,56±0,02 1–5 60,30+1,118 43–73 2,20±0,03 1–5	1,60±0,02 1–5 62,60±1,15 43–75 2,4+0,03 1–5
Базофилы, %	0,40±0,003 0–1	0,40+0,003 0–1	0,40±0,003 0–1
Т–лимфоциты, % Т–лимфоциты,109/л В–лимфоциты, %	63,7± 1,3 5 39–81 1,28+0,11 0,58–3,25 9,6±0,78 3–26	67,3±1,21 40–84 1,11±0,10 0,40–3,12 8,20±0,88 2–25	71,2±1,30 38–85 0,95±0Д0 0,33–2,80 8,50+0,85 2–31
В–лимфоциты, 109/л	0,19+0,10 0,3–3,5	0,14±0,01 0,02–0,98	ОД 1+0,01 0,2–0,92

занятие №2:	ФАГОЦИТОЗ. контактный киллинг Изучение активности клеточных механизмов врожденного иммунитета
УЧЕБНАЯ Цель:	1. Изучить клеточные факторы врожденного иммунитета 2. Овладеть навыками определения и оценки активности фагоцитарного звена иммунитета.