Методическое указание для студентов к практическому занятию № 27
Тема: Серодиагностика брюшного тифа, паратифов А и В. Сальмонеллы – возбудители острых гастроэнтеритов.
Цель: Освоение методов микробиологической диагностики сальмонеллезов и серологической диагностики брюшного тифа и паратифов А и В.
Модуль 2. Специальная, клиническая и экологическая микробиология.
Содержательный модуль 10. Патогенные прокариоты и эукариоты.
Тема занятия 25. Серодиагностика брюшного тифа, паратифов А и В. Сальмонеллы – возбудители острых гастроэнтеритов.
Актуальность темы:
Сальмонеллез – острая кишечная инфекция. характеризующаяся преимущественным поражением желедочно-кишечного тракта, возбудителями которой являются многочисленные бактерии рода Salmonella (кроме S. typhi, S, paratyphi A, S. schottmuelleri).
Таксономическое положение и свойства. см. в методичке 26.
Морфология и тинкториальные свойства.
Эпидемиология. Основной источник заболевания – животные, преимущественно домашние и птицы. Реже источниками заболевания являются люди – больные и носители. Механизм заражения – фекально-оральный. Основной путь передачи инфекции – пищевой. Факторами передачи могут быть не только мясо животных и птиц, инфицированное при жизни животного либо при его обработке, но и яйца. Наиболее восприимчивы к заболеванию люди со сниженным иммунным статусом (в том числе грудные дети) и больные, получающие антибиотики. Подъем заболеваемости наблюдается летом.
Патогенез. Сальмонеллы проникают в организм через рот, достигают тонкого кишечника, где и развертывается патологический процесс. Бактерии благодаря факторам адгезии прикрепляются к слизистой оболочке, проникают в ее глубокие слои, где захватываются макрофагами. Сальмонеллы размножаются и погибают с освобождением эндотоксина, который, помимо общей интоксикации, вызывает диарею и нарушение вводно-солевого обмена. Находящаяся в нормальном состоянии микрофлора кишечника в значительной мере препятствует накоплению сальмонелл. В некоторых случаях (при снижении иммунного статуса и высокой вирулентности возбудителя) возможно развитие бактериемии и поражение костей, суставов, мозговых оболочек и других органов.
Клиническая картина. Инкубационный период равен в среднем 12-24 часа. Заболевание характеризуется повышением температуры, тошнотой, рвотой, поносом, болью в животе. Как правило, продолжительность болезни составляет 7 дней. но в некоторых случаях наблюдается молниеносная токсическая форма, приводящая к смерти больного.
Иммунитет после перенесенного заболевания сохраняется менее года.
Микробиологическая диагностика. Основной материал для исследования — рвотные массы, испражнения, промывные воды желудка. Применяют бактериологический и серологический (РА, РПГА) методы диагностики.
Лечение сальмонеллеза заключается в промывании желудка, диете, введении жидкостей для нормализации вводно-солевого обмена. Антибиотики при формах средней тяжести и легких не назначают, т.к. их применение приводит к дисбактериозу и в результате более длительному течению болезни; кроме того, очень велико число антибиотикорезистентных сальмонелл.
Профилактика неспецифическая - санитарно-гигиенические мероприятия, заключающиеся, в частности, в правильной кулинарной обработке мяса и яиц.
Серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов А и В.
Для постановки диагноза применяется реакция агглютинации Видаля, основанная на обнаружении в сыворотке крови людей агглютининов, которые появляются в конце 1-й - начале 2-й недели заболевания. Особенности реакции заключаются в том, что реакция ставится одновременно с 4 разными диагностикумами (антигенами): ОН-диагностикум брюшного тифа, О-диагностикум брюшного тифа, ОН-диагностикум паратифа А и ОН-диагностикум паратифа В. Брюшнотифозные монодиагностикумы применяются для установления стадии болезни, т.к. содержание О- и Н-антител в разные ее периоды неодинаково. О-антитела накапливаются в разгвр заболевания и исчезают к моменту выздоровления. Н-антитела появляются к концу заболевания и сохраняются у переболевших в течение длительного времени.
Это помогает дифференцировать острую стадию заболевания и «прививочную» или анамнестическую реакции.
У больных брюшным тифом в сыворотке крови определяются О- и Н-антитела, а в сыворотке крови людей, перенесших брюшной тиф или вакцинированных против него, сохраняются только Н-антитела.
Для серологического исследования реконвалесцентов и выявления бактерионосителей широко используют реакцию пассивной Vi-гемагглютинации (РПГА), с помощью которой определяют Vi-антитела в сыворотке крови людей, появляющиеся только к концу заболевания, но постоянно обнаруживающиеся у носителей брюшного тифа.
Конкретные цели:
-
Ознакомиться с биологическими свойствами и классификацией представителей семейства Salmonella.
-
Описывать патогенез сальмонеллезов.
-
Изучить методы микробиологической диагностики сальмонеллезов.
-
Ознакомиться с методами серологической реакции брюшного тифа, паратифов А и В.
-
Ознакомиться с методами профилактики и специфической терапии брюшного тифа, паратифов А и В.
-
Трактовать результаты бактериологического и серологического исследования.
Уметь:
-
Проводить дифференциацию сальмонелл – возбудителей сальмонеллезов.
-
Забирать материал для исследования от больных сальмонеллезами.
-
Выделять чистые культуры сальмонелл.
-
Трактовать результаты бактериологического и серологического исследования.
Теоретические вопросы:
-
Сальмонеллы – возбудители пищевых токсикоинфекций.
-
Биологические свойства.
-
Антигенная структура, факторы патогенности.
-
Патогенез и иммуногенез заболеваний. Бактерионосительство.
-
Методы микробиологической диагностики сальмонеллезов.
-
Специфическая профилактика и лечение сальмонеллезов.
Практические задания, выполняемые на занятии:
-
Выделение чистой культуры S. typhi :
-
Изучение посевов «фекалий» больного брюшным тифом на среде Ресселя.
-
Проверка чистоты культур: приготовление мазков, окраска по Грамму, микроскопия и зарисовывание.
-
Пересев чистой культуры на среду Гиса и МПБ для выявления индола и сероводорода.
-
Постановка реакции агглютинации на стекле с диагностическими сыворотками для идентификации выделенной чистой культуры.
Микроскопия демонстрационных микропрепаратов чистых культур S. typhimurium, S. choleraesuis, S. enteritidis.
Зарисовывание демонстрационных микропрепаратов в протокол.
Оформление протокола.
Литература:
-
Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией.– Киев: Высшая школа, 1992.- 431с.
-
Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиология.- М.: Медицина, 1998.- 336с.
-
Медицинская микробиология /Под редакцией В.П. Покровского.– М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.– 768с.
-
Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, С-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.
-
Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.- 2-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1983.- 512с.
-
Конспект лекции.
Дополнительная литература:
-
Титов М.В. Инфекционные болезни.- К., 1995.– 321с.
-
Шувалова Е.П. Инфекционные болезни.– М.: Медицина, 1990.- 559с.
-
БМЭ, Т. 1,2,7.
Краткие методические указания для работы на практическом занятии.
В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.
Самостоятельная работа состоит из изучения методов микробиологической диагностики сальмонеллезов и серологической диагностики брюшного тифа, паратифов А и В. Далее студенты знакомятся с правилами забора материала от больных сальмонеллезами для бактериологического и серологического исследования. Потом продолжают выделение чистой культуры S. typhi :
-
Изучение посевов «фекалий» больного брюшным тифом на среде Ресселя.
-
Проверка чистоты культур: приготовление мазков, окраска по Грамму, микроскопия и зарисовывание.
-
Пересев чистой культуры на среду Гиса и МПБ для выявления индола и сероводорода.
-
Постановка реакции агглютинации на стекле с диагностическими сыворотками для идентификации выделенной чистой культуры.
В состав самостоятельной работы входит также микроскопия демонстрационных микропрепаратов чистых культур S. typhimurium, S. choleraesuis, S. enteritidis и зарисовывают их в протокол.
В конце занятия проводится оформление протокола, тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.