- •Методические указания для студентов к практическому занятию № 35.
- •Тема 5:Микробиологическая диагностика бордотеллиозов и клебсиеллезов.
- •Микробиологическое исследование при коклюше и паракоклюше
- •Краткие методические указания к работе на практическом занятии.
- •Технологическая карта проведения практического занятия
- •Алгоритм лабораторной работы:
- •Целевые обучающие задания:
Микробиологическое исследование при коклюше и паракоклюше
-
Мокрота, слизь из носоглотки
Сыворотка крови
-
Бактериоскопическое исследование
Бактериологическое исследование
Серодиагностика
1 этап |
|
Люминесцентная микроскопия мазков, обработанных флюо-ресцирующей иммун-ной сывороткой |
|
Посев материала методом «кашлевых пластинок» или но-соглоточными там-понами на КУА или среду Борде-Жангу |
|
Реакция агглютинации РСК |
|
|
Ответ |
|
|
|
Ответ |
|
|
|
Характер колоний |
|
Мазок, окраска по Граму |
|
2 этап |
|
|
|
Пересев на пробирки или чашки с КУА либо со средой Борде-Жангу (чистая культура) |
|
|
3 этап |
|
|
Рост на питательном агаре (пигмент) |
|
Реакция агглютинации |
|
|
|
|
|
Проба на уреазу |
|
|
|
|
|
Окончательный ответ |
|
Клебсиеллы
Бактерии получили название в честь Э. Клебса, который впервые описал микроб в 1875 г. Род Klebsiellaотносится к семействуEnterobacteriaceae, включает в себя 4 вида:K.pneumoniae,K.oxytoca,K.planticola,K.terrigena, которые отличаются по биохимическим свойствам.
Морфология и тинкториальные свойства. Клебсиеллы – не образующие спор неподвижные палочки, располагающиеся единично, парами или короткой цепочкой. Обычно они локализованы в капсуле, которая является характерным морфологическим признаком.
Культивирование. Клебсиеллы хорошо растут на простых питательных средах. На поверхности плотных питательных сред образуют куполообразные слизистые колонии. В жидких средах вызывают интенсивное помутнение.
Антигенная структура. Клебсиеллы имеют соматические О-антигены (более 10 серогрупп) и более 80 вариантов капсульных К-антигенов.
К факторам патогенности относятся: капсула полисахаридной природы, обладающая антифагоцитарной активностью; термостабильный и термолябильный энтеротоксины.
Экология и распространение. K. pneumoniae входит в состав факультативной микрофлоры кишечника, верхних дыхательных путей, влагалища; также обнаруживается на коже и слизистых оболочках. Клебсиеллы устойчивы к факторам окружающей среды благодаря наличию капсулы и могут в течение длительного времени сохраняться в почве, воде, помещениях. Клебсиеллы погибают при температуре 650С через 60 мин, в растворах обычных дезинфицирующих веществ.
Патогенез и заболевание у человека. K. pneumoniae или палочка Фридлендера является возбудителем неспецифических инфекций дыхательных путей (бронхитов, пневмоний), органов мочевыводящей системы, пищевой токсикоинфекции. Этот микроб может также вызывать гнойные послеродовые осложнения, неонатальную инфекцию, которая проявляется в виде пневмоний у новорожденных, кишечной инфекции и токсико-септических состояний, заканчивающихся летальным исходом. Кроме того, клебсиеллы пневмонии могут вызывать менингит, сепсис, цистит и другие заболевания. Нередко штаммы клебсиелл являются возбудителями внутрибольничных инфекций.
K. ozaenae вызывает поражение слизистой оболочки носа и придаточных пазух, сопровождающееся выделением зловонного секрета.
K. oxytoca вызывает ВБИ в урологической клинике.
Клебсиеллы риносклеромы (K. rhinoscleromatis) – поражают слизистую оболочку носоглотки, гортани, трахеи, бронхов. В тканях образуются гранулемы с последующим рубцеванием. Болезнь протекает хронически. Возможны летальные исходы.
Иммунитет. Гуморальный иммунный ответ защитной активностью не обладает. В защите от инфекции главная роль принадлежит фагоцитозу, опсонизированному специфическими антителами клебсиелл.
Микробиологическая диагностика. Применяется бактериологический метод исследования, который предусматривает выделение чистой культуры возбудителя из мокроты, мочи, испражнений, крови, гноя, в зависимости от локализации процесса, путем посева исследуемого материала на лактозосодержащие дифференциальные питательные среды с последующим выделением чистой культуры возбудителя и его идентификации до вида и подвида. Идентификацию клебсиелл проводят по морфологическим, культуральным, биохимическим и серологическим признакам в РСК с сыворотками больных.
Профилактика и лечение. Средств специфической профилактики не существует. Профилактика осуществляется путем раннего выявления больных, изоляции их от здоровых людей. Для лечения используют клебсиеллезный бактериофаг и антибиотики широкого спектра действия, чему предшествует определение антибиотикограммы.
Конкретные цели:
Выучить дифференциацию возбудителя коклюша и паракоклюша по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам.
Выучить морфологию, культуральные, биохимические свойства клебсиелл.
Выучить источники, пути передачи и некоторые клинические проявление бордотеллиозов и клебсиеллезов.
Изучить методы микробиологической диагностики.
Трактовать результаты микроскопического исследования.
Ознакомиться с методами профилактики и специфической терапии.
Уметь:
Забирать материал для исследования от больных
методом кашлевых пластинок
тампоном
Выделить чистую культуру
Трактовать результаты микроскопического исследования
Теоретические вопросы:
1. Возбудитель.
Свойства. Резистентность.
Патогенность для человека и животных. Факторы патогенности, токсины.
Патогенез заболевания у людей, иммунитет.
Микробиологическая диагностика.
Специфическая профилактика и лечение
Практические задания, которые выполняются на занятии:
Микроскопия демонстрационных препаратов.
Изучение коллекции питательных сред.
Изучение биопрепаратов дл лабораторной диагностики и специфической профилактики коклюша.
Зарисовывание демонстрационных микропрепаратов в протокол.
Разбор схемы лабораторной диагностики коклюша и клебсиеллезной инфекции.
Оформление протокола.
Литература:
1. Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, иммунология и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, Санкт-Петербург «Специальная литература», 1998. - 592с.
2. Тимаков В.Д., ЛевашевВ.С., Борисов Л.Б. Микробиология / Учебник.-2-е изд., перераб. и доп.- М.:Медицина, 1983,-512с.
3. Пяткин К.Д. Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией. - Киев: Вища школа, 1992. - 431с.
4. Медицинская микробиология / Под редакцией В.И. Покровского. -М.:ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.
5. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, иммунологии и вирусологии. Под ред. М.П. Зыкова. М. «Медицина». – 1977. – 288 с.
6. Черкес Ф.К., Богоявленская Л.Б., Бельскан Н.А. Микробиология. /Под ред. Ф.К. Черкес. – М.: Медицина, 1986. – 512 с.
7. Конспект лекции.
Дополнительная литература:
1. Макияров К.А. Микробиология, вирусология и иммунология. Алма-Ата, «Казахстан», 1974. – 372 с.
2. Тiтов М.В. Iнфекцiйнi хвороби. - К., 1995. – 321с.
3. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни. - М.: Медицина, 1990. - 559 с.
4. БМЭ, Т. 1, 2, 7.
5. Павлович С.А. Медицинская микробиология в графах: Учеб. пособие для мед. ин-тов. – Мн.: Выш. шк., 1986. – 255 с.