Тема 10 Обнаружение запасных сахаров в растительном материале

Цель:

- ознакомить с методом определения запасных сахаров в растительном материале

План:

1 Обнаружение редуцирующих сахаров

2 Обнаружение не редуцирующих сахаров

Методические рекомендации по подготовке к занятию

Все моносахара, а также дисахариды типа мальтозы благодаря присутствию альдегидной или кетонной группы яв­ляются редуцирующими,

т. е. обладают восстанавливающи­ми свойствами. Распространенная в растениях сахароза — редуцирующее вещество, так как ее молекула состоит из остатков глюкозы и фруктозы, соединенных за счет альде­гидной группы глюкозы и кетонной группы фруктозы.

Характерная реакция на редуцирующие сахара — реак­ция восстановления фелинговой жидкости. Эту жидкость го­товят непосредственно перед употреблением путем смешива­ния равных объемов раствора медного купороса и раствора Щелочи с сегнетовой солью. Последнюю прибавляют для то­го, чтобы не дать образовавшемуся гидрату оксида меди (II) выпасть в осадок:

CuSO₄ + 2КОН = K₂SO₄ + Cu (OH)₂

COOK COOK

| |

CHОH CHО \

| + Cu (OH)_{2 |} Cu + 2H₂О

CHОH CHО /

| |

CООNa CООNa

Для обнаружения редуцирующих сахаров, т. е. сахаров с альдегидной или кетонной группой, к исследуемому раст­вору приливают фелингову жидкость в равном объеме и до­водят до кипения. При этом СuО восстанавливается с обра­зованием кирпично-красного осадка Сu₂О.

Для обнаружения сахарозы сна чала необходимо поверить путь ее гидролизу на глюкозу и фруктозу и лишь затем провести реакцию с жидкостью Фелинга. По количеству осадка Си2О можно судить о количестве редуцирующих ве­ществ, как содержавшихся в .исходном материале, так и об­разовавшихся в результате гидролиза сахарозы.

Ход работы. Перед тем как приступить к анализу рас­тительного материала, следует приготовить. фелингову кость и проделать следующие качественные реакции:

1)поместить в пробирку щепотку глюкозы, растворить в небольшом количестве воды, прилить равный объем фелинговой жидкости и нагреть до кипения;

2) растворить в воде щепотку сахарозы, добавить рав­ный объем фелинговой жидкости и довести до кипения;

3) приготовить в пробирке раствор сахарозы, добавить 2—3 капли 20%-ной НО и кипятить в течение 1 мин; ней­трализовать кислоту содой (сыпать до прекращения выде­ления СО₂, прилить равный объем фелинговой жидкости и вновь довести до кипения.

Отметить, образуется ли в пробирках кирпично-красный осадок, и сделать выводы о причинах наблюдаемых явлений.

Анализ растительного материала. Нарезать на мелкие кусочки луковицу лука, корнеплоды моркови и сахарной свеклы. Поместить материал в отдельные пробирки (при­мерно по V* пробирки), залить небольшим количеством во­ды и нагревать не менее 5 мин в кипящей водяной бане. По­лученную вытяжку профильтровать и перенести с помощью пипетки одинаковые порции фильтрата в две чистые пробирки. С одной порцией проделать реакцию на редуцирую­щие сахара, с другой — провести гидролиз сахарозы соляной кислотой; после нейтрализации кислоты прилить фелингову жидкость в равном объеме и вновь нагреть до 100° С.

Полученные результаты записать в таблицу, оценивая количество Cu₂О по пятибалльной шкале.

Объект	Количество Cu2О
	Без гидролиза	После гидролиза

Сделать выводы о присутствии в исследованном мате­риале редуцирующих сахаров и сахарозы.

Оборудование: свежий или высушенный расти­тельный материал (лук, морковь, сахарная свекла; глюкоза; са­хароза, 4%-пый раствор CuSO₄; щелочной раствор сегнетовой со­ли (200 г сегнетовой соли и 150 г КОН или NaOH в I л воды); 20%-ная НС1 в капельнице; Na₂CO₃ порошкообразный; тарел­ки (3 шт.); скальпели (3 шт.); штатив с пробирками с резино­выми колечками (15 шт.); водяная баня; спиртовка; мерный цилиндр на 100—200 мл; колба для фелингозой жидкости; пи­петки на 2—3 мл, держалка для пробирок; воронки (3 шт.); бумажные фильтры; стакан химический; спички.

Литература: 6, с.6-8

Контрольные вопросы:

1 Из каких остатков состоит молекула сахарозы в растениях?

2 Какова реакция Фелинга на сахарозу?