Тема 1 Микроскопическая техника
Цель:
- ознакомить с устройством микроскопа, рисовального аппарата и особенностями работы с ними
План:
1 Работа с микроскопом
2 Работа с рисовальным аппаратом
3 Измерение микроскопических объектов
Методические рекомендации по подготовке к занятию
1 Микроскоп - оптический прибор, позволяющий получить сильное увеличение рассматриваемого объекта. Это достигается сочетанием 2-х линз: объектива, дающего непосредственное, первичное увеличение, и окуляра, с помощью которого рассматривается в увеличенном виде изображение, даваемое объективом. При этом изображение в микроскопе получается обратным.
В оптическом микроскопе различают следующие части:
1.Подставка - придает микроскопу устойчивость
2.Штатив - на нем крепятся все части микроскопа
3.Тубус - несет оптические линзы -сверху окуляр, снизу объективы 4.Макровинт -служит для грубого передвижения тубуса и нахождения изображения на рассматриваемом гистопрепарате
5.Микровинт - служит для тонкого передвижения тубуса и установления резкости, изображения
6.Револьвер - вращающееся приспособление, соединенное с нижним . концом тубуса. В него ввинчены несколько объективов с разным увеличением. Вращение револьвера позволяет быстро менять объективы во время работы.
7.Предметный столик - служит для помещения гистопрепарата.
8. Конденсор - служит для регулирования освещения объекта.
9. Диафрагма - служит для концентрации световых лучей на объекте. 10.Зеркало - направляет свет через отверстие предметного столика на объект. Одна поверхность зеркала плоская, другая -вогнутая. При дневном свете используют вогнутую поверхность зеркала, а при специальных осветителях -плоскую поверхность зеркала
11.0куляр - расположен в верхней части тубуса и служит для растягивания изображения, даваемого объективам. Наиболее употребительны окуляры с 7- 10- 15 -кратным увеличением
12.Объективы - это различно скомбинированные системы линз, дающие увеличение от 8 до 90 раз.
Увеличение рассматриваемого объекта определяется произведением увеличения, даваемого объективом, на увеличение, даваемое окуляром.
Литература : 8, с.185-188
Контрольные вопросы:
1 Назовите детали оптического микроскопа и какую роль они выполняют
2 Расскажите о последовательности работы с оптическим микроскопом
3 Как можно узнать увеличение объекта?
4 На каком расстоянии от изучаемого объекта должен находиться малый и большой объективы?
5 Какую сторону зеркала используют для нахождения света в различных условиях работы?
Тема 2 Измерение микроскопических объектов
Цель:
- ознакомить с устройством микроскопа, рисовального аппарата и особенностями работы с ними
План:
1 Работа с микроскопом
2 Измерение микроскопических объектов
Методические рекомендации по подготовке к занятию
Измерение микроскопических объектов (пыльцевых зерен, хромосом, тетрад микроспор и т. д.) производят с помощью специальных линеек— окуляр-микрометра и объект-микрометра. Шкала окуляр-микрометра имеет длину 0,5 или 0,1 см и разделена соответственно на 50 или 100 частей. Окуляр-микрометр либо вставляют в окуляр, либо он бывает вмонтирован в специальный измерительный окуляр. Вращая окуляр,. подводят измеряемый объект под шкалу окуляр-микрометра и производят измерение объекта. Однако цена деления окуляр-микрометра бывает разной в зависимости от того, с каким объективом мы рассматриваем объект. Для того чтобы определить цену деления окуляр-микрометра при различных объективах и окулярах, пользуются специальной линейкой — так называемым объект-микрометром. Объект-микрометр вмонтирован в металлическую оправу. Шкала его имеет длину 1 мм и разделена на 100 частей. Одно деление шкалы объект-микрометра равно 10
Для проведения измерений и подсчетов необходима: объект-микрометр, окуляр-микрометр и препаратоводитель на столике микроскопа.
Объект-макрометр представляет собой металлическую или стеклянную пластинку в форме предметного стекла (рис.1). На этой пластинке обозначен круг, в центре которого имеется шкала. Величина всей шкалы составляет I мм. Она разделена на 100 частей (рис.2). Интервалы между делениями обычно равны 0,01 мм, т.е. 10 микрометрам (сокращенное обозначение мкм) - это цена одного деления объект-макрометра. Эта величина всегда обозначена в виде маркировки на объект-макрометре. Объект-микрометр нужен для определения цены деления окуляр-микрометра, для определения масштаба изображения на микрофотографиях и рисунках и для определения увеличения микроскопов со сложными оптическими системами.
Рис.1. Объект-микрометр
Окуляр-микрометр представляет собой тонкую круглую стеклянную (отдельную или вмонтированную в окуляр) пластинку, с нанесенной на ней линейной шкалой (рис.3.) Длина всей шкалы может равняться 5 мм. Она разделена на 50 частей, по.0,1 мм каждая, или же на 100 частей - по 0,05 мм каждая. Бывает шкала окуляр-микрометра длиной в 10 мм. Она разделена на 100 частей, по 0,1 мм каждая. Окуляр-микрометр вставляется между линзами окуляра. Такой окуляр-микрометр служит для линейных измерений.
Рис.2. Шкала объект-микрометра величиной в 10 мм, разделенная
на 100 частей
Рис.3. Линейный окуляр-микрометр со шкалой в 10 мм, разделенной на 100 частей
Для измерений плоскостей и для подсчета числа клеток в определенной площади используется сетчатый окуляр-микрометр. В нем на стеклянной пластинке нанесен квадрат. Длина сторон квадрата 10 мм. Каждая сторона квадрата разделена на 20 частей. В результате пересечения горизонтальных и вертикальных линий образуется сеточка, с интервалами между делениями 0,5 мм.
Величина стороны квадрата равна 10 мм и разделена на 20 частей Для измерения больших объектов и для повышения точности измерений используется винтовой окуляр-микрометр. Отсчетный механизм его состоит из шкалы (от 0 до 8 мм) с интервалами между делениями в I мм, нанесенной на неподвижной стеклянной пластинке, и сетки в виде двух рисок с перекрестием, нанесенной на подвижной стеклянной пластинке, а также микрометренного винта с отсчетным барабаном. Обе пластинки расположены в фокальной плоскости окуляра. Подвижная пластинка с рисками и перекрестием связана с микрометренным винтом так, что при его вращении перекрестие и риски перемещаются в поле зрения окуляра относительно неподвижной шкалы. Шаг винта равен I мм. Таким образом, при повороте барабана винта на один полный оборот, риски и перекрестие в поле зрения окуляра переместятся на одно деление шкалы. Следовательно, неподвижная шкала в поле зрения служит для отсчета полных оборотов барабана винта, т.е. для отсчета полных миллиметров, на которые перемещается перекрестие и риски окуляр-микрометра. Барабан винта разделен на 100 частей. При шаге винта в I мм поворот барабана на одно деление соответствует перемещению перекрестия и рисок на 0,01 мм. Таким образом, шкала барабана служит для отсчета сотых долей миллиметра.
Полный отсчет по шкалам окуляр-микрометра складывается из отсчета по неподвижной шкале и отсчета по барабану винта. Отсчет по неподвижной шкале в поле зрения' определяется положением перекрестия и рисок, т.е. подсчитывается, на сколько полных делений шкалы они переместились, считая от нулевого деления шкалы. При отсчете по барабану микрометренного винта, определяют, какое деление шкалы барабана приходится против индекса, расположенного на подвижной части винта- Пределы измерения винтовым окуляр-микрометром - от 0 до 8 мм.
Линейное измерение объектов. Величина объектов измеряется единицами длины микрометрами (мкм), которые раньше назывались микронами.
Изображение объектов под микроскопом измеряется окуляр-микрометром в делениях его шкалы. Поворотом окуляра, в который вложен окуляр-микрометр, и перемещением препаратоводителя на столике микроскопа, совмещают шкалу окуляр-микрометра с измеряемым объектом по направлению измерения. Определяют сколько делений окуляр-микрометра приходится на длину (ширину) объекта. При работе с винтовым окуляр-микрометром, наблюдая в окуляр и вращая барабан по часовой стрелке, подводят центр перекрестия до совмещения с краем измеряемого объекта и делают первый отсчет по шкалам окуляр-микрометра по положению рисок.
Литература : 8, с.185-188
Контрольные вопросы:
1 Назовите детали оптического микроскопа и какую роль они выполняют
2 Расскажите о последовательности работы с оптическим микроскопом
3 Как можно узнать увеличение объекта?
4 На каком расстоянии от изучаемого объекта должен находиться малый и большой объективы?
5 Какую сторону зеркала используют для нахождения света в различных условиях работы?