Тема 3 Клетка и ее органоиды в световом и электронном микроскопе (клетка животных)

Цель:

- ознакомить с клеткой и ее органоидами в световом и электронном микроскопе

План:

1 Работа с микроскопом

2 Изучение органоидов летки

Методические рекомендации по подготовке к занятию

Для первого ознакомления с клетками животных вы­бирают в качестве объекта хвостатых амфибий, имеющих среди позвоночных самые крупные клеточные элементы. Препарат представляет собой поперечный разрез доли пе­чени, имеющей вид полоски.

При слабом увеличении на периферии среза виден лимфоидный слой с густо расположенными ядрами. Здесь у амфибий образуются лейкоциты; подобные же скопления лейкоцитов попадаются и в центральных частях среза. Остальная масса органа образована печеночными клет­ками — гепатоцитами, располагающимися вокруг крове­носных сосудов; разрезы этих сосудов, частью пустые, частью заполненные кровяными клетками, легко заметить и при слабом увеличении. Между гепатоцитами видны темные пигментные клетки.

Ядра гепатоцитов, как обычно в многогранных клет­ках, имеют округлую форму. Величина их зависит от раз­реза: ядра, разрезанные ближе к экватору, крупнее, а раз­резанные ближе к полюсу — мельче. Изредка встречаются двухядерные клетки. В некоторых клетках ядер не видно, так как разрез клетки прошел мимо ядра.

Лейкоциты, расположенные в лимфоидном слое и в виде скоплений между гепатоцитамй, а иногда и в просвете сосудов, имеют округлую форму; ядра лейкоцитов очень разнообразны по форме: бобовидные, лопастные, кольце­видные или разделены на сегменты, связанные тонкими перемычками.

Митохондрии представляют собой клеточный органоид, в состав которого входит комплекс липоидно-белковых ве­ществ. При обычных фиксациях этот комплекс не сохраня­ется, а потому на обычных препаратах митохондрии не видны (изредка они сохраняются при формалиновой фиксации). Для их сохранения употребляются фиксаторы, в состав которых входит осмиевая кислота, фиксирующая липоиды и переводящая их в такое состояние, при котором они со­храняются во время дальнейшей обработки. Для окраски митохондрий существует ряд методов, из которых наиболее простым и надежным является окраска железным гематок­силином по Гейденгайну

Пластинчатый аппарат еще более, чем митохондрии, нуждается в специальных методах выявления, так как липоидно-белковый комплекс, образуемый этим аппаратом, значительно лабильнее, чем у митохондрий. Существует два метода выявления аппарата для световой микроскопии:серебрение и продолжительное осмирование. В обоих ме­тодах препараты не нуждаются в последующем окрашивании. Элементы препарата чернятся и выделяются на более свет­лом фоне.

При слабом увеличении видно, что железистые клетки поджелудочной железы имеют приблизительно конусовид­ную форму. Секрет (продукт, подлежащий выделению) скопляется в апикальной (верхушечной) части клетки. Ближе к базальной части располагается ядро. Нужно выбрать группу удачно разрезанных секреторных клеток (желательно, чтобы разрез проходил вдоль конуса) и при сильном увеличении проверить степень выявления в клет­ках аппарата.

Центросома представляет собой органоид, для выявле­ния которого не существует специальных методов. Лучше он обнаруживается на препаратах, фиксированных сулемо­выми смесями, и при окраске железным гематоксилином. Однако нужно иметь в виду, что и при указанных методах центросома видна далеко не постоянно, так что этот органоид принадлежит к числу трудновыявляемых стру­ктур.

Литература 6, с 27-35

Контрольные вопросы:

1 Какие компоненты клетки можно рассмотреть в оптический микроскоп?

2 Какие органеллы составляют структуру клетки?