Сравнительная характеристика вирусных гепатитов
|
Гепатиты |
А (HAV) |
B (HBV) |
С (НСV) |
D (HDV) |
Е (НЕV) |
G (HGV) |
|
Таксономия возбудителя |
Сем. Picornaviridae Род. Hepatovirus |
Сем. Hepadnaviridae Род. Ortohepadnavirus |
Род. Hepacivirus |
|
Сем. Hepeviridae Род. Hepavirus |
неклассифицирован, |
|
Морфология (форма, размер, наличие суперкапсида) |
простой вирус, капсид икосаэдр 25-30 нм |
сложный вирус сферической и палочковидной формы 42 нм |
сложный вирус сферической формы 55-65 нм |
сложный вирус сферической формы 35-40 нм. |
простой вирус икосаэдр 27-34нм |
сложный вирус сферической формы 60 нм |
|
Геном |
+ РHK, линейная, нефрагментированная |
ДНК кольцевая, двунитевая с однонитевым участком |
+ РHK, линейная, нефрагментированная |
- РHK, кольцевая |
+ РHK, линейная, нефрагментированная |
+ РHK, линейная, нефрагментрованная |
|
Пути передачи |
Фекально-оральный |
парентеральный, половой, вертикальный |
Парентеральный |
Парентеральный |
Фекально-оральный |
Парентеральный |
|
Инкубацион-ный период |
14-45 дней |
2- 6 месяцев |
14 дней - 3 месяца |
2 - 6 месяцев |
14-45 дней |
14 дней - 6 месяцев |
|
Клинические проявления |
Острые гепатиты |
Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак |
Часто хронический гепатит, цирроз, часто рак |
Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак |
Острые гепатиты, тяжело протекают у беременных |
Часто хронический гепатит |
|
Специфическая профилактика |
Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет, ревакцинация через 4 года |
Рекомбинантная, плановая с 1996 года. 12час, 1месяц,3 месяца ревакцинация через 5 лет |
Нет |
Вакцина против гепатита В из-за общности поверхностного HBsAg |
Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет. |
Нет |
|
Исследуемый материал |
сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты. |
сыворотка крови, биоптаты печени |
сыворотка крови, биоптаты печени |
сыворотка крови, биоптаты печени |
сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты |
сыворотка крови, биоптаты печени |
|
Маркеры |
HAV РНК, HAV Ag, anti-HAV IgM, IgG |
HBV ДНК, HBsAg, HBeAg, anti-HBsAg, anti-HBeAg, anti-HBc IgM, IgG |
HCV РНК, anti-HCV IgM, anti-HCV IgG |
HDV РНК, HDAg, anti-HDV IgM, IgG |
HEV PНК, HEV Ag, anti-HEV IgM, IgG, |
HGV РНК, anti-HGV |
|
Экспресс-диагностика |
1) ПЦР - РНК вируса (HAVRNA) выявляют в сыворотке крови, фекалиях, воде и пищевых продуктах. 2) ИФА - антиген вируса (HAVAg) выявляют в экстрактах фекалий; 3) Иммунная электрон-ная микроскопия (ИЭМ). |
1) ПЦР, метод молекулярной гибридизации - ДНК вируса (HBV DNA) в крови, биоптатах печени. 2) ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют антигены вируса : поверхностный антиген (HВsAg), “антиген инфекционности” (HВеAg); |
ПЦР, метод молекулярной гибридизации в сыворотке крови - РНК вируса (HCV RNA) 2) |
1) ПЦР, и метод молекулярной гибридизации - РНК вируса (HDV RNA) ; 2) ИФА, РИА, иммуноблотинг - антиген вируса (HDV Ag) .
|
1) ПЦР обнаружение РНК вируса (HEV RNA) в сыворотке крови, испражнениях 2) ИФА - антиген вируса (HЕVAg), |
ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR) обнаружение РНК вируса (HGV RNA) ; |
|
Вирусологичес-кие методы |
Заражение клеточных культур, обезьян (шимпанзе) только для научных и производственных целей, в диагностике не применяют |
Заражение обезьян (шимпанзе) только для научных целей, в диагностике не применяют |
Нет |
Нет |
Нет |
Нет |
|
Серологическаядиагностика |
ИФА, РИА в сыворотке крови выявляют Ig M-антитела (анти-HAV Ig M) и Ig G-антитела (анти-HAV Ig G). |
ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют противовирусные антитела: антитела к поверхностному антигену (анти-HВsAg); антитела к сердцевинному антигену (анти-HВсAg IgM, IgG; антитела к “антигену инфекционности” (анти-HВеAg); |
ИФА, в сыворотке антитела к вирусу (анти-HCV IgM, анти-HCV IgG) В донорской крови 1) ИФА с раздельным определением антител к различным белкам вируса, 2) иммуноблоттинг с рекомбинантными антигенами к белкам капсида (С22) и функциональным белкам (NS3-NS5) для выявления антител. |
ИФА в сыворотке крови - антитела к вирусу (анти-HDV IgM, анти-HDV IgG).
|
ИФА в сыворотке крови - антитела к вирусу (анти-HЕV IgM, анти-HЕV IgG |
ИФА в сыворотке крови - антитела против вирусного белка Е2 (анти-HGV Е2)
|
Сем.
Flaviviridae
Неклассифицирован,
вирус-сателлит
(вироид) HBV
Сем.
Flaviviridae
Иммуноблоттинг (син. вестернблоттинг) — высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их (блоттинг - от англ. blot, пятно) из геля на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Полоски с “блотами” антигенов выпускаются различными фирмами. 1. На эти полоски наносят сыворотку больного. 2. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. 3. Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.
Иммуноферментный анализ, или метод (ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител
Иммунная электронная микроскопия – электронная микроскопия чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов образуется “венчик“ из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой или другими электроннооптически плотными препаратами хорошо видимый в электронном микроскопе.
Радиоиммунный анализ (РИА), — высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген — антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14С, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение): интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) основана на амплификации, т. е . увеличении количества копий специфического (маркерного) гена возбудителя . Для этого двунитевую ДНК, выделенную из исследуемого материал а, денатурируют ( «расплетают» при нагревании) и достраивают (при охлаждении) к расплетенным нитям ДНК новые комплементарные нити . В результате из одного гена образуются два. Этот процесс копирования генов многократно по вторяется при заданных температурных режимах . Достраивание новых комплементарных нитей ДНК происходит при добавлении к искомым генам прай меров (затравки из коротких однонитевых ДНК, комплементарных 3'- концам ДНК искомого гена), ДНК - полимеразы и нуклеотидов. Для амплификации РНК вирусов применяют ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR).
Молекулярная гибридизация НК — метод, позволяющий идентифицировать геном вируса по гибридизации вирусной НК комплементарными молекулами НК мечеными ферментами или изотопами. Для этого меченую НК наносят на биоптаты тканей и регистрируют взаимодействие с комплементарной НК виркуса.