5) Определение цветового показателя крови

Цветовой показатель (ЦП) отражает насыщенность эритроцитов гемоглобином.

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику и рассчитать ЦП крови.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: данные количества эритроцитов и содержания гемоглобина в крови.

Х о д р а б о т ы

У испытуемого определяют количество эритроцитов и гемоглобина в крови. Расчет цветового показателя производят по формуле:

Hb г/л х 3

ЦП = —————— где:

А

А - число эритроцитов в 1 мкл (первые три цифры).

ЦП можно определить по номограмме. Сравнить его с нормой.

6) Подсчет количества лейкоцитов

Лейкоциты представляют собой клеточные элементы, непосредственно участвующие в иммунозащитных реакциях. Они в отличие от эритроцитов содержат ядра и обладают способностью выходить из кровеносного русла и самостоятельно передвигаться.

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику и определить количество лейкоцитов в исследуемой крови.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: микроскоп, счетная камера Горяева, меланжер для подсчета лейкоцитов , 5 % раствор уксусной кислоты с метиленовой синью, покровные стекла, регулируемая пипетка, пробирки, вата, спирт, йод, эфир, стерильный скарификатор. Объект исследования - человек.

Х о д р а б о т ы

Камеру Горяева предварительно подготовить путем притирания покровного стеклышка к боковым выступающим граням камеры до появления цветных (ньютоновских) колец. В каплю свежей крови погрузить кончик меланжера (смесителя) для лейкоцитов с белой бусинкой в расширении (см. рис.1) и набрать кровь до метки 0,5 без пузырьков и быстро, пока кровь не свернулась, перенести кончик меланжера в раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Раствор уксусной кислоты набрать до метки 11, при этом кровь разводится в 20 раз. После этого взять заполненный меланжер, зажать его концы 1 и 3 пальцами, и в течении 1 мин его встряхивать. После тщательного перемешивания крови, удалив предварительно 1-2 капли, нанести небольшую капельку на сетку камеры.Если капля слишком велика, то жидкость может попасть на боковые грани камеры и высота слоя над сеткой будет больше 0,1 мм, дальнейшие расчеты будут ошибочны. В этом случае камеру следует промыть дистиллированной водой, насухо вытереть и заполнить снова. Разведенную в меланжере кровь следует еще раз перемешать.

При необходимости разведение такой степени может быть выполнено другим способом, например, смешиванием 0,1 мл крови с 2,0 мл 5 % уксусной кислоты в пробирке. Содержимое пробирки в этом случае следует тщательно перемешать.

Заполнив камеру, поместить ее под микроскоп и приступить к подсчету. Лейкоциты удобнее считать при малом увеличении. Подсчет производить в 25 больших квадратах, что составляет 400 маленьких квадратиков. При подсчете пользоваться правилом Егорова:

лейкоциты, лежащие на правой и нижней границах (линиях) данного квадрата не учитываются.

Формула для вычисления количества лейкоцитов в 1 мм³ крови:

В х 4000 х 20

N = —————— где:

400

N - искомое число лейкоцитов;

В - число лейкоцитов в 25 больших (400 малых) квадратах;

4000 - множитель для получения содержания лейкоцитов в 1 мкл крови;

400 - число маленьких квадратиков в 25 больших квадратах;

20 - степень разведения крови.

Для перевода количества лейкоцитов в единицы СИ, полученную величину умножить на 10⁶ и выразить в N х 10⁹ (гига на литр).

Сравнить найденное количество лейкоцитов в крови испытуемого с нормой.