- •1. Современные принципы классификации и таксономии вирусов
- •2. Структура, свойства и особенности вирусов. Понятие о вирионе и вириоиде.
- •4. Репродукция вирусов. Особенности рнКсодерж и днКсодерж.
- •5. Методы культивирования, индикации и идентификации.
- •6. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций
- •7. Ортомиксовирусы. Классификацич и характеристика семейства. Структура вириона
- •8. Антигенная структура, серотипы, антигенная изменчивость. Особенности различных серотипов
- •9. Патогенез гриппа. Иммунитет.
- •10. Лабораторная диагностика, лечение и профилактика гриппа
- •11.Парамиксовирусы. Классификация и характеристика семейства. Структура вириона
- •12.Вирусы парагриппа, свойства, роль в патологии человека. Патогенез иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика и лечение.
- •13. Вирус эпидемического паротита, св-ва, патогенез, иммунитет, лаб. Диагностика, профилактика, лечение паротита.
- •14. Пневмовирусы(рсв): св-ва, роль в патологии, лаб. Диагностика рсв-инфекций
- •15. Морбиливирусы: вирус кори, св-ва, патогенез, лаб.Диагностика, профилактика, лечение кори
- •16. Пикорнавирусы: классификация и общая хар-ка семейства, роль в патологии человека.
- •17. Вирусы полиомиелита: свойства, патогенез, иммунитет.
- •18. Лабораторная диагностика, профилактика, лечение полиомиелита.
- •19. Вирусы Коксаки и echo свойства, роль в патологии человека, лабораторная диагностика, профилактика, лечение.
- •20. Ротавирусы: структура и свойства. Патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика ротавирусного гастроэнтерита.
- •21. Аденовирусы: классификация и характеристика семейства. Аденовирусы человека, структура вириона, патогенез, иммунитет, диагностика аденовирусных инфекций.
- •22 Рабдовирусы: классификация, структура вириона, патогенез бешенства, иммунитет
- •23 Лабораторная диагностика, специфическая профилактика бешенства
- •24 Герпесвирусы: классификация семейства, структура вириона
- •25. Герпесвирусы 1 и 2 типа (впг 1, 2)
- •26. Вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая
- •27. Цитомегаловирус (цмв) Подсеем. Betaherpesvirinae
- •29.Арбовирусы: классификация и свойства тога-, флавивирусов, роль в патологии человека. Патогенез, иммунитет, методы лабораторной диагностики клещевого энцефалита.
- •30.Вирус краснухи: классификация, структура вириона, роль в патологии человека. Лабораторная диагностика, профилактика краснухи.
- •31. Вирус гепатита а.
- •32. Вирус гепатита b.
- •33. Вирус гепатита d.
- •34. Вирус гепатита с.
- •35. Сем-во ретровирусов (retroviridae)
- •36.Патогенез вич-инфекции. Спид-ассоциациированные заболевания
- •37. Лабораторная диагностика и профилактика вич-инфекции.
5. Методы культивирования, индикации и идентификации.
Для культивирования вирусов используют лабораторных животных, развивающиеся куриные эмбрионы, культуры клеток.
Лабораторных животных разными способами заражают (учитывают тропизм вирусов: ортомиксовирусами заражают интраназально, нейровирусами – субдурально). На основании типичных признаков заболевания и патоморфологических изменений органов животных можно судить о репродукции вирусов, т.е. проводить индикацию вирусов.
Куриный эмбрион является удобной моделью для культивирования вирусов, т.к. полости его стерильны, защищены твердой оболочкой. Индикацию вируса в курином эмбрионе проводят: по гибели эмбриона; помутнению хорион-аллантоисной оболочки; образованию бляшек на оболочке; в реакции гемагглютинации
Метод культур клеток. Для приготовления культур клеток используют различные ткани человека и животных. Чаще применяют культуры клеток из эмбриональных (куриные фибробласты, человеческие фибробласты) и опухолевых (злокачественно перерожденных) тканей, обладающих активной способностью к росту и размножению.
Различают три типа культур клеток: однослойные культуры клеток; культуры суспензированных клеток; органные культуры.
Однослойные культуры клеток по числу жизнеспособных генераций разделяют на первичные или первично трипсинизированные (куриные фибробласты, человеческие фибробласты); перевиваемые (способны размножаться в лабораторных условиях длительное время); полуперевиваемые (способны размножаться в течение 40-50 пассажей).
Для культивирования клеток необходимы питательные среды, которые по своему назначению делятся на ростовые и поддерживающие. В ростовых питательных сред должно содержаться больше питательных веществ, чтобы обеспечить активное размножение клеток. Поддерживающие среды должны обеспечивать переживание клеток в уже сформированном монослое при размножении в клетке вирусов.
Широкое применение находят стандартные синтетические среды, например, синтетическая среда 199 и среда Игла. Независимо от назначения все питательные среды для культур клеток конструируются на основе сбалансированного солевого раствора. Чаще всего им является раствор Хенкса. Неотъемлемый компонент большинства ростовых сред – наличие 5-10 % сыворотки крови животных (телячьей, бычей, лошадиной), без наличия которой размножение клеток и формирование монослоя не происходит. В состав поддерживающих сред сыворотка не входит.
Некоторые вирусы размножаются в органных культурах – это кусочки органов, выращенные вне организма и сохраняющие структуру данного органа.
ИНДИКАЦИЯ по цитопатогенному действию (ЦПД); образованию в клетках включений; появлению бляшек; феномену гемадсорбции; цветной пробе.
ЦПД может проявляться полной дегенерацией клеток – слущиванием клеток с поверхности стекла после их гибели , частичной дегенерацией – округлением клеток, слиянием и образованием симпластов
Образование включений в клетках – это скопление вирионов или отдельных компонентов в цитоплазме или в ядре клеток, выявляемые под микроскопом при специальном окрашивании.
Появление бляшек – зоны клеток, разрушенных вирусом (негативные колонии вирусов), обнаруживают в клеточных культурах, растущих на стекле и покрытых тонким слоем агара. Бляшки различаются по величине, форме, времени появления, поэтому данный тест используют для дифференциации вирусов.
Реакция гемадсорбции заключается в способности клеток, зараженных вирусами, адсорбировать на своей поверхности эритроциты, потому что эти клетки несут на поверхности гемагглютинины вируса.
Цветная реакция основана на изменении цвета питательной среды с индикатором, используемой для культур клеток.
При отсутствии ЦПД можно поставить реакцию интерференйи – исследуемая культура повторно заражается вирусом, вызывающим ЦПД. В положительном случае ЦПД будет отсутствовать (реакция интерференции положительная), если в исследуемом материале вируса не было, наблюдается ЦПД.