Коэффициент Де Ритиса

Коэффициент Де Ритиса – это отношение активностей АСТ/АЛТ. В норме он равен 0,6-0,8.

При вирусных гепатитах его значения варьируют в пределах 0,2-0,5. В разгар болезни коэффициент Де Ритиса может вырасти до 1,0 (активности АСТ и АЛТ очень высоки) и выше – это плохой прогностический признак, свидетельствующий о наступлении дистрофии печени.

Значение коэффициента Де Ритиса при обтурационных желтухах, циррозах и хронических заболеваниях печени, как правило, > 1, при этом наблюдается незначительное повышение активности ферментов АСТ и АЛТ.

Определение концентрации мочевины в сыворотке крови ферментативным методом

Принцип метода: Мочевина под действием фермента уреазы распадается на углекислый газ и аммиак. Аммиак реагирует с хромогеном (фенол-гипохлорит) в присутствии акселератора реакции нитропруссида натрия с образованием синего красителя:

Интенсивность окраски раствора при длине волны 500-650 нм прямо пропорциональна концентрации мочевины в нем.

Линейность метода: до 26,8 ммоль/л.

Норма:

Сыворотка крови – 2,5-6,4 ммоль/л (37С).

Оборудование и реагенты:

1. Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 500-650 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37С;

2. Секундомер;

3. Автоматические пипетки на 10 мкл, 2,5 мл;

4. Сыворотка крови;

5. Реагент (фенол-гипохлорит, нитропруссид натрия, уреаза в буфере, рН 6,5 );

6. Стандарт (раствор мочевины 10,6 ммоль/л);

7. Дистиллированная вода.

Клинико-диагностическое значение: Отклонения от нормы содержания мочевины в сыворотке крови зависят от скорости ее биосинтеза и выделения.

Увеличение концентрации мочевины в сыворотке крови – один из главных признаков нарушения функции почек. Из фракций остаточного азота раньше всего повышается уровень мочевины и может достигать 90% от всего остаточного азота.

Повышение концентрации мочевины в сыворотке крови может носить и внепочечный характер: при потере жидкости организмом, при усиленном распаде белков (острая желтая атрофия печени, тяжелые заболевания).

Уменьшение содержания мочевины в сыворотке крови наблюдается при заболеваниях печени (паренхиматозная желтуха, цирроз) по причине нарушенного синтеза мочевины в гепатоцитах.

Определение концентрации мочевой кислоты в биологических жидкостях ферментативным методом

Принцип метода: Мочевая кислота под действием фермента уриказы окисляется до алантоина с образованием перекиси водорода. Пероксид водорода реагирует с хромогеном (4-аминоантипирин с N-этил-N-(гидрокси-3-сульфопропил)-m-толуидином [TOOS]) с образованием сине-фиолетового красителя:

Интенсивность окраски раствора при длине волны 550 нм прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты в нем.

Линейность метода: 65,7 -1190 мкмоль/л.

Норма:

Сыворотка крови – мужчины – 214-488 мкмоль/л (25-37С);

женщины – 137-363 мкмоль/л (25-37С).

Концентрация мочевой кислоты сохраняется стабильной в сыворотке/ плазме в течение 3 дней при комнатной температуре, при температуре хранения 2-8С – в течение 7 дней, при температуре –20С – в течение 6 месяцев.

Стабильность концентрации мочевой кислоты в моче – 4 дня при комнатной температуре.

Оборудование и реагенты: